目的：通過比較烏魯木齊市維吾爾族不同齲敏感兒童變形鏈球菌臨床分離株黏附及合成胞外多糖能力的差異，以及其黏附相關(guān)基因spaP-a，spaP-c，spaP-pv和糖代謝相關(guān)基因gtfB，gtfC，Srv~+遺傳多態(tài)性的比較，探討高齲和無齲兒童致齲能力差異的相關(guān)機制。方法：1.利用酶標儀檢測高齲組(dmft≥5)和無齲組(dmft=0)變形鏈球菌在牛心腦浸粉液體培養(yǎng)基中對玻壁的黏附情況。2.分別對高黏附組和低黏附組變鏈菌表面蛋白A區(qū)、PV區(qū)、C末端編碼基因spaP-a，spaP-c，spaP-pv經(jīng)限制性內(nèi)切酶HaeⅢ、AluⅠ酶切分型，利用PCR-RFLP比較各基因型在兩組細菌中的分布情況。3.采用蒽酮法測定高齲組與無齲組變鏈菌在生物膜狀態(tài)下合成胞外多糖的量。4.對合成水不溶性葡聚糖較高組和較低組變鏈菌葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶編碼基因gtfB、gtfC，以及表面蛋白可變區(qū)V區(qū)編碼基因SrV~+，經(jīng)限制性內(nèi)切酶BsrⅠ、SsPⅠ、DdeⅠ進行酶切分型，利用PCR-RFLP比較各基因型在兩組細菌中的分布情況。結(jié)果：1.高齲組變鏈菌玻壁黏附比率平均為(33.928.79)%，高于無齲組(27.537.45)%，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。2. spaP-a經(jīng)HaeⅢ酶切后出現(xiàn)兩種基因型，且在不同黏附力菌株間的分布不同(P＜0.05)。spaP-c，spaP-pv經(jīng)AluⅠ酶切后均表現(xiàn)為同一基因型。3.高齲組合成水不溶性葡聚糖量平均為0.33330.0479mg/ml，高于無齲組0.23560.0507mg/ml，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；高齲及無齲組變鏈菌臨床菌株生物膜狀態(tài)下合成水不溶性葡聚糖量為0.33110.0576mg/ml高于水溶性葡聚糖量0.25780.0632mg/ml，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。4. gtfB、gtfC經(jīng)BsrⅠ和SsPⅠ酶切后分別表現(xiàn)出三種和兩種基因型，gtfB在WIG合成量較高和較低的菌株中分布不同(P＜0.05)；SrV~+經(jīng)DdeⅠ后出現(xiàn)四種基因型，且四種基因型在兩組菌株的構(gòu)成情況不同(P＜0.05)。測序證實spaP-a、gtfB、SrV~+基因的特異性堿基突變引起酶切位點改變而產(chǎn)生基因多態(tài)性。結(jié)論：維吾爾族不同齲敏感兒童變鏈菌臨床分離株黏附及合成胞外多糖能力不同，spaP-a、gtfB、SrV~+表現(xiàn)出的遺傳多態(tài)性可能是導致兩組變鏈菌黏附能力與合成胞外多糖能力差異的原因之一。為進一步研究維吾爾族不同齲敏感兒童致齲性差異的機制奠定基礎。
【學位單位】：新疆醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2012
【中圖分類】：R788.1
【文章目錄】：
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摘要
Abstract
前言
內(nèi)容與方法
    1 材料和儀器
    2 內(nèi)容與方法
        2.1 制備菌懸液
        2.2 維吾爾族高齲、無齲兒童變鏈菌臨床分離株形成黏附能力的比較
        2.3 變鏈菌不同黏附能力菌株表面蛋白遺傳多態(tài)性的比較
        2.4 維吾爾族不同齲敏感兒童變鏈菌臨床分離株生物膜狀態(tài)下合成胞外多糖能力的比較
        2.5 變鏈菌不同葡聚糖合成能力菌株 gtfB、gtfC 基因以及表面蛋白可變區(qū) SrV~+遺傳多態(tài)性的比較
    3 質(zhì)量控制
    4 統(tǒng)計分析方法
    附技術(shù)路線圖
結(jié)果
討論
小結(jié)
致謝
參考文獻
綜述
    參考文獻
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【參考文獻】

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本文編號：2850346