【摘要】：目的本研究通過在離體牙上制備糞腸球菌生物膜感染牙本質(zhì)小管的體外模型,經(jīng)過常規(guī)根管沖洗藥及亞甲基藍介導(dǎo)的光動力治療(MB-PDT)進行滅菌處理,應(yīng)用激光掃描共聚焦顯微鏡(CLSM)及平板菌落計數(shù)法來評估MB-PDT對牙本質(zhì)小管內(nèi)糞腸球菌細菌生物膜的滅菌作用,為臨床上治療牙髓及根尖周病提供新的解決方案。方法將糞腸球菌懸液接種在離體牙牙本質(zhì)塊、經(jīng)器械預(yù)備后的單根管離體牙的牙本質(zhì)小管內(nèi),37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在離體牙牙本質(zhì)塊上建立1d和3w培養(yǎng)的糞腸球菌感染的牙本質(zhì)小管模型,應(yīng)用5%NaOCl、2%CHX、MB-PDT進行滅菌處理,每組處理時間分為3min、12min、30min;MB-PDT聯(lián)合5%NaOCl及MB-PDT聯(lián)合2%CHX處理12min,隨后通過細菌活性熒光染料對滅菌處理后的糞腸球菌感染的牙本質(zhì)小管模型進行染色,應(yīng)用激光掃描共聚焦顯微鏡(CLSM)即刻進行觀察掃描,通過Imaris軟件進行三維重建以后的圖像來計算不同處理方法的糞腸球菌生物膜中的死菌比例,進而評價MB-PDT的殺菌效果。經(jīng)預(yù)備的單根管離體牙在37℃下培養(yǎng)3w后,應(yīng)用5%NaOCl、2%CHX、MB-PDT、無菌生理鹽水處理12min,采集各組樣本處理前后的根管壁表面和不同深度(100μm、200μm、300μm)的牙本質(zhì)碎屑進行菌落培養(yǎng)和計數(shù),計算各組的細菌清除率。結(jié)果1.成功建立糞腸球菌感染的牙本質(zhì)小管模型,在CLSM下觀察可見細菌呈鏈狀排列,糞腸球菌成功定植。2.經(jīng)過三維重建后的牙本質(zhì)小管內(nèi)的糞腸球菌生物膜圖片顯示,5%NaOCl、2%CHX、MB-PDT三種消毒方法都可以有效地殺滅糞腸球菌生物膜中的大部分細菌;但是MB-PDT、2%CHX的滅菌效果不如5%NaOCl(P0.05);延長作用時間,糞腸球菌生物膜的死菌比例增加(P0.05);成熟的糞腸球菌生物膜與年輕的細菌生物膜相比,對滅菌方法的抵抗性強,難被清除(P0.05)。3.經(jīng)過三維重建后的糞腸球菌感染牙本質(zhì)小管的生物膜圖片顯示,MB-PDT聯(lián)合5%NaOCl殺滅糞腸球菌生物膜內(nèi)的細菌最多,效果優(yōu)于單獨應(yīng)用5%NaOCl、2%CHX、MB-PDT和MB-PDT聯(lián)合2%CHX組(P0.05)。4.5%NaOCl、2%CHX、MB-PDT組在不同根管壁深度處的細菌減少率均顯著高于生理鹽水組(P0.05),其中5%NaOCl組根管壁表面、牙本質(zhì)小管內(nèi)100μm和200μm深度處的細菌減少率最佳,優(yōu)于2%CHX、MB-PDT(P0.05);MB-PDT組在各個牙本質(zhì)小管深處的細菌清除率無明顯差異(P0.05)。結(jié)論MB-PDT對體外的糞腸球菌生物膜的滅菌效果良好,其能夠成為一種新的輔助手段來控制在牙髓和根尖周疾病中根管內(nèi)糞腸球菌的感染,提高根管治療的成功率。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R781.05
【圖文】：

TSA培養(yǎng)基上糞腸球菌的培養(yǎng)

牙本質(zhì)樣本掃描電鏡圖

經(jīng)處理的1d感染牙本質(zhì)小管內(nèi)的糞腸球菌生物膜5討論

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3 李強;楊久慧;張e

本文編號：2803132