發(fā)布時間：2020-10-14 10:08

　　 骨吸收速度是決定正畸牙移動效率的關鍵性因素之一。血小板衍生生長因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)作為骨代謝中重要的細胞因子,既可以促進成骨細胞增殖,又參與破骨過程。前期系列實驗表明:在大鼠正畸牙牙周局部注射低劑量重組人血小板衍生生長因子-BB(recombinant human platelet derived growthfactor-BB,rhPDGF-BB)后,壓力側破骨細胞計數(shù)增加,整合素α_vβ_3表達增強,從而加速了正畸牙的移動。黏著斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)是整合素α_vβ_3介導的細胞內信號傳導重要環(huán)節(jié)的激酶,對于破骨細胞募集、黏附以及細胞內骨架的重組發(fā)揮著重要的作用。本實驗將觀察外源性rhPDGF-BB對正畸牙移動骨改建過程中破骨細胞內FAK表達的影響,探討rhPDGF-BB促進正畸牙移動的作用機制。 目的:觀察rhPDGF-BB對大鼠正畸牙移動過程中破骨細胞內FAK表達的影響。探討rhPDGF-BB對正畸牙移動過程骨改建中破骨細胞的作用及其下游信號通路。 方法:于SD大鼠上頜左側第一磨牙和上切牙間安放矯治裝置并施以50g力,建立大鼠上頜磨牙近中移動模型。將80只模型大鼠隨機分為對照組(A組)和實驗組(B組),每組40只,再按觀察時間(1、4、7、10、14天)不同將A組和B組各分五個亞組(A1/B1、A4/B4、A7/B7、A10/B10和A14/B14),每組8只。實驗組從動物模型建立開始每2天于左側上頜第一磨牙頰側粘膜處注射10ng的rhPDGF-BB,注射體積0.1ml,對照組注射相同容量的磷酸鹽緩沖鹽水(phosphate-buffered saline,PBS)。觀察1、4、7、10、14天(從觀察第二天計算)處死大鼠,多聚甲醛透心灌注固定。分別于實驗前后對左上頜磨牙區(qū)取模,硬石膏灌注模型,用YR-MV1.0顯微圖像測量軟件測量模型中正畸牙移動的距離。取大鼠左側上頜第一磨牙及牙周組織標本,采用抗酒石酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)組織化學法觀察壓力側破骨細胞數(shù)量變化,免疫組織化學方法觀察破骨細胞內FAK表達變化并進行灰度值的分析。 結果:1.正畸牙移動距離測量:①隨加力時間的增加,A組和B組正畸牙移動距離均增加。注射rhPDGF-BB的B組,除第1天以外,其余正畸牙移動距離均大于A組,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。2.壓力側破骨細胞計數(shù):①B組壓力側破骨細胞計數(shù)從加力1天開始上升,第4天達高峰,隨后開始下降;A組總體趨勢與B組相同,但其高峰在第7天,上升及下降均較B組平緩。②在各觀察時間點,B組壓力側破骨細胞計數(shù)均大于A組(P＜0.01)。③A組組內各時間點比較差異均有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。B組中,除第1天與第14天比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)外,其余各組比較差異均有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。3.破骨細胞中FAK的表達:①FAK的表達隨時間增加先升高后下降,在各觀察點B組FAK表達均高于A組(P＜0.05),表達高峰均在第4天。②組內比較,B組除第10天與14天比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)外,其余組內不同時間點比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);A組除第1天與14天比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)外,其余組內各時間點比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。 結論:1.rhPDGF-BB作為局部調節(jié)因子促進了正畸牙移動骨改建過程。2.在大鼠正畸牙壓力側牙槽骨改建的過程中,FAK參與了整合素α_vβ_3在破骨細胞信號轉導的下游通路,其表達能被外源性的rhPDGF-BB所調節(jié)。
【學位單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2009
【中圖分類】：R783.5
【部分圖文】：

0.20~的結扎絲穿過大鼠左上領第一和第二磨牙之間環(huán)扎第一磨牙，將鎳欽螺旋拉簧的一端固定于第一磨牙的近中并用測力計測量拉簧拉力為509，另一端用結扎絲固定于前牙溝槽內，形成正畸牙加力裝置(圖1)。為防止加力裝置咬斷;減少上前牙因與下前牙咬合磨耗所導致的萌出，磨短下前牙。在實驗第1、3、5、7、9、11、13d(從加力當天計算)，將大鼠麻醉后，于第一磨牙頰側牙跟粘膜下注射IO0ng/ml的PDGF一 BB0.lml，對照組注射等量PBS，每次注射時根據(jù)上下前牙萌出的情況選擇性磨短下前牙，并檢查正畸矯治裝置，清潔大鼠口腔。術后予以雞蛋等軟食飼養(yǎng)，自由飲水。圖1大鼠正畸模型加力裝置 Fig1DiagramoforthodontiesaPPlianee2.3實驗動物分組SD大鼠隨機分為兩個大組:對照組(A組)和實驗組(B組)，每組40只。再按觀察時間(1、4、7、10、14d)不同將A組和B組各分五個亞組(Al忍1、A4舊4、A7厄7、A10忍10和A14忍14)，每個亞組8只。B組從動物模型建立開始

遵義醫(yī)學院碩士學位論文rhPDCF一BB對大鼠正畸牙移動過程中破骨細胞隊K表達的影響A14“子，，‘工，.︸、、4‘臼，Q甘/|卜。，二，二一月，伙一‘‘‘入才;/氣，擴‘戶二云卜、、.r4.護-口’、‘，，’毛吸八龜.，一魂‘..辦:、以氣、r鉆月﹄.‘卜、‘、‘‘、、、悶尸診一·“’產.、’、、曳扮:.、一共碗二;少、’‘氣，-湯‘小洲幾"廣"，’AI:對照組加力1天A4:對照組加力4天A7:對照組加力7天Bl:實驗組加力1天AIO:對照組加力10天B10:實驗組加力10天B4:實驗組加力4天A14:對照組加力14天B14:實驗組加力14天B7:實驗組加力7天....悶卜所指為破骨細胞圖3壓力側破骨細胞組織學觀察(x400)Fig3HistologiealobservationofosteoelastsonthePressureside

遵義醫(yī)學院碩士學位論文鯉翌理翌衛(wèi)鯉些哩絲絲中破骨細胞FAK表達的影響夕尸夕了，弓與少哎咋.，，獷、t聲了B14聲萬‘_，‘，;價，-，沙/，.哆J護，尸;弓.’;‘萬矛吹‘.:.一、.吸丫一、，;產/產.車矛、r’汕鉀‘:‘.丈州，戶翻卜洲了.\、女刃，“屯才/，../.獷才1f.;妙‘.︸、J.口弓護.、."一’扣/t’-月‘產Jf之·、一，.減，之，、，./自J’l幾愁!.了AI:對照組加力1天A4:對照組加力4天A7:對照組加力7天Bl:實驗組加力l天A10:對照組加力10天B4:實驗組加力4天A14:對照組加力14天B7:實驗組加力7天....峭卜所指為FAK圖7破骨細胞中FAK的表達(x400)B10:實驗組加力10天B14:實驗組加力14天表達陽性破骨細胞Fig7ExPresssionofFAKinosteoelasts(X400)
【參考文獻】

相關期刊論文 前9條

1 楊健,譚穎徽,裘松波;核因子-κB受體活化因子配體誘導大鼠骨髓破骨細胞形成的實驗研究[J];重慶醫(yī)學;2004年03期

2 楊紅軍;整合素激活FAK介導的信號轉導通路與大腸癌[J];國外醫(yī)學(腫瘤學分冊);2003年03期

3 楊芬,李瑩輝;整合素和細胞骨架在細胞力傳導中的作用[J];航天醫(yī)學與醫(yī)學工程;2002年04期

4 楊健,譚穎徽,裘松波;核因子-κB受體活化因子配體在大鼠正畸牙壓力側骨改建中的作用[J];口腔醫(yī)學研究;2004年03期

5 駱泉豐,王興;血小板源性生長因子在骨生成和改建中的調節(jié)作用[J];上海口腔醫(yī)學;2004年03期

6 鎬英杰;高坤;王義生;李杰;;降鈣素對破骨細胞增殖和凋亡的調節(jié)作用[J];中國組織工程研究與臨床康復;2008年28期

7 金大地,張忠民,陳建庭;血小板衍生生長因子-BB對破骨細胞功能影響的實驗研究[J];中華骨科雜志;2000年05期

8 劉小菁,吳紅斌,傅華,黃明慧,任敏;腫瘤生長因子β_1及血小板衍生生長因子對肝竇內皮細胞整合素α_6β_1及黏著斑激酶表達的影響[J];中華消化雜志;2001年09期

9 黃培新;劉恒輅;鐘敏章;郭傳勇;;黏著斑激酶在結腸癌細胞中的表達及對其遷移的影響[J];中國中西醫(yī)結合消化雜志;2006年04期

本文編號：2840530