【摘要】:目的: 1.研究糜爛型口腔扁平苔蘚(Oral lichen planus,OLP)患者白念珠菌的檢出率。 2.對(duì)比甲苯胺藍(lán)氧(Toluidine blue O,TBO)介導(dǎo)的光動(dòng)力療法(Photodynamic therapy,PDT)與亞甲藍(lán)(Methylene blue,MB)介導(dǎo)的PDT療法對(duì)體外培養(yǎng)的白念珠菌的殺菌效果,以期為臨床選擇高效適宜的光敏劑提供理論基礎(chǔ)。 3.在體外建立有關(guān)TBO-PDT殺滅白念珠菌的最佳參數(shù),如:TBO藥物濃度及紅光的光照劑量。 4.在不同光照劑量和光敏劑濃度條件下對(duì)比白念珠菌臨床菌株與標(biāo)準(zhǔn)菌株對(duì)PDT的敏感性。 方法: 1.糜爛型OLP患者與健康者白念珠菌檢出率的對(duì)比分析:選取120例糜爛型OLP患者和120例健康對(duì)照者,采用改良棉拭子法取樣后,以科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基進(jìn)行白念珠菌分離鑒定?片敿文钪榫@色培養(yǎng)基不能鑒定的菌種,再用API20CAUX酵母鑒定系統(tǒng)進(jìn)一步鑒定。 2.TBO-PDT與MB-PDT殺菌效果對(duì)比分析:實(shí)驗(yàn)分為四組:第一組是TBO-PDT I臨床菌株組,第二組是TBO-PDT標(biāo)準(zhǔn)菌株組,第三組是MB-PDT臨床菌株組,第四組是MB-PDT標(biāo)準(zhǔn)菌株組。每組設(shè)有三個(gè)光照劑量:9.6J/cm2、19.2J/cm2、28.8J/cm2,每個(gè)光照劑量按照有無(wú)光照(L)與光敏劑(P)分為以下四組:L-P-、L-P+、L+P-、L+P+。以上分組中光敏劑濃度為50μg/ml,菌液濃度1.0×106CFU/ml,按照以上實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行PDT實(shí)驗(yàn),完成后,將混合液逐級(jí)稀釋103倍,取50μl均勻涂于沙氏培養(yǎng)基上,放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h,采用平板菌落計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)。 3. TBO-PDT對(duì)白念珠菌抗菌效應(yīng)的初步研究:實(shí)驗(yàn)分為兩組:TBO-PDT臨床菌株組和TBO-PDT標(biāo)準(zhǔn)菌株組,兩組均按以下濃度梯度10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml、40μg/ml、50μg/ml進(jìn)行PDT實(shí)驗(yàn)。以上分組均采用光照劑量28.8J/cm2。 結(jié)果: 1.經(jīng)分離鑒定,萎縮糜爛型OLP組白念珠菌檢出率為51.6%,高于健康對(duì)照組的28.3%(p0.05),具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 2.在9.6J/cm2和19.2J/cm2光照劑量下,TBO-PDT臨床菌株組與MB-PDT臨床菌株組之間、TBO-PDT標(biāo)準(zhǔn)菌株組與MB-PDT標(biāo)準(zhǔn)菌株組之間的殺菌效果沒有差異(p0.05)。在28.8J/cm2光照劑量下,TBO-PDT標(biāo)準(zhǔn)菌株組與MB-PDT標(biāo)準(zhǔn)菌株組間的殺菌效果沒有差異(p0.05),但TBO-PDT I臨床菌株組與MB-PDT I臨床菌株組間殺菌效果有差異(p0.05)。 3. TBO-PDT臨床菌株組、MB-PDT臨床菌株組、TBO-PDT標(biāo)準(zhǔn)菌株組、MB-PDT標(biāo)準(zhǔn)菌株組,隨著光照劑量的增加(9.6J/cm2、19.2J/cm2、28.8J/cm2)存活的白念珠菌數(shù)量逐漸減少,到28.8J/cm2時(shí)無(wú)菌落生長(zhǎng),各劑量組殺菌效果與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01),各劑量組殺菌效果兩兩比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。 4. TBO-PDT I臨床菌株組、TBO-PDT標(biāo)準(zhǔn)菌株組,隨著TBO濃度的增加(10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml、40μg/ml、50μg/ml),存活的白念珠菌數(shù)量逐漸減少,50μg/ml時(shí)無(wú)菌落生長(zhǎng),各濃度組殺菌效果與對(duì)照組比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01),各濃度組殺菌效果兩兩比較,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義([p0.01)。 5.在相同光照劑量和光敏劑濃度條件下,臨床菌株與標(biāo)準(zhǔn)菌株對(duì)PDT的敏感性沒有差異(p0.05)。 6.相同光照劑量和光敏劑濃度條件下,L-P-組與L-P+組之間,L-P-組與L+P-組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),L+P+組與L-P-組有顯著差異(p0.01)。 結(jié)論: 1.糜爛型OLP組白念珠菌檢出率顯著高于健康對(duì)照組,說(shuō)明糜爛型OLP患者口腔微環(huán)境的變化,使得白念珠菌易于粘附于糜爛型OLP患者口腔黏進(jìn)而繁殖,從而加重OLP病情。 2.在同一光照劑量下,糜爛型OLP白念珠菌臨床菌株對(duì)PDT療法敏感性與標(biāo)準(zhǔn)菌株相同,說(shuō)明PDT抗菌療法對(duì)臨床菌株同樣有效。 3.在28.8J/cm2光照劑量下,臨床菌株中TBO-PDT殺菌效果優(yōu)于MB-PDT,提示:在臨床上,TBO-PDT殺菌效果或好于MB-PDT。 4.在同一藥物濃度下(50μg/ml), TBO-PDT對(duì)白念珠菌的抗菌效應(yīng)隨著光照劑量的增加而增強(qiáng),在同一光照劑量下(28.8J/cm2), TBO-PDT對(duì)白念珠菌的抗菌效應(yīng)隨著藥物濃度的增加而增強(qiáng)。 5. TBO-PDT對(duì)白念珠菌有一定的抗菌效應(yīng),在最適治療參數(shù):50μg/ml TBO,波長(zhǎng)630nm,光照劑量為28.8J/cm2時(shí),可以滅活體外培養(yǎng)的白念珠菌。
【學(xué)位授予單位】:復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R781.5
【圖文】:
862.6.2糜爛型OLP組和健康對(duì)照}D中白念珠菌檢出率(圖7)計(jì)算得糜爛型OLP組白念珠菌檢出率為51.6%,健康對(duì)照組為28.3%。經(jīng)X2檢驗(yàn)后,兩者檢出率差異?具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=n.61,p<0.05),說(shuō)明糜爛型OLP白念珠菌檢出率高于健康對(duì)照組。60 ‘.0 . _ 0 1 1 — 鹿組 健康對(duì)照組圖7糜‘爛OLP姐與健康對(duì)照組Qg念珠菌檢出率比較19
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):
2803257
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