【摘要】： 前言 腺樣囊性癌(adenoid cystic carcinoma.ACC)是口腔頜面部涎腺癌中最常見的病理類型之一,發(fā)病率占涎腺腫瘤的10～15%。在頜面部區(qū),ACC主要發(fā)生在唾液腺,淚腺少見。其臨床病理學特性為嗜神經(jīng)生長,局部復發(fā)和遠處轉(zhuǎn)移。腺樣囊性癌常沿神經(jīng)或血行轉(zhuǎn)移,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例僅占5%-10%。該腫瘤生長緩慢,患者帶瘤生存期較長。 環(huán)氧合酶(cyclooxygenase,COX)是前列腺素(prostraglandin,PG)生物合成過程中一個重要的限速酶,有兩種形式,即COX-1和COX-2。COX的兩種亞型分布于不同組織中,且生理功能各異。COX-1表達于許多組織中,對調(diào)控內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定起重要作用。相反,COX-2是一種可誘導的酶,可被細胞外刺激如生長因子,促炎癥細胞因子等激活。最近研究表明,COX-2通常被發(fā)現(xiàn)于許多類型的癌癥,如結(jié)腸癌,肺癌,乳腺癌,胰腺癌和頭頸癌等,與不良的預后和低生存率相關。 現(xiàn)已對COX-2促進腫瘤發(fā)生進行了大量的研究。幾種機制被認為COX-2介導了的腫瘤發(fā)生活動。第一,PGE2,即COX-2的主要代謝產(chǎn)物,是一個生長促進因子,可能直接刺激癌細胞的增殖。第二,COX-2是一個血管生成刺激物,可以增加血管生成因子的產(chǎn)物并促進內(nèi)皮細胞遷移。第三,源于PGE2的COX-2是一個凋亡抑制分子,可能抑制由抗癌藥物誘導的凋亡。第四,PGE2是一個免疫調(diào)節(jié)分子,可能抑制自然殺傷細胞和巨噬細胞的抗腫瘤作用。第五,COX-2的表達可能增強腫瘤細胞的侵襲能力,且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關。 COX-2不僅在炎癥中發(fā)揮重要作用,而且還與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移有關。有研究表明,COX-2在OSCC中,尤其是腫瘤的早期階段,呈現(xiàn)過量表達。在某些腫瘤細胞的體外研究中,如:卵巢癌,食管癌,前列腺癌,肝癌,胃癌,結(jié)腸癌等,COX-2特異性抑制劑NS398可抑制腫瘤細胞增殖,促進腫瘤細胞凋亡。 本實驗應用環(huán)氧合酶特異性抑制劑—NS398處理人唾液腺腺樣囊性癌細胞系,研究其對該細胞增殖及凋亡的影響,以探討COX-2與唾液腺腺樣囊性癌的關系,為進一步研究唾液腺腺樣囊性癌的發(fā)病機制提供理論依據(jù),為唾液腺腺樣囊性癌的靶向治療提供了新的思路。 實驗材料 人唾液腺腺樣囊性癌細胞系:SACC-83,北京大學口腔醫(yī)學院惠贈。NS398(sigma);MTT(sigma);二甲基亞砜(sigma); 實驗方法 用NS398處理體外培養(yǎng)的SACC-83細胞,采用倒置相差顯微鏡和透射電鏡進行細胞形態(tài)觀察。應用MTT快速比色法,觀察NS398對SACC-83細胞的抑制作用,檢測NS398與SACC-83細胞間的時-效關系和量-效關系。實驗數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學處理,均數(shù)比較采用t檢驗和重復測量方差分析。 實驗結(jié)果 NS398作用后,SACC-83細胞胞漿空泡化,可見凋亡小體,細胞表面的微絨毛消失。含0,50,100,150,200μmol/L NS398的SACC-83細胞培養(yǎng)液,分別培養(yǎng)24,48,72,96h后,隨著作用時間的延長和藥物濃度的增加,抑制作用也增強。NS398在濃度150μmol/L作用72h后,抑制作用明顯(藥物濃度:P＜0.05;時間:P＜0.05)。 結(jié)論 NS398可抑制SACC-83細胞的增殖,并具有時間和濃度依賴性,NS398可能在唾液腺腺樣囊性癌的治療中發(fā)揮重要作用。
【學位授予單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R739.8
【圖文】：

倒置相差顯微鏡下，可見對照組SACC一83細胞貼壁生長良好，分布密集，細胞為多角形，胞間連接緊密，細胞核大，不規(guī)則，核內(nèi)染色質(zhì)豐富，呈不規(guī)則分布，核膜、核仁輪廓明顯(圖1，圖2，圖3)。而經(jīng)NS398(150四01/L)處理的實驗組SACC一83細胞分布散在，單位面積細胞數(shù)量減少，胞間連接被破壞，胞體回縮變圓，細胞體積縮小，細胞核與胞質(zhì)分辨不清、細胞間隙增大，胞膜有發(fā)泡現(xiàn)象，細胞多呈單個生長狀態(tài)，少量細胞脫落懸浮于培養(yǎng)液中，大部分細胞裂解成圓形小體(圖4，圖5，圖6)。二、透射電子顯微鏡觀察透射電鏡下見對照組SACC一83細胞微絨毛較多，核大，不規(guī)則，核仁多見，核內(nèi)染色質(zhì)豐富

倒置相差顯微鏡下，可見對照組SACC一83細胞貼壁生長良好，分布密集，細胞為多角形，胞間連接緊密，細胞核大，不規(guī)則，核內(nèi)染色質(zhì)豐富，呈不規(guī)則分布，核膜、核仁輪廓明顯(圖1，圖2，圖3)。而經(jīng)NS398(150四01/L)處理的實驗組SACC一83細胞分布散在，單位面積細胞數(shù)量減少，胞間連接被破壞，胞體回縮變圓，細胞體積縮小，細胞核與胞質(zhì)分辨不清、細胞間隙增大，胞膜有發(fā)泡現(xiàn)象，細胞多呈單個生長狀態(tài)，少量細胞脫落懸浮于培養(yǎng)液中，大部分細胞裂解成圓形小體(圖4，圖5，圖6)。二、透射電子顯微鏡觀察透射電鏡下見對照組SACC一83細胞微絨毛較多

24h實驗組，經(jīng)NS398(150四。1/L)處理的實驗組sAcc一83細胞因水份喪縮、核固縮，單位面積細胞數(shù)量減少，胞間連接被破壞，少量細胞脫落懸浮于壁細胞數(shù)量減少(X400)
【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 朱旬;甄林林;鄭偉;王漢晉;王萱儀;武正炎;;趨化因子受體CCR7在乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的作用[J];第四軍醫(yī)大學學報;2006年13期

2 肖藜;FAK家族的新成員PYK2[J];國外醫(yī)學(分子生物學分冊);2001年05期

3 朱棟元;馬廷行;唐曉勇;;非小細胞肺癌組織中趨化因子受體CCR7、CXCR4表達及其臨床意義[J];山東醫(yī)藥;2006年11期

4 孫曉菊,馬嘉,張輝,王緒凱,李建華;口腔鱗癌及癌前病變組織中Cox-2、VEGF的表達及意義[J];上�？谇会t(yī)學;2005年02期

5 孫曉菊;王緒凱;賈蘭玲;;NS-398對Tca8113細胞體外增殖的抑制作用[J];上海口腔醫(yī)學;2006年01期

6 帖曉靜,史成章,王麗玲,鄺勝利,劉岷;血管內(nèi)皮生長因子-C與CCR7在大腸癌中的表達[J];實用癌癥雜志;2005年01期

7 黃靜;陳新明;張佳麗;徐萌;王麗;;涎腺腺樣囊性癌中趨化因子4、整合素β_1表達的意義[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學雜志;2007年02期

本文編號：2858526