目的:探討轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(transforming growth factorβ3,TGF-β3)體外聯(lián)合兔牙髓干細(xì)胞(rabbit dental pulp stem cells,rDPSCs)誘導(dǎo)其成骨向分化的效果及其作用機(jī)制。方法:酶解組織塊法分離獲得rDPSCs;將第三代rDPSCs分為實(shí)驗(yàn)組(rDPSCs+80ng/mL TGF-β3),對(duì)照組(rDPSCs+礦化液)和空白組(rDPSCs),三組細(xì)胞分別培養(yǎng)第7、14 d行ALP活性定量檢測(cè);第3、7、14 d免疫細(xì)胞化學(xué)染色法行COL-IA1、OCN,Runx-2染色;第7、14 d RT-qPCR檢測(cè)各組ALP、COL-1A1、OCN、Runx-2、OPN、BSP、Smad4表達(dá)水平;培養(yǎng)第7、14、28d茜素紅染色觀察礦化結(jié)節(jié)。結(jié)果:成功分離獲得rDPSCs;實(shí)驗(yàn)組ALP含量明顯高于對(duì)照組和空白組(P0.05);免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果示實(shí)驗(yàn)組成骨蛋白表達(dá)明顯強(qiáng)于其余兩組;COL-1A1、Runx-2、OPN、BSP、Smad4基因的表達(dá)均高于空白組(P0.05);COL-1A1、Smad4基因的表達(dá)高于對(duì)照組(P0.05);實(shí)驗(yàn)組礦化結(jié)節(jié)較其余兩組明顯。結(jié)論:TGF-β3體外有效促進(jìn)rDPSCs成骨向分化,縮短成骨形成的時(shí)間;TGF-β3促進(jìn)rDPSCs成骨向分化可能通過(guò)激活Smad通路來(lái)實(shí)現(xiàn)。
【學(xué)位單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類(lèi)】：R78
【部分圖文】：

新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié) 果1 rDPSCs 形態(tài)學(xué)觀察酶解組織塊法成功分離獲得 rDPSCs,48h 即可見(jiàn)組織塊兒周?chē)莱鰜?lái)的原代細(xì)胞（圖 1A），細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，形態(tài)多呈梭形和紡錘形，少數(shù)呈三角形、多角形。約 6-8匯合達(dá)到 80%-90%，進(jìn)行首次傳代，隨培養(yǎng)時(shí)間和代數(shù)增加細(xì)胞形態(tài)單一呈長(zhǎng)梭形（圖 1B）。

新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文實(shí)驗(yàn)組 3d 即出現(xiàn) COL-IA1 強(qiáng)陽(yáng)性(圖 2)，Runx-2 第 7d 強(qiáng)陽(yáng)性（圖 3），OCN 出現(xiàn)弱陽(yáng)性，第 14d 強(qiáng)陽(yáng)性(圖 4)；對(duì)照組 7d 出現(xiàn) COL-IA1 陽(yáng)性,第 7d 出現(xiàn) Run陽(yáng)性，第 14d 出現(xiàn) Runx-2 強(qiáng)陽(yáng)性、OCN 弱陽(yáng)性；空白組第 7d 出現(xiàn) COL-1A1 性，14d Runx-2 弱陽(yáng)性，OCN 為陰性。3 免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組3 實(shí)驗(yàn)第 7d Runx-2 免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果（20munohistochemical staining for Runx-2 after 7d白組 對(duì)照

【參考文獻(xiàn)】

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1 古扎麗努爾·阿巴拜克力;木合塔爾·霍加;仵韓;帕爾哈提·阿布肚熱合曼;;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3聯(lián)合牙髓干細(xì)胞在種植體周?chē)缙诠墙Y(jié)合中的作用[J];中華口腔醫(yī)學(xué)雜志;2018年04期

2 王騰;木合塔爾·霍加;李軍;;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3聯(lián)合牙髓干細(xì)胞在種植體骨結(jié)合中作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華口腔醫(yī)學(xué)雜志;2017年06期

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1 劉曉文;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β_3對(duì)兔牙髓干細(xì)胞增殖及骨向分化的影響[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2016年

本文編號(hào)：2814268