【摘要】：第一部分miRNA-361在口腔鱗癌組織中的表達(dá)及意義目的:通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time Quantitative Polymera se Chain Reaction,q RT-PCR)技術(shù)檢測(cè)口腔鱗癌組織及正�？谇徽衬そM織中miRNA-361的表達(dá)水平,分析其表達(dá)與口腔鱗癌患者臨床特征之間的關(guān)系,探討mi RNA-361在口腔鱗癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。方法:1采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)miRNA-361在口腔鱗癌組織及正�？谇徽衬そM織中的表達(dá)水平。研究其表達(dá)水平與患者年齡、性別、臨床分期、頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的相關(guān)性。2應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,采用兩組獨(dú)立樣本比較的t檢驗(yàn)及獨(dú)立樣本配對(duì)t檢驗(yàn),比較各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)之間的差異,取P0.05,認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.mi RNA-361在口腔鱗癌組織和正�？谇徽衬そM織中的表達(dá)量分別為10.93±3.32、13.68±2.47,miRNA-361在口腔鱗癌組織中的表達(dá)量低于正�？谇徽衬そM織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.mi RNA-361在臨床分期中Ⅰ、Ⅱ期與Ⅲ、Ⅳ期的相對(duì)表達(dá)量分別為12.31±3.14、9.00±2.57,臨床分期中Ⅰ、Ⅱ期中miRNA-361的表達(dá)量高于Ⅲ、Ⅳ期,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。mi RNA-361在頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的相對(duì)表達(dá)量分別為9.66±2.88、12.21±3.30,頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)量低于無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與患者年齡、性別無關(guān)(P0.05)。小結(jié):miRNA-361在口腔鱗癌中的表達(dá)低于口腔正常粘膜組織,其表達(dá)量與臨床分期和頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān),mi RNA-361在口腔鱗癌中可能起抑癌基因的作用,并參與了口腔鱗癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移過程。第二部分miRNA-361對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞株TCA-83生物學(xué)行為的影響目的:建立體外細(xì)胞研究模型,檢測(cè)miRNA-361對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞株TCA-83增殖、遷移功能的影響,為深入研究miRNA-361的分子機(jī)制奠定理論基礎(chǔ)。方法:1選取口腔鱗癌細(xì)胞株TCA-83進(jìn)行培養(yǎng),在細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miRNA-361 minics,將轉(zhuǎn)染miRNA-361 minics作為實(shí)驗(yàn)組,同時(shí)設(shè)立轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照試劑的陰性對(duì)照組及空白對(duì)照組,轉(zhuǎn)染后24小時(shí)測(cè)定三組細(xì)胞中miRNA-361的表達(dá)水平。2 MTS比色分析法檢測(cè)1d、2d、3d、4d、5d時(shí)段的OD值,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。3平板克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察轉(zhuǎn)染mi RNA-361 minics后口腔鱗癌細(xì)胞TCA-83集落形成情況。4 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miRNA-361對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞株TCA-83遷移能力的影響。5應(yīng)用spss21.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。兩組間配對(duì)樣本選擇t檢驗(yàn),兩組間獨(dú)立樣本采用Mann-Whitney檢驗(yàn)。結(jié)果:1.轉(zhuǎn)染24h后,實(shí)驗(yàn)組口腔鱗癌細(xì)胞TCA-83中miRNA-361的表達(dá)明顯高于陰性對(duì)照組及空白對(duì)照組。2.實(shí)驗(yàn)組在轉(zhuǎn)染后1d、2d、3d、4d、5d的OD值均低于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組。在3d出現(xiàn)顯著差別,實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組的OD值分別為0.432±0.017、0.634±0.019、0.661±0.022,m iRNA-361實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。3.實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組穿透基底膜細(xì)胞數(shù)分別為101.33±3.06、194.33±8.08和202.67±11.15,與陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組相比,miR-361實(shí)驗(yàn)組遷移能力明顯減弱,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。4.實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組及空白對(duì)照組的細(xì)胞克隆形成率分別為3.42%±0.17%、7.36%±0.209%和7.70±0.23%。實(shí)驗(yàn)組口腔鱗癌細(xì)胞TC A-83克隆形成能力明顯低于陰性對(duì)照組及空白對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。小結(jié):上調(diào)的mi RNA-361可抑制口腔鱗癌細(xì)胞株TCA-83的增殖和遷移功能,推測(cè)miRNA-361在口腔鱗癌的增殖和遷移過程中可能作為抑癌基因發(fā)揮作用。結(jié)論:miRNA-361在口腔鱗癌組織中表達(dá)下調(diào),其表達(dá)量的改變能夠影響口腔鱗癌細(xì)胞TCA-83增殖、侵襲等生物學(xué)行為。推測(cè)miRNA-361在口腔鱗癌的發(fā)生、發(fā)展和遷移過程中可能作為抑癌基因發(fā)揮作用,并可能成為口腔鱗癌診斷、治療新的生物學(xué)標(biāo)志物。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R739.8
【圖文】：

QRT-PCR擴(kuò)增曲線

QRT-PCR溶解曲線

3 miRNA-361 在口腔鱗癌組織與口腔正常粘膜組織中的相達(dá)量.3 The relative expression level of miRNA-361 in normal anal squamous cell carcinoma

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 周凡;莊詩(shī)美;;microRNA與腫瘤[J];生命科學(xué);2008年02期

本文編號(hào)：2792185