發(fā)布時間：2020-09-24 08:38

　　 目的:探討鎳鉻烤瓷合金、鈷鉻烤瓷合金和金鉑烤瓷合金,以及鎳鉻烤瓷合金表面鍍金對體外培養(yǎng)的人牙齦成纖維細(xì)胞(Human gingival fibroblast,HGF)分泌免疫細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、生長與增殖活性以及附著生長能力等生物學(xué)行為的影響。從而評價其生物相容性,為臨床烤瓷合金的選擇提供參考。 方法: 1于臨床取得正常牙齦組織,采用組織塊貼壁法進(jìn)行人牙齦成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng),運(yùn)用細(xì)胞免疫組織化學(xué)染色方法通過波形絲蛋白、角蛋白染色鑒定細(xì)胞來源。 2用不同烤瓷合金提浸液分別對人牙齦成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),以未處理的DMEM培養(yǎng)液作為陰性對照。通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)抗體加心法測定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-6的分泌量;通過四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(Methylthiazoletrazolium,MTT)檢測烤瓷合金提浸液對人牙齦成纖維細(xì)胞生長與增殖的影響。 3以蓋玻片接種細(xì)胞作為陰性對照,在不同烤瓷合金表面分別接種人牙齦成纖維細(xì)胞。采用MTT法檢測人牙齦成纖維細(xì)胞在不同烤瓷合金表面的附著生長與增殖活性;掃描電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)與排列附著情況。 結(jié)果: 1細(xì)胞免疫組織化學(xué)染色,波形絲蛋白染色陽性、角蛋白染色陰性,證實(shí)細(xì)胞符合中胚層來源的成纖維細(xì)胞特點(diǎn)。 2不同烤瓷合金提浸液培養(yǎng)人牙齦成纖維細(xì)胞,ELISA結(jié)果顯示: 6小時細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-6的濃度均值分別為:對照組:133.75±12.50pg/ml,鎳鉻烤瓷合金組(A):180.00±10.36 pg/ml,鈷鉻烤瓷合金組(B):168.50±10.08 pg/ml,鎳鉻烤瓷合金鍍金組(C):145.00±8.90 pg/ml,金鉑烤瓷合金組(D):138.75±10.31 pg/ml。A、B組與對照組之間有顯著性差異(P0.05);C、D組與對照組之間無顯著性差異(P0.05);A組與B組、C組與D組比較,無顯著性差異(P0.05);A組與C組、A組與D組、B組與C組、B組與D組兩兩比較,有顯著性差異(P0.05)。 24小時對照組與A、B、C、D組細(xì)胞上清液中IL-6的濃度均值分別為:189.50±10.12pg/ml,228.75±8.54pg/ml,223.75±7.50pg/ml , 200.50±9.57pg/ml , 196.50±10.79pg/ml。A、B組與對照組之間有顯著性差異(P0.05);C、D組與對照組之間無顯著性差異(P0.05);A組與B組、C組與D組比較,無顯著性差異(P0.05);A組與C組、A組與D組、B組與C組、B組與D組兩兩比較,有顯著性差異(P0.05)。 3不同烤瓷合金提浸液培養(yǎng)人牙齦成纖維細(xì)胞,MTT比色實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示: 與對照組相比,6小時鎳鉻烤瓷合金組(A),鈷鉻烤瓷合金組(B),鎳鉻烤瓷合金鍍金組(C),金鉑烤瓷合金組(D)細(xì)胞相對增殖率均值分別為:113.07±4.16%,110.50±4.55%,102.57±4.36%,99.00±3.17%。A、B組與對照組之間有顯著性差異(P0.05);C、D組與對照組之間無顯著性差異(P0.05);A組與B組、C組與D組比較無顯著性差異(P0.05);A組與C組、A組與D組、B組與C組、B組與D組兩兩比較,有顯著性差異(P0.05)。 與對照組相比,24小時A、B、C、D組細(xì)胞相對增殖率分別為:78.89±6.03%,82.33±4.44%,95.36±4.17%,97.92±5.83%。A、B組與對照組之間有顯著性差異(P0.05);C、D組與對照組之間無顯著性差異(P0.05);A組與B組、C組與D組比較,無顯著性差異(P0.05);A組與C組、A組與D組、B組與C組、B組與D組兩兩比較,有顯著性差異(P0.05)。 4不同烤瓷合金表面人牙齦成纖維細(xì)胞的MTT比色結(jié)果顯示:與對照組相比,鎳鉻烤瓷合金組(A),鈷鉻烤瓷合金組(B),鎳鉻烤瓷合金鍍金組(C),金鉑烤瓷合金組(D)細(xì)胞相對增殖率分別為:69.39±3.71%,75.00±5.03%,86.72±3.55%,89.27±3.88%。A、B、C、D組與對照組之間均有顯著性差異(P0.05);A組與B組、C組與D組比較,無顯著性差異(P0.05);A組與C組、A組與D組、B組與C組、B組與D組兩兩比較,有顯著性差異(P0.05)。 5掃描電鏡觀察人牙齦成纖維細(xì)胞黏附行為:與對照組相比,鎳鉻烤瓷合金(A),鈷鉻烤瓷合金(B),鎳鉻烤瓷合金鍍金(C),金鉑烤瓷合金(D)表面附著細(xì)胞數(shù)目少,顯示細(xì)胞極性,沿材料表面溝紋方向排列。A、B、C組細(xì)胞形態(tài)變化明顯。D組細(xì)胞形態(tài)變化不明顯。 結(jié)論: 1體外成功培養(yǎng)了人牙齦成纖維細(xì)胞。 2鎳鉻烤瓷合金和鈷鉻烤瓷合金提浸液對人牙齦成纖維細(xì)胞的增殖顯示先促進(jìn)后抑制作用;并且使細(xì)胞IL-6分泌水平升高。鎳鉻烤瓷合金鍍金與金鉑烤瓷合金提浸液不影響細(xì)胞細(xì)胞的增殖活性和IL-6的分泌水平。 3鎳鉻烤瓷合金、鈷鉻烤瓷合金、鎳鉻烤瓷合金鍍金和金鉑烤瓷合金均抑制人牙齦成纖維細(xì)胞的附著生長,影響細(xì)胞排列與形態(tài)。 4金鉑烤瓷合金與鎳鉻烤瓷合金鍍金對人牙齦成纖維細(xì)胞生物學(xué)行為的影響較小,鎳鉻與鈷鉻烤瓷合金對細(xì)胞的生物學(xué)行為影響較大。
【學(xué)位單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2008
【中圖分類】：R783

【引證文獻(xiàn)】

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1 邱莎;口腔鎳鉻合金析出的鎳鉻在小鼠肝，腎的沉積及DNA損傷的影響[D];吉林大學(xué);2011年

2 高麗娟;掌跖膿皰病臨床相關(guān)因素及白芍總苷治療作用的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

本文編號：2825515