牙囊是牙齒萌出前的牙胚中圍繞造釉器和牙乳頭的疏松外胚間充質(zhì)組織。牙囊中含有形成牙周組織的前體細(xì)胞，在牙齒的發(fā)育過程中形成牙骨質(zhì)、牙周膜和固有牙槽骨。目前認(rèn)為牙囊靠近發(fā)育中的牙根的最內(nèi)層發(fā)育為成牙骨質(zhì)細(xì)胞，形成牙骨質(zhì)；靠近牙槽骨的外層細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞分泌骨基質(zhì)；中間層發(fā)育為成纖維細(xì)胞并產(chǎn)生牙周膜的細(xì)胞外基質(zhì)。由生長因子和細(xì)胞分子組成的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)控制牙囊細(xì)胞的發(fā)育和功能。牙骨質(zhì)的形成依靠牙根的形成，牙根形成開始于內(nèi)釉上皮和外釉上皮增殖形成的Hertwig’s上皮根鞘，來源于上皮根鞘的刺激開始了牙囊前體細(xì)胞向成牙骨質(zhì)細(xì)胞的分化。這些刺激物包括釉基質(zhì)蛋白、層粘連蛋白、Ⅰ型膠原和轉(zhuǎn)化生長因子β超家族等。 目前對于牙囊細(xì)胞的成骨特性研究集中于以下方面：1．體外培養(yǎng)培養(yǎng)牙囊細(xì)胞在體外的礦化和和體內(nèi)成骨實(shí)驗(yàn)研究以及在此過程中的相關(guān)基因表達(dá)；2．胰島素、地塞米松和BMP-2誘導(dǎo)下牙囊細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化過程中，OCN、BMP-2、Cbfal、DLX—5、MSX—2等基因的mRNA的表達(dá)。迄今為止，已發(fā)現(xiàn)了許多對成骨細(xì)胞有影響的因素，其中包括多種生長因子如：骨形成蛋白(BMPs)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGFs)、胰島素樣生長因子(IGFs)、血小板衍生生長因子(PDGF)、表皮生長
【學(xué)位單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2006
【中圖分類】：R78
【部分圖文】：

化物酶;滴加羊血清37℃溫箱封閉30mni。滴加一抗后置入濕盒4℃過夜。一抗為兔抗人波形絲蛋白單克隆抗體。次日在37℃溫箱復(fù)溫lh，滴加二抗37℃孵育30min;加入辣根過氧化物酶復(fù)合物37℃下30mni;DAB加30nli/L過氧化氫液光鏡下控制顯色。用PBS液替代一抗設(shè)立空白對照，其余步驟不變。經(jīng)蘇木精核復(fù)染，逐級(jí)脫水透明后封片。2.結(jié)果接種72h后可見經(jīng)消化松散貼壁的組織塊周圍有細(xì)胞呈放散狀爬出，細(xì)胞形態(tài)多呈長梭形。組織塊周圍細(xì)胞亦生長旺盛，靠近組織塊邊緣混雜有部分立方形多角形形扁平細(xì)胞，細(xì)胞核大，考慮為上皮來源的細(xì)胞混入。培養(yǎng)的人牙囊細(xì)胞生長爬滿需要14天。此時(shí)可以傳代，利用差速消化法去除混雜的上皮細(xì)胞，一般在第二代以后就可以得到純化的牙囊細(xì)胞。培養(yǎng)的人牙囊細(xì)胞呈梭形、紡錘形或多角形，具有成纖維細(xì)胞特性。波絲蛋白細(xì)胞染色陽性(圖l、圖2)。

化物酶;滴加羊血清37℃溫箱封閉30mni。滴加一抗后置入濕盒4℃過夜。一抗為兔抗人波形絲蛋白單克隆抗體。次日在37℃溫箱復(fù)溫lh，滴加二抗37℃孵育30min;加入辣根過氧化物酶復(fù)合物37℃下30mni;DAB加30nli/L過氧化氫液光鏡下控制顯色。用PBS液替代一抗設(shè)立空白對照，其余步驟不變。經(jīng)蘇木精核復(fù)染，逐級(jí)脫水透明后封片。2.結(jié)果接種72h后可見經(jīng)消化松散貼壁的組織塊周圍有細(xì)胞呈放散狀爬出，細(xì)胞形態(tài)多呈長梭形。組織塊周圍細(xì)胞亦生長旺盛，靠近組織塊邊緣混雜有部分立方形多角形形扁平細(xì)胞，細(xì)胞核大，考慮為上皮來源的細(xì)胞混入。培養(yǎng)的人牙囊細(xì)胞生長爬滿需要14天。此時(shí)可以傳代，利用差速消化法去除混雜的上皮細(xì)胞，一般在第二代以后就可以得到純化的牙囊細(xì)胞。培養(yǎng)的人牙囊細(xì)胞呈梭形、紡錘形或多角形，具有成纖維細(xì)胞特性。波絲蛋白細(xì)胞染色陽性(圖l、圖2)。

圖9.實(shí)驗(yàn)組VonKossa染色(x20)等[1田通過體外培養(yǎng)牛牙囊細(xì)胞并提測，結(jié)果表明，細(xì)胞表達(dá)低水平的堿性骨橋蛋白和I型膠原的mRNA，未檢達(dá)。王演等〔’ooj在體外培養(yǎng)的人胚胎的酸酶mRNA的低水平表達(dá)。以上研究結(jié)成骨特性。Zhoa等[69]的研究表明體外胞在rhBMP一2的誘導(dǎo)下向成骨細(xì)胞、rhBMP一2能增強(qiáng)骨鈣蛋白、骨涎蛋
【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 張楠楠;不同運(yùn)動(dòng)方式對模擬失重大鼠骨密度、骨代謝生化指標(biāo)及股骨Osterix表達(dá)的影響[D];華東師范大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2851608