MMP2、CD147和CyPA在環(huán)孢素A所致牙齦增生中的表達及意義

發(fā)布時間：2020-10-09 23:38

　　背景環(huán)孢素A（Cyclosporine A，CsA）是一種疏水性的含11個氨基酸的環(huán)多肽，特異性抑制由T細胞介導的免疫反應。作為一種強效的免疫抑制劑，已在全球范圍內(nèi)廣泛應用于器官移植后的抗排斥反應和一些自身免疫性疾病的治療。然而，與其相關的副作用也逐步顯現(xiàn)，主要的系統(tǒng)性副作用包括有腎毒性、高膽固醇血癥、多毛癥、高血壓等，CsA誘導的牙齦肥大（CsAInduced Gingival Overgrowth，CIGO）則是其在口腔內(nèi)的一個嚴重的臨床問題，嚴重影響到了病人的生存質(zhì)量。因此，探究CIGO的發(fā)病機制具有十分重要的臨床意義。研究目的本研究在構建大鼠CIGO病理模型的基礎上，通過對大鼠牙齦增生情況的組織學和形態(tài)學評價，探討菌斑存在與否對CIGO的產(chǎn)生有無影響；運用免疫組化和RT-PCR的方法觀察比較CIGO與正常牙齦內(nèi)CD147、MMP-2、CyPA的表達的差異。從膠原纖維降解失衡的角度，初步探討CIGO的發(fā)病機制。研究方法 1.40只SD雄性大鼠，全麻下拔除大鼠左側上頜磨牙，在同一SD大鼠口內(nèi)建立有/無菌斑條件下的CIGO模型。經(jīng)過2周的傷口愈合期后，將大鼠隨機分為CsA組和對照組，分別給予CsA橄欖油溶液和純橄欖油胃飼。給藥4周后，定期觀察大鼠牙齦增生情況。 2.4周后，處死動物，運用形態(tài)學和組織學方法評估上頜雙側牙齦增生程度；分析和比較MMP-2、CD147、CyPA蛋白在牙齦組織中的表達。 3.分別取實驗動物上頜雙側牙齦組織，抽提總RNA，逆轉錄合成cDNA行RT-PCR檢測，從mRNA水平檢測和比較MMP-2、CD147、CyPA在上頜兩側牙齦組織中表達水平的差異。結果 1.造模后第2周起，部分CsA組大鼠下前牙唇側牙齦黏膜深紅，部分牙齦增厚呈隆起狀，甚至牙齦出血；至第4周，可見CsA組大鼠下前牙唇側牙齦黏膜紫紅，牙齦增厚呈球形腫大；逐漸出現(xiàn)少食、消瘦、行動遲緩等癥狀；大鼠上頜雙側牙齦增生程度均較嚴重。光鏡下可見，牙齦上皮過度角化，棘層顯著增生，釘突伸長達結締組織深層。對照組大鼠牙齦在觀察期內(nèi)無明顯變化。上述結果表明，CIGO模型構建成功。 2.雙側上頜CIGO牙齦組織中MMP-2、CD147、CyPA蛋白表達情況：有牙側和無牙側比較，差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）；CsA組MMP-2表達明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P0.01）；兩組動物牙齦組織的CD147和CyPA蛋白表達未見明顯差異（P0.05）。 3. CsA對牙齦組織中MMP-2、CD147、CyPAmRNA表達的影響：與正常對照組相比，CsA組MMP-2、CD147和CyPA的mRNA表達水平均明顯降低（P0.05）。結論我們認為，菌斑可能是CIGO的相關因子，但并非始動因子。CsA誘導牙齦增生的可能作用機制是，CsA與CyPA形成CsA-CyPA復合物，競爭性抑制CyPA作為CD147伴侶蛋白和運輸?shù)鞍椎淖饔茫钄郈D147對MMPs的上調(diào)作用，導致膠原降解失衡，膠原纖維在牙齦組織中過度沉積，表現(xiàn)為牙齦組織增生。
【學位單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2012
【中圖分類】：R781.4
【部分圖文】：

牙齦,前牙,大鼠,齦乳頭