本文關鍵詞：慢性牙周炎普雷沃菌的耐藥基因篩查及變黑普雷沃菌的初步毒力分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：研究慢性牙周炎患者在治療過程中厭氧菌的菌群變化,對分離鑒定出的厭氧菌進行抗生素敏感性分析及耐藥基因檢測,為合理選用抗生素治療慢性牙周炎中的厭氧菌感染提供理論依據,為明確牙周普雷沃菌耐藥性演變提供生物學基礎。初步分析其中變黑普雷沃菌的毒力特征,了解變黑普雷沃菌的毒力與臨床癥狀的關系。方法：1.2012年1月至2013年12月,于復旦大學附屬華山醫(yī)院口腔科選取12例慢性牙周炎患者(男6例,女6例,年齡：41±10歲)為研究對象。初診及每次復診均采用椅旁慢性牙周炎牙周袋取樣,接種于厭氧基礎平板,應用簡易厭氧袋培養(yǎng)法,經兩至三次耐氧實驗,培養(yǎng)的牙周專性厭氧菌以16S rRNA分子生物學技術進行鑒定。2.根據美國臨床實驗室標準化協(xié)會(Clinical Laboratory Standards Institution)推薦的瓊脂稀釋法參考方案(M11-S220)分別測定牙周專性厭氧菌對臨床常用抗菌藥物頭孢曲松、頭孢拉定、頭孢克肟、阿莫西林、克林霉素、羅紅霉素、甲硝唑、多西環(huán)素、亞胺培南的敏感性。3.采用PCR法分別檢測普雷沃菌株nim、cfxA、ermF、tetQ耐藥基因,研究其普遍性與發(fā)生耐藥之間的關系。4.根據16SrRNA分子生物學技術的鑒定結果,選取了臨床患者標本培養(yǎng)所獲得的5株變黑普雷沃菌以小鼠背部膿腫形成實驗初步分析變黑普雷沃菌的毒力特征。結果：1.簡易厭氧袋培養(yǎng)法分離培養(yǎng)的細菌具有良好的專性厭氧特性及傳代增殖能力。共計培養(yǎng)得84株專性厭氧菌,經16S rRNA序列測定技術鑒定,其中普雷沃菌68株,其他菌株16株,普雷沃菌的分離率81%。2.藥敏試驗結果顯示：慢性牙周炎中普雷沃菌對亞胺培南的耐藥率為0%,對頭孢曲松、頭孢拉定、頭孢克肟的耐藥率分別為2.94%、4.41%和2.94%,對克林霉素、羅紅霉素、阿莫西林的耐藥率分別為22.06%、17.64%和8.82%,對甲硝唑和多西環(huán)素耐藥率分別為4.88%和2.94%。3.普雷沃菌耐藥菌株的耐藥基因檢測結果顯示：68株普雷沃菌中,cfxA檢出率為73.53%,相關的耐藥菌株cfxA檢出率為90%；ermF檢出率為58.82%,相關的耐藥菌株ermF檢出率為71.43%；tetQ檢出率為51.47%,相關的耐藥菌株tetQ檢出率為50%；nim檢出率為2.94%,相關的耐藥菌株nim檢出率為40%。用藥前,73.33%普雷沃菌含有耐藥基因,耐藥率1.47%；用藥后,97.37%普雷沃菌含有耐藥基因,耐藥率52.63%。4.5株產黑普雷沃菌與陰性對照相比均有毒力,與陽性對照變黑普雷沃菌ATCC25845相比有1株毒力相當,其余四株毒力較弱,毒力強弱與臨床患者疾病程度正相關。結論：1.普雷沃菌屬是慢性牙周炎厭氧菌群中的優(yōu)勢菌之一,隨著牙周系統(tǒng)性治療的延續(xù),厭氧菌的種類逐漸減少。2.慢性牙周炎來源的普雷沃菌對抗菌藥物的耐藥性不同,對口腔臨床常用藥物,克林霉素及羅紅霉素呈現(xiàn)的耐藥性較高為22.06%,17.64%；對青霉素類和甲硝唑的耐藥性的增長也需要引起注意。因此,在使用抗生素治療慢性牙周炎之前,建議進行厭氧菌抗生素敏感性監(jiān)測,以減少耐藥菌的產生。3.不同耐藥基因在耐藥的普雷沃菌中檢出率存在差異。本實驗中,cfxA、 ermF耐藥基因在耐藥的普雷沃菌中檢出率較高；而多西環(huán)素及甲硝唑耐藥菌株的耐藥基因檢出率較低,因此對于tetQ及nim的耐藥基因的普遍性還需進一步研究。經過用藥患者的牙周袋內檢測到的細菌出現(xiàn)不同程度的耐藥,原有的耐藥基因與耐藥的演變存在極大的相關性。4.臨床變黑普雷沃菌的毒力分析顯示毒力與臨床上標本來源患者的慢性牙周炎嚴重程度及治療周期相關。慢性牙周炎反復發(fā)作可能與滯留有毒力較強的細菌有關。
【關鍵詞】：慢性牙周炎 厭氧菌 普雷沃菌 藥敏試驗 耐藥基因 毒力
【學位授予單位】：復旦大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R781.42
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 縮略詞表8-10
• 前言10-12
• 第一部分 慢性牙周炎患者治療過程中厭氧菌的分離培養(yǎng)與鑒定12-21
• 材料與方法12-16
• 結果16-19
• 討論19-20
• 結論20-21
• 第二部分 普雷沃菌對9種抗生素的耐藥性檢測及相關耐藥基因的篩查21-38
• 材料與方法22-28
• 結果28-32
• 討論32-37
• 結論37-38
• 第三部分 測定變黑普雷沃菌的生長曲線及其毒力的初步分析38-45
• 材料和方法38-40
• 結果40-44
• 討論44
• 結論44-45
• 全文總結45-46
• 參考文獻46-53
• 綜述53-62
• 參考文獻59-62
• 學位論文和科研成果62-63
• 致謝63-64

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1 徐蒙;慢性牙周炎普雷沃菌的耐藥基因篩查及變黑普雷沃菌的初步毒力分析[D];復旦大學;2014年

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本文編號：283186