目的觀察熊果酸對人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞體外生長及遷移能力的影響,并探討其相關(guān)機制。方法采用MTT法及克隆形成實驗法檢測熊果酸對Tca8113細胞活性的影響;采用劃痕實驗法檢測熊果酸在0h、12h、24h對Tca8113細胞遷移能力的影響;通過Hoechst33342染色和流式細胞術(shù)實驗檢測熊果酸對Tca8113細胞凋亡的影響;Western blot檢測熊果酸對Tca8113細胞中p-Fak、Fak、Cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表達的影響。結(jié)果MTT法檢測結(jié)果表明,不同濃度的熊果酸可以不同程度的抑制Tca8113細胞的活性,與對照組相比較差異明顯(P0.05),且細胞生長抑制率與藥物濃度呈正相關(guān);克隆形成實驗結(jié)果顯示實驗組細胞生長緩慢,包含克隆數(shù)少,實驗結(jié)束時細胞存活量少,幾乎處于靜止期,表明熊果酸能抑制Tca8113細胞的活性;劃痕實驗結(jié)果顯示實驗組明顯比對照組距離寬,遷移率和作用的時間呈負相關(guān),說明熊果酸可對Tca8113細胞的遷移起到抑制作用;Hoechst33342染色及流式細胞術(shù)檢測結(jié)果顯示在熊果酸作用0h、12h、24h后可見凋亡逐漸增加,表明熊果酸能誘導(dǎo)Tca8113細胞凋亡(P0.05),并呈時間依賴性。Western blot結(jié)果顯示,熊果酸抑制Bcl-2以及增強Bax的表達,導(dǎo)致Cleaved caspase-3的表達增強(P0.05),促進Tca8113細胞凋亡;降低p-Fak、Fak的表達,而影響Tca8113細胞遷移。結(jié)論熊果酸對舌癌細胞Tca8113生長及遷移有明顯抑制作用并促進其凋亡,其機制可能與調(diào)節(jié)Bcl-2/Bax凋亡通路及抑制Fak的激活有關(guān)。
【學(xué)位單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R739.86
【部分圖文】：

圖 1 不同濃度熊果酸對 Tca8113 細胞 24h 活性的影響：與 0μmol/L 組比較，* P <0.05。形成實驗檢測熊果酸對 Tca8113 細胞活性的影響成實驗顯示實驗組細胞生長緩慢，包含克隆數(shù)少，實驗結(jié)束時

酸具有顯著抑制人舌癌細胞體外克隆形成的能力。a b c圖2 不同濃度的熊果酸對細胞克隆形成的影響注：a濃度為0 μmol/L, b濃度為40 μmol/L, c濃度為80 μmol/L,與a比較，**P<0.01。

圖 3 Hoechst33342 染色觀察細胞凋亡情況四、流式細胞術(shù)分析 Tca8113 細胞的凋亡率Annexin V-FITC/PI 雙染法檢測細胞凋亡率的結(jié)果如圖 4 所示。隨著時間的移，實驗組的總凋亡率明顯上升，且主要是晚期凋亡引起的，與實驗組相比較

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本文編號：2825343