本文關(guān)鍵詞：舌鱗狀細(xì)胞癌中STAT3調(diào)控miRNA-21表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：口腔頜面-頭頸癌是世界第六大常見癌癥,舌癌為口腔癌中最常見的惡性腫瘤,其中鱗狀細(xì)胞癌占舌癌病理類型的80%以上,因而闡明舌鱗狀細(xì)胞癌發(fā)病機(jī)理、尋找更為有效的治療手段是舌癌研究領(lǐng)域的關(guān)鍵問題。 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄活化因子3(signal transducers and activators of transcription3, STAT3)是信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄活化因子家族的重要成員。STAT3對(duì)維持正常生理具有重要作用,在正常細(xì)胞和組織中,它的活化狀態(tài)是短暫而且被精確調(diào)控的。STAT3的持續(xù)激活可導(dǎo)致細(xì)胞異常增殖和惡性轉(zhuǎn)化。研究證實(shí)STAT3在多種惡性腫瘤如乳腺癌、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌、結(jié)直腸癌、卵巢癌、多發(fā)性骨髓瘤、白血病等均有過度表達(dá),并與腫瘤的生長(zhǎng)、分化、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。STAT3可被多種細(xì)胞因子(IL-6)、受體酪氨酸激酶(EGFR)和非受體酪氨酸激酶(Jak、Src、Abl等)激活,是多個(gè)致癌性酪氨酸激酶信號(hào)通道的匯聚焦點(diǎn)�；罨腟TAT3相互作用形成同源或異源的二聚體轉(zhuǎn)入細(xì)胞核,參與調(diào)節(jié)與腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡、轉(zhuǎn)移相關(guān)的靶基因的轉(zhuǎn)錄。研究顯示在頭頸鱗癌患者中,腫瘤組織和正常組織上皮中STAT3的表達(dá)水平均高于非癌患者正常上皮。提示STAT3信號(hào)通路的持續(xù)激活在人舌鱗狀細(xì)胞癌的進(jìn)展和侵襲中發(fā)揮重要作用。 研究證實(shí)miRNA(microRNA)的表達(dá)與多種癌癥相關(guān),異常表達(dá)的miRNA在癌癥的發(fā)生發(fā)展過程中起到類似癌基因或抑癌基因的作用。目前,研究發(fā)現(xiàn)多種miRNA在舌癌中表達(dá)失調(diào)并與舌癌的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)。miR-21是人類細(xì)胞或組織中發(fā)現(xiàn)較早的、存在較為廣泛的miRNA之一。早期的研究證實(shí)miR-21在膠質(zhì)瘤、肺癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤中表達(dá)升高；并能夠通過抑制PTEN、PDCD4、TIMP3、TIMP-1、RECK、p53等抑癌基因的翻譯過程參與調(diào)控多種惡性腫瘤的發(fā)生。一項(xiàng)miRNA表達(dá)譜研究結(jié)果提示miR-21在頭頸部鱗狀細(xì)胞癌和食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系中均為高表達(dá)。另一項(xiàng)舌癌miRNA表達(dá)譜研究同樣表明在103例舌鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本中miR-21為高表達(dá),反義miR-21能夠抑制舌癌細(xì)胞系SCC-15和Cal-27的生長(zhǎng)。我小組前期研究提示：轉(zhuǎn)染反義miR-21寡核苷酸后,Tb3.1舌癌細(xì)胞增殖與侵襲能力被抑制。上述研究結(jié)果都提不]niR-21可能以一種原癌基因的身份影響著舌癌的發(fā)生、進(jìn)展。 近年來(lái)miRNA與STAT家族成員的相互關(guān)系,尤其miR-21和STAT3信號(hào)通路的相互作用得到初步闡述。利用生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)了miR-21編碼基因啟動(dòng)子區(qū)域有STAT3的結(jié)合位點(diǎn)。編碼miR-21基因的調(diào)節(jié)區(qū)位于跨膜49基因的內(nèi)含子中,并為上游增強(qiáng)子所調(diào)控,而該增強(qiáng)子調(diào)控序列含有兩個(gè)STAT3的結(jié)合位點(diǎn),推測(cè)IL-6/STAT3抗凋亡信號(hào)通道是miRNA-21潛在的調(diào)控機(jī)制。研究顯示在骨髓瘤細(xì)胞中,miR-21的轉(zhuǎn)錄可受到其上游包含2個(gè)STAT3結(jié)合位點(diǎn)的增強(qiáng)子的直接調(diào)控。敲低STAT3的表達(dá)后發(fā)現(xiàn)可阻礙由IL-6介導(dǎo)的miR-21的表達(dá)。 然而,目前在舌鱗癌中STAT3與miR-21之間的調(diào)控關(guān)系的研究尚未見報(bào)道。本課題通過大量的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究明確在舌鱗狀細(xì)胞癌中STAT3轉(zhuǎn)錄調(diào)控miR-21表達(dá)的分子機(jī)制。共分以下二部分： 第一部分：應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)60例人舌鱗狀細(xì)胞癌不同分化程度的臨床手術(shù)標(biāo)本中STAT3的表達(dá)；應(yīng)用原位雜交法檢測(cè)標(biāo)本中miR-21的表達(dá),結(jié)果發(fā)現(xiàn)STAT3與miR-21在舌鱗癌中均為異常高表達(dá),且兩者的表達(dá)間存在正性相關(guān)性。 第二部分：應(yīng)用western blot、RT-PCR、免疫組化、熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn),染色體免疫共沉淀等多種體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)方法驗(yàn)證舌鱗癌中STAT3轉(zhuǎn)錄調(diào)控miR-21表達(dá)的分子機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：舌鱗狀細(xì)胞癌 JAK/STAT3 miR-21 轉(zhuǎn)錄
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R739.86
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明10-11
• 前言11-14
• 研究現(xiàn)狀、成果11-13
• 研究目的、方法13-14
• 一、舌鱗狀細(xì)胞癌中STAT3與miR-21表達(dá)的相關(guān)性研究14-26
• 1.1 前言14
• 1.2 材料和方法14-20
• 1.2.1 標(biāo)本與試劑來(lái)源14-18
• 1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法18-20
• 1.2.3 統(tǒng)計(jì)方法20
• 1.3 結(jié)果20-22
• 1.3.1 STAT3在舌鱗癌中過表達(dá)并與分化程度負(fù)相關(guān)20-21
• 1.3.2 miR-21在舌鱗癌中過表達(dá)并與分化程度負(fù)相關(guān)21-22
• 1.3.3 STAT3與miR-21在舌鱗癌中正性相關(guān)22
• 1.4 討論22-25
• 1.5 小結(jié)25-26
• 二、STAT3調(diào)控miR-21表達(dá)的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究26-66
• 2.1 前言26-27
• 2.2 材料和方法27-41
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料27-29
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法29-41
• 2.2.3 統(tǒng)計(jì)方法41
• 2.3 結(jié)果41-63
• 2.3.1 STAT3、pSTAT3與miR-21在舌癌細(xì)胞系中的表達(dá)41-42
• 2.3.2 MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)WP1066半數(shù)抑制濃度IC_(50)值42-43
• 2.3.3 WP1066處理后舌癌細(xì)胞STAT3與miR-21的表達(dá)變化43-49
• 2.3.4 WP1066處理后舌癌細(xì)胞的表型變化49-57
• 2.3.5 熒光素酶基因報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測(cè)WP1066處理后舌癌細(xì)胞熒光活性變化57-58
• 2.3.6 染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證舌癌細(xì)胞中STAT3轉(zhuǎn)錄調(diào)控miR-21的表達(dá)58-59
• 2.3.7 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)59-63
• 2.4 討論63-65
• 2.5 小結(jié)65-66
• 結(jié)論66-67
• 參考文獻(xiàn)67-72
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明72-73
• 綜述 STAT3的研究進(jìn)展73-85
• 綜述參考文獻(xiàn)80-85
• 致謝85-86

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 楊玉彬;韋炳華;李瓊;秦鑒;;禁食療法調(diào)節(jié)月經(jīng)周期的病例報(bào)道及其機(jī)理探討[J];今日藥學(xué);2013年11期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 潘倩;高加索人群銀屑病易感位點(diǎn)與中國(guó)漢族人尋常型銀屑病相關(guān)性研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

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本文編號(hào)：283373