顳下頜關(guān)節(jié)組織所承受的負(fù)荷主要來源于咬合運(yùn)動(dòng),咬合與TMJ的功能關(guān)系密切。正常的咬合關(guān)系對(duì)TMJ的形態(tài)和發(fā)育改建過程至關(guān)重要,而流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)異常的咬合關(guān)系可能是TMD的一個(gè)重要誘因。髁突軟骨是TMJ改建的中心,具有較強(qiáng)的改建與修復(fù)能力,軟骨組織通過分泌各種生長因子與細(xì)胞因子等調(diào)控著軟骨細(xì)胞的增殖與胞外基質(zhì)的組成,維持軟骨細(xì)胞所在環(huán)境的穩(wěn)定。外界應(yīng)力刺激下軟骨細(xì)胞的合成代謝與分解代謝能力發(fā)生改變,二者綜合作用的結(jié)果最終決定軟骨組織的結(jié)局。本課題組前期的研究發(fā)現(xiàn)漸進(jìn)性咬合紊亂可以引起獼猴和兔的髁突軟骨發(fā)生骨關(guān)節(jié)病樣改變。本研究以大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,改進(jìn)了漸進(jìn)性咬合紊亂模型,通過組織學(xué)觀察和顯微測(cè)量評(píng)估漸進(jìn)性咬合紊亂對(duì)大鼠髁突軟骨組織形態(tài)的影響以及在此過程中軟骨和關(guān)節(jié)盤厚度的變化,接著運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)了三類生長因子在咬合紊亂過程中的表達(dá)變化情況,這三類生長因子對(duì)不同分化階段的髁突軟骨細(xì)胞發(fā)揮著重要作用:①促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖及細(xì)胞外基質(zhì)合成功能的以胰島素樣生長因子系統(tǒng)(IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGFR-1和IGFBP-3)為代表,其中IGFR-1是IGFs主要的功能受體,IGFBP-3是IGFs功能發(fā)揮的重要調(diào)節(jié)因子;②促進(jìn)軟骨向骨轉(zhuǎn)化功能的以血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)為代表;③保持軟骨細(xì)胞表型功能的以轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)為代表,從而系統(tǒng)地分析漸進(jìn)性咬合紊亂對(duì)軟骨組織中不同分化階段軟骨細(xì)胞的影響。 本研究選用8周齡雌性和雄性SD大鼠各24只,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,選取2、4、6、8周四個(gè)時(shí)間點(diǎn),雌雄各半,每組3只。操作方法:將正畸用牽拉皮圈嵌入大鼠右側(cè)下頜第一磨牙(M1)與第二磨牙(M2)之間以及左側(cè)上頜M1與M2之間,利用彈力推M1向近中移動(dòng),1周后取出正畸皮圈,填入自凝塑料,以保持間隙。4周后,以同樣方法推左側(cè)上頜與右側(cè)下頜第三磨牙(M3)向遠(yuǎn)中移動(dòng),保持間隙至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。實(shí)驗(yàn)2周、4周組只移動(dòng)了兩個(gè)M1,實(shí)驗(yàn)6周、8周組先后移動(dòng)了兩個(gè)M1和兩個(gè)M3。這樣我們建立了大鼠漸進(jìn)性咬合紊亂動(dòng)物模型,各組分別取材,測(cè)量髁突軟骨及關(guān)節(jié)盤的厚度并且檢測(cè)IGFs、VEGF和TGF-β三類生長因子的表達(dá)強(qiáng)度。 研究結(jié)果發(fā)現(xiàn): (1)漸進(jìn)性咬合紊亂可以引起大鼠髁突軟骨厚度的變化。漸進(jìn)性咬合紊亂2周后,雌、雄性大鼠髁突軟骨全層厚度與對(duì)照組無差異(p0.05),實(shí)驗(yàn)4周、6周和8周組的軟骨全層厚度均較對(duì)照組增加(p0.05),實(shí)驗(yàn)6周組變化更加顯著,雌性與雄性趨勢(shì)相同,其中實(shí)驗(yàn)8周組雌、雄性大鼠關(guān)節(jié)盤中帶的厚度較對(duì)照組增加(p0.001)。此外,部分實(shí)驗(yàn)組關(guān)節(jié)髁突軟骨出現(xiàn)了骨關(guān)節(jié)病樣改變:實(shí)驗(yàn)2周組中可見局部增殖層軟骨細(xì)胞形成“釘突”結(jié)構(gòu);實(shí)驗(yàn)4周組軟骨增殖層出現(xiàn)了局部壞死區(qū)域;實(shí)驗(yàn)6周組軟骨結(jié)構(gòu)嚴(yán)重紊亂,軟骨各層排列扭曲變形,軟骨與骨交界處呈現(xiàn)出大面積變性壞死區(qū)域;實(shí)驗(yàn)8周組,局部組織出現(xiàn)軟骨細(xì)胞聚集形成獨(dú)立的“島樣結(jié)構(gòu)”。雌、雄性大鼠均出現(xiàn)了病理性改變,其中實(shí)驗(yàn)2周組和4周組病變范圍較小,實(shí)驗(yàn)6周組和8周組病變顯著。 (2)IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGFR-1和IGFBP-3均分布于大鼠髁突軟骨的肥大層;軟骨細(xì)胞內(nèi)IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ表達(dá)于胞漿和胞膜,IGFR-1表達(dá)于胞漿、胞膜和胞核,IGFBP-3在胞漿、胞膜和胞核中均有表達(dá)。所有因子的表達(dá)均呈現(xiàn)出一定的增齡性變化,實(shí)驗(yàn)過程中IGFs和IGFBP-3在對(duì)照組髁突軟骨中表達(dá)逐漸下降(p0.05),而IGFR-1則隨著IGFs的變化呈現(xiàn)出一定的波動(dòng)性。漸進(jìn)性咬合紊亂2周后,雌、雄性大鼠IGFs的表達(dá)量均增加(p0.05);IGFR-1的表達(dá)也強(qiáng)于對(duì)照組(p0.05);而IGFBP-3則表現(xiàn)為雌性實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組增加(p0.05),雄性與對(duì)照組無明顯差異(p0.05)。實(shí)驗(yàn)4周后,雌性大鼠IGFs的表達(dá)與對(duì)照組無差異(p0.05),而雄性仍高于對(duì)照組(p0.01);同時(shí)雌性大鼠IGFR-1的表達(dá)低于對(duì)照組(p0.01),雄性則與對(duì)照組無差異(p0.05);IGFBP-3在雌性組中表達(dá)強(qiáng)于對(duì)照組(p0.01),而雄性組中IGFBP-3與對(duì)照組無差異(p0.05)。進(jìn)一步咬合紊亂后,雌、雄性大鼠IGFs、IGFR-1和IGFBP-3的表達(dá)均顯著增加(p0.05),達(dá)到峰值。實(shí)驗(yàn)8周后,實(shí)驗(yàn)組雌、雄性大鼠IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGFR-1和IGFBP-3的表達(dá)有所下降,但仍強(qiáng)于相應(yīng)對(duì)照組(p0.05)。 (3)VEGF主要分布于大鼠髁突軟骨的肥大層,肥大層深層表達(dá)更強(qiáng);在細(xì)胞內(nèi)VEGF主要表達(dá)于軟骨細(xì)胞的胞漿和胞膜。VEGF呈現(xiàn)出增齡性變化,隨著實(shí)驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)的延長VEGF在對(duì)照組雌、雄性大鼠的髁突軟骨組織中的表達(dá)逐漸下降(p0.05),雌性表現(xiàn)為2周到4周過程中下降明顯,而雄性快速下降期則反映在4周到6周的過程中。實(shí)驗(yàn)組雌性大鼠在實(shí)驗(yàn)過程中,VEGF的表達(dá)一直強(qiáng)于對(duì)照組(p0.05),其中實(shí)驗(yàn)6周組較對(duì)照組增加的幅度最大;雄性大鼠在實(shí)驗(yàn)2周、4周和6周后,VEGF的表達(dá)均高于相應(yīng)對(duì)照組(p0.05),而實(shí)驗(yàn)8周后VEGF的表達(dá)恢復(fù)到正常水平(p0.05)。 (4)TGF-β主要分布于髁突軟骨的肥大層;在細(xì)胞內(nèi)主要表達(dá)于軟骨細(xì)胞的胞漿、胞膜及胞核。TGF-β在髁突軟骨中呈現(xiàn)出增齡性變化,隨著時(shí)間點(diǎn)的延長,其表達(dá)強(qiáng)度逐漸下降(p0.05)。雌性對(duì)照組中4周組與2周組表達(dá)強(qiáng)度無差異(p0.05),4周到8周過程中其表達(dá)強(qiáng)度下降(p0.05);雄性對(duì)照組中TGF-β在4周時(shí)達(dá)到高峰,隨后至8周組的過程中其表達(dá)逐漸下降(p0.01)。漸進(jìn)性咬合紊亂2周后,實(shí)驗(yàn)組雌、雄性大鼠TGF-β均較對(duì)照組表達(dá)下降(p0.01),4周后雌性大鼠與對(duì)照組無差異(p0.05),雄性大鼠則強(qiáng)于對(duì)照組(p0.01),進(jìn)一步的咬合紊亂后,雌、雄性大鼠TGF-β表達(dá)強(qiáng)度高于對(duì)照組(p0.01),直至實(shí)驗(yàn)8周結(jié)束(p0.01)。 結(jié)論: 1.漸進(jìn)性咬合紊亂可以引起大鼠髁突軟骨進(jìn)行適應(yīng)性改建,軟骨中后部厚度增加,關(guān)節(jié)盤通過改變自身的厚度以適應(yīng)關(guān)節(jié)腔內(nèi)壓力的變化;長期嚴(yán)重的咬合紊亂可以導(dǎo)致大鼠髁突軟骨發(fā)生失代償,最終發(fā)生骨關(guān)節(jié)病樣改變。 2.漸進(jìn)性咬合紊亂可以促使大鼠髁突軟骨增加IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ的表達(dá),同時(shí)上調(diào)其特異性受體IGFR-1,以促進(jìn)IGFs發(fā)揮對(duì)軟骨的保護(hù)作用,而IGFBP-3的增加阻礙了這一過程,進(jìn)而導(dǎo)致髁突軟骨發(fā)生病理性改變。 3.漸進(jìn)性咬合紊亂可以促進(jìn)大鼠髁突軟骨增加VEGF的表達(dá),加速軟骨向骨轉(zhuǎn)化的過程,促進(jìn)軟骨下骨中血管向軟骨的侵入,從而加速軟骨的破壞進(jìn)程。 4.漸進(jìn)性咬合紊亂可以促使大鼠髁突軟骨增加TGF-β的表達(dá),TGF-β參與了咬合紊亂所導(dǎo)致的髁突軟骨的病理性改變過程,并對(duì)不同階段的軟骨組織發(fā)揮著保護(hù)性作用。
【學(xué)位單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2008
【中圖分類】：R782.6
【部分圖文】：

圖 1-1 髁突軟骨的分區(qū)和軟骨厚度以及關(guān)節(jié)盤厚度測(cè)量點(diǎn)的選擇1.5 統(tǒng)計(jì)方法SPSS 11.0 統(tǒng)計(jì)軟件，單因素方差分析比較實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間的差異，時(shí)間點(diǎn)間的比較應(yīng)用 SNK-q 檢驗(yàn)，p<0.05 為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2 結(jié)果2.1 咬合狀況實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，實(shí)驗(yàn)組大鼠各分牙間隙保持良好，自凝塑料無脫落，上下頜牙齒窩溝不吻合，形成漸進(jìn)性咬合紊亂（圖 1-2）。

圖 1-1 髁突軟骨的分區(qū)和軟骨厚度以及關(guān)節(jié)盤厚度測(cè)量點(diǎn)的選擇1.5 統(tǒng)計(jì)方法SPSS 11.0 統(tǒng)計(jì)軟件，單因素方差分析比較實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間的差異，時(shí)間點(diǎn)間的比較應(yīng)用 SNK-q 檢驗(yàn)，p<0.05 為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2 結(jié)果2.1 咬合狀況實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，實(shí)驗(yàn)組大鼠各分牙間隙保持良好，自凝塑料無脫落，上下頜牙齒窩溝不吻合，形成漸進(jìn)性咬合紊亂（圖 1-2）。a b

圖 2-1 IGFs 陽性表達(dá)測(cè)量區(qū)域的選擇計(jì)軟件，單因素方差分析方法比較實(shí)驗(yàn)組的比較應(yīng)用 SNK-q 檢驗(yàn)，顯著水平取 p＜達(dá)情況突軟骨細(xì)胞中的表達(dá)細(xì)胞著色表現(xiàn)為棕黃色深染顆粒，軟骨細(xì)-Ⅰ主要分布于髁突軟骨的肥大層，其中肥層和增殖層中未見其陽性著色，IGF-Ⅰ在達(dá)（圖 2-2）。突軟骨組織中的分布

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 萬英明;不同Spee曲線條件下顳下頜關(guān)節(jié)應(yīng)力分布的三維有限元研究[D];吉林大學(xué);2009年

本文編號(hào)：2807847