本文關(guān)鍵詞：直流微電場(chǎng)對(duì)種植體周骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移和成骨影響的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：種植技術(shù)的飛速發(fā)展改變了傳統(tǒng)的修復(fù)方式,已成為牙列缺損、牙列缺失的重要修復(fù)手段。種植體周圍骨的質(zhì)和量是影響種植體骨結(jié)合的重要因素。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)向種植體-骨界面的遷移、增殖、分化和成骨可能是影響種植體骨結(jié)合的重要因素。提高BMSCs在人工種植牙修復(fù)中的功能,目前常用的方法主要有種植體表面改性、物理刺激、化學(xué)因素等。骨是天然的駐極材料,電場(chǎng)的作用可以促進(jìn)骨折的愈合。目前有研究表明電容螯合電場(chǎng)可促進(jìn)犬牙槽骨、兔脛骨種植體植入后的骨愈合。直流微電場(chǎng)可以促進(jìn)骨愈合,但機(jī)制尚不清楚。本課題的研究目的在于通過(guò)細(xì)胞學(xué)研究及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探討直流微電場(chǎng)對(duì)種植體周圍BMSCs遷移、成骨的影響,以期為提高臨床種植修復(fù)效果提供新方法。實(shí)驗(yàn)一GFP-BMSCs分離、培養(yǎng)和鑒定目的：完成GFP大鼠BMSCs體外培養(yǎng)及鑒定,細(xì)胞3代后可用于實(shí)驗(yàn)。結(jié)果：所培養(yǎng)的BMSCs體外大量增殖其形態(tài)特征表現(xiàn)為干細(xì)胞特性,形態(tài)均一,增殖能力強(qiáng),可向成脂、成骨方向分化；流式細(xì)胞儀檢測(cè)鑒定其細(xì)胞表面標(biāo)志物特征為CD29、CD90、CD71日性,CD45、CD86和CD80陰性。結(jié)論：培養(yǎng)的大鼠BMSCs細(xì)胞形態(tài)、成分均一,純化完成,具有多向分化潛能,細(xì)胞表型符合干細(xì)胞特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)二篩選直流微電場(chǎng)對(duì)BMSCs的適宜遷移、成骨和增殖作用條件目的：篩選最適BMSCs遷移的直流電場(chǎng)作用時(shí)間,直流微電場(chǎng)對(duì)細(xì)胞遷移和成骨的影響,以及直流微電場(chǎng)對(duì)細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果：200mv/mm強(qiáng)度下,最佳細(xì)胞遷移的電場(chǎng)作用時(shí)間為4小時(shí),直流微電場(chǎng)作用4小時(shí),Transwell實(shí)驗(yàn)細(xì)胞遷移數(shù)量最多,ALP染色下觀察成骨結(jié)節(jié)最多,加載直流微電場(chǎng)可促進(jìn)BMSCs增殖。結(jié)論：200mv/mm直流微電場(chǎng)強(qiáng)度下,4小時(shí)的作用時(shí)間促進(jìn)了BMSCs的遷移、成骨和增殖的生物學(xué)特性。實(shí)驗(yàn)三直流微電場(chǎng)通過(guò)SDF-1/CXCR-4生物軸對(duì)BMSCs勺遷移影響以及直流微電場(chǎng)對(duì)BMSCs成骨分化的影響目的：直流微電場(chǎng)對(duì)BMSCs遷移作用相關(guān)機(jī)制的研究,并初步探討直流微電場(chǎng)對(duì)BMSCs成骨分化的影響。結(jié)果：在2OOmv/mm直流微電場(chǎng)4小時(shí)的作用下SDF-1促進(jìn)BMSCs的遷移,直流微電場(chǎng)可促進(jìn)CXCR4的表達(dá)。直流微電場(chǎng)干預(yù)后的BMSCs的OCN、BSP基因表達(dá)水平,ALP、RUNX2蛋白表達(dá)水平均有顯著增高。結(jié)論：直流微電場(chǎng)可通過(guò)SDF-1/CXCR4生物軸調(diào)控BMSCs的定向遷移;初步從相關(guān)基因水平和蛋白水平來(lái)講,直流微電場(chǎng)對(duì)BMSCs的成骨分化有促進(jìn)作用。實(shí)驗(yàn)四直流微電場(chǎng)對(duì)SD大鼠脛骨骨結(jié)合的影響目的：通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究直流微電場(chǎng)對(duì)大鼠鈦種植體與脛骨骨結(jié)合過(guò)程中BMSCs遷移的影響。結(jié)果：在直流微電場(chǎng)作用下GFP-BMSCs在大鼠體內(nèi)遷移到種植體周圍數(shù)量多于對(duì)照組。種植體植入后4周,加載直流電場(chǎng)200mv/mm,4小時(shí),14天的實(shí)驗(yàn)組骨種植體接觸率明顯高于未加載電場(chǎng)的對(duì)照組。骨小梁間隔與對(duì)照組相比明顯降低(P0.05),即骨密度較高,以上參數(shù)表明加載電場(chǎng)組骨量明顯高于未加載電場(chǎng)組；加載電場(chǎng)的SD大鼠的平均旋出扭矩值在第4周明顯高于未加載電場(chǎng)的SD大鼠。加載直流電場(chǎng)后的大鼠脛骨的種植體骨結(jié)合率在第4周明顯高于未加載電場(chǎng)的大鼠,加載直流電場(chǎng)也導(dǎo)致了種植體周骨小梁面積百分?jǐn)?shù)在第4周出現(xiàn)了升高。組織學(xué)結(jié)果顯示加載電場(chǎng)后,可見(jiàn)周圍骨組織向種植體表面延伸,形成“偽足”樣結(jié)構(gòu)沿著種植體表面形態(tài)結(jié)構(gòu)生長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組新生骨組織與種植體表面粘附更加緊密。種植體表面有大量新生骨小梁及類骨基質(zhì),骨小梁之間相互連接成網(wǎng)織狀結(jié)構(gòu),實(shí)驗(yàn)組種植體-骨界面有均勻的新生骨組織生成,對(duì)照組種植體-骨界面新生骨組織較疏松,骨組織成熟度與種植體結(jié)合緊密程度稍差。結(jié)論：直流微電場(chǎng)可促進(jìn)骨結(jié)合過(guò)程中BMSCs的遷移,增強(qiáng)SD大鼠脛骨種植體周骨密度,促進(jìn)骨結(jié)合。
【關(guān)鍵詞】：直流微電場(chǎng) 種植體骨結(jié)合 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 遷移 成骨
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R783.6
【目錄】：

• 英文縮略詞表7-8
• 中文摘要8-11
• Abstract11-14
• 前言14-15
• 實(shí)驗(yàn)一 GFP-BMSCs分離、培養(yǎng)和鑒定15-20
• 1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象與方法15-16
• 1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象15
• 1.2 材料15
• 1.3 方法15-16
• 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法16
• 2 結(jié)果16-18
• 3 討論18-20
• 實(shí)驗(yàn)二 篩選直流微電場(chǎng)對(duì)BMSCs的適宜遷移、成骨和增殖作用條件20-26
• 1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象與方法20-22
• 1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象20
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑20
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器20
• 1.4 方法20-22
• 1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法22
• 2 結(jié)果22-25
• 3 討論25-26
• 實(shí)驗(yàn)三 直流微電場(chǎng)通過(guò)SDF-1/CXCR-4生物軸對(duì)BMSCs的遷移影響以及直流微電場(chǎng)對(duì)BMSCs成骨分化的影響26-34
• 1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象與方法26-28
• 1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象26
• 1.2 實(shí)驗(yàn)材料及儀器26
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法26-28
• 2 結(jié)果28-32
• 3 討論32-34
• 實(shí)驗(yàn)四 直流微電場(chǎng)對(duì)SD大鼠脛骨骨結(jié)合的影響34-42
• 1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象與方法34-36
• 1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象34
• 1.2 實(shí)驗(yàn)材料34
• 1.3 方法34-36
• 2 結(jié)果36-40
• 3 討論40-42
• 全文總結(jié)42-43
• 參考文獻(xiàn)43-49
• 文獻(xiàn)綜述49-60
• 參考文獻(xiàn)54-60
• 攻讀碩士期間發(fā)表文章和申請(qǐng)專利60-61
• 致謝61

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本文編號(hào)：280151