【摘要】：目的:構(gòu)建具有科學(xué)性、重復(fù)性、相似性、可靠性、標(biāo)準(zhǔn)化的口腔角化黏膜缺損動(dòng)物模型,以富血小板纖維蛋白(Platelet-rich fibrin,PRF)作為干預(yù)手段,研究富血小板纖維蛋白在兔硬腭黏膜缺損愈合過程中對(duì)炎癥、再上皮化、膠原和TGF-β1表達(dá)的影響。方法:將27只3月齡雄性日本大耳白兔隨機(jī)分為PRF實(shí)驗(yàn)組(A組,n=12)、空白對(duì)照組(B組,n=12)和正常組(C組,n=3)。每只兔于硬腭中三分之一中份,距上頜牙10mm和兩側(cè)黏膜邊緣2.5mm處制備10mm角化黏膜缺損。C組制備PRF膜和正常的黏膜組織塊,并對(duì)PRF膜進(jìn)行HE染色,C組織塊進(jìn)行HE、VG和TGF-β1染色。A組缺損處縫合PRF膜,B組不做任何處理。測(cè)量各組黏膜組織塊的平均厚度,排除因其厚度不同所帶來的誤差。A組和B組分別于術(shù)后3天、7天、14天和21天進(jìn)行大體觀察和創(chuàng)面愈合率的分析,處死后于術(shù)區(qū)取材,然后進(jìn)行HE、VG和TGF-β1染色,并對(duì)炎癥等級(jí)、上皮平均厚度、膠原纖維OD值和TGF-β1 OD值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:1.PRF膜HE染色:均質(zhì)紅染的纖維蛋白末端有大量的核藍(lán)染的白細(xì)胞。2.各組黏膜組織塊平均厚度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。3.大體觀察:術(shù)后3天A組炎癥相對(duì)較輕,PRF膜牢固覆蓋在創(chuàng)面,B組創(chuàng)面紅腫嚴(yán)重;術(shù)后7天兩A組創(chuàng)緣不紅腫,PRF膜與周圍黏膜牢固結(jié)合,B組創(chuàng)緣稍紅腫;術(shù)后14天,兩組均被黏膜上皮覆蓋,A組創(chuàng)面凹陷較B組小;術(shù)后21天兩組創(chuàng)面凹陷繼續(xù)縮小,A組比B組小,B組創(chuàng)緣有瘢痕攣縮跡象。4.創(chuàng)面愈合率:分組和時(shí)間的交互作用有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。A組在術(shù)后7天和14分別比B組高(P0.01),在術(shù)后3天和21天分別與B組沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。5.HE染色結(jié)果:術(shù)后3天,兩組基本全部為壞死組織,A組炎細(xì)胞浸潤較B組少;術(shù)后7天,A組可見PRF膜引導(dǎo)出新生上皮,B組部分為壞死組織,炎細(xì)胞浸潤明顯,兩組都出現(xiàn)了肉芽組織;術(shù)后14天和21天,兩組都出現(xiàn)了完整的上皮結(jié)構(gòu),炎癥明顯減輕,上皮下結(jié)締組織明顯。6.炎癥等級(jí):A組和B組各組內(nèi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);兩組僅在術(shù)后3天有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05,BA),在術(shù)后其他時(shí)間點(diǎn)上無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);兩組分別在術(shù)后3天和7天高于C組(P0.05),而在術(shù)后14天和21天與C組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差(P0.05)。7.上皮平均厚度:分組和時(shí)間的交互作用有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。A組在術(shù)后14天和21天分別與C組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);B組在術(shù)后14天小于A組(P0.01)和C組(P0.05),在術(shù)后21天大于A組(P0.01)并與C組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。8.膠原纖維OD值:分組和時(shí)間的交互作用有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。A組在術(shù)后7天、14天和21天分別與B組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(7天P0.01,AB;14天P0.01,AB;21天P0.01,AB),在術(shù)后3天與B組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。A組和B組在術(shù)后21天大于C組(P_A0.05,P_B0.01),但從數(shù)值上看A組更接近C組。A組在術(shù)后14天達(dá)到峰值,B組在術(shù)后21天達(dá)到峰值。9.TGF-β1 OD值:分組和時(shí)間的交互作用有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。A組在術(shù)后3天、7天和21天分別與B組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(3天P0.01,AB;7天P0.05,AB;21天P0.01,AB),在術(shù)后14天與B組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。A組和B組在術(shù)后21天大于C組(P_A0.05,P_B0.01),但從數(shù)值上看A組更接近C組。兩組均在術(shù)后3天達(dá)到峰值。結(jié)論:1.成功建立了口腔角化黏膜缺損動(dòng)物模型,為后續(xù)研究促進(jìn)口腔角化黏膜修復(fù)的方法、材料和機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。2.PRF可能通過早期調(diào)控炎癥反應(yīng)、引導(dǎo)角化黏膜上皮再生、增加膠原纖維的合成來促進(jìn)口腔角化黏膜缺損的愈合。3.PRF可能通過下調(diào)TGF-β1表達(dá)調(diào)控炎癥反應(yīng)和瘢痕攣縮,上調(diào)TGF-β1表達(dá)促進(jìn)膠原沉積和血管再生。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R783
【圖文】：

兔耳中動(dòng)脈采血

離心機(jī)3000rpm，10min

富血小板纖維蛋白

【參考文獻(xiàn)】

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5 張亞軍;楊聰

本文編號(hào)：2785087