目的觀察熊果酸對(duì)人舌鱗狀細(xì)胞癌Tca8113細(xì)胞體外生長(zhǎng)及遷移能力的影響,并探討其相關(guān)機(jī)制。方法采用MTT法及克隆形成實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)熊果酸對(duì)Tca8113細(xì)胞活性的影響;采用劃痕實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)熊果酸在0h、12h、24h對(duì)Tca8113細(xì)胞遷移能力的影響;通過(guò)Hoechst33342染色和流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)熊果酸對(duì)Tca8113細(xì)胞凋亡的影響;Western blot檢測(cè)熊果酸對(duì)Tca8113細(xì)胞中p-Fak、Fak、Cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果MTT法檢測(cè)結(jié)果表明,不同濃度的熊果酸可以不同程度的抑制Tca8113細(xì)胞的活性,與對(duì)照組相比較差異明顯(P0.05),且細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率與藥物濃度呈正相關(guān);克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,包含克隆數(shù)少,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)細(xì)胞存活量少,幾乎處于靜止期,表明熊果酸能抑制Tca8113細(xì)胞的活性;劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組明顯比對(duì)照組距離寬,遷移率和作用的時(shí)間呈負(fù)相關(guān),說(shuō)明熊果酸可對(duì)Tca8113細(xì)胞的遷移起到抑制作用;Hoechst33342染色及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示在熊果酸作用0h、12h、24h后可見(jiàn)凋亡逐漸增加,表明熊果酸能誘導(dǎo)Tca8113細(xì)胞凋亡(P0.05),并呈時(shí)間依賴(lài)性。Western blot結(jié)果顯示,熊果酸抑制Bcl-2以及增強(qiáng)Bax的表達(dá),導(dǎo)致Cleaved caspase-3的表達(dá)增強(qiáng)(P0.05),促進(jìn)Tca8113細(xì)胞凋亡;降低p-Fak、Fak的表達(dá),而影響Tca8113細(xì)胞遷移。結(jié)論熊果酸對(duì)舌癌細(xì)胞Tca8113生長(zhǎng)及遷移有明顯抑制作用并促進(jìn)其凋亡,其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)Bcl-2/Bax凋亡通路及抑制Fak的激活有關(guān)。
【學(xué)位單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類(lèi)】：R739.86
【部分圖文】：

圖 1 不同濃度熊果酸對(duì) Tca8113 細(xì)胞 24h 活性的影響：與 0μmol/L 組比較，* P <0.05。形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)熊果酸對(duì) Tca8113 細(xì)胞活性的影響成實(shí)驗(yàn)顯示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，包含克隆數(shù)少，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)

酸具有顯著抑制人舌癌細(xì)胞體外克隆形成的能力。a b c圖2 不同濃度的熊果酸對(duì)細(xì)胞克隆形成的影響注：a濃度為0 μmol/L, b濃度為40 μmol/L, c濃度為80 μmol/L,與a比較，**P<0.01。

圖 3 Hoechst33342 染色觀察細(xì)胞凋亡情況四、流式細(xì)胞術(shù)分析 Tca8113 細(xì)胞的凋亡率Annexin V-FITC/PI 雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率的結(jié)果如圖 4 所示。隨著時(shí)間的移，實(shí)驗(yàn)組的總凋亡率明顯上升，且主要是晚期凋亡引起的，與實(shí)驗(yàn)組相比較

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本文編號(hào)：2825343