【摘要】：目的:1.評價臨床口腔光療裝置在防齲中的抑菌作用,利用激光防齲的特點,探索口腔光療裝置分別在不同功率、不同位點下抑菌效果的比較,篩選出有效防齲的功率并觀察各位點抑菌差異,觀察口腔特殊光療裝置能否全方位防齲,為其在防齲中應用提供理論支持。2.定性研究口腔光療裝置對細菌的形態(tài)結構及活力的影響,采用激光共聚焦顯微鏡(CLSM)結合特異性標記死菌和活菌的染料染色,觀察細菌的形態(tài)結以及細菌的活力,為其在臨床實驗中的應用提供實驗基礎。3.口腔特殊光療裝置在有效抑菌同時應評價其安全性,根據所得有效抑菌的激光參數(shù),在不同光照時間和不同功率下對不同位點、不同形態(tài)牙齒進行髓腔溫度檢測。為臨床上安全有效的使用口腔特殊光療裝置提供實驗依據,同時為激光的臨床規(guī)范化應用提供數(shù)據參考。方法:1.樣本收集與處理:將凍存的變形鏈球菌復蘇48h,鑒定為純培養(yǎng)后,將平皿上的單一菌落挑入到4ml的BHI液體培養(yǎng)基內厭氧培養(yǎng)48h。利用酶標儀調整調600nm波長處吸光度(Optical Density,OD)讀數(shù)為OD=1,菌液濃度為1.0×10~8CFU/mL的菌懸液,備用。2.儀器校正:激光功率計校正Nd:YAG激光器,排除激光器本身無能量耗損或者線路連接問題,用于實驗。3.激光處理觀察各組抑菌效果差異:口腔光療裝置分別以1.5W(12.74J/cm~2)、1.6W(13.58 J/cm~2)、1.7W(14.44 J/cm~2)、1.8W(15.30 J/cm~2)、1.9W(16.14J/cm~2)、2.0W(17.0 J/cm~2)、2.1W(17.83 J/cm~2)的功率照射各組樣本模型60s,評價口腔光療裝置的殺菌效果,進行下一步實驗。4.各位點抑菌率監(jiān)測:經過激光照射處理后,分別對上頜中切牙,右側上頜第一前磨牙、右側上頜第二磨牙,左側上頜第二磨牙、左側上頜第一前磨牙五個牙位點進行細菌菌落計數(shù),觀察各個位點的抑菌效果差異。5.激光共聚焦顯微鏡(CLSM)觀察:選定有效抑菌的實驗組的進行激光共聚焦處理照射60S,采用紅綠色信號重疊部分染色試劑盒,激光共聚焦顯微鏡觀察紅綠色信號重疊部分染色情況,定性的分析評價口腔光療裝置對致齲菌變形鏈球菌抑菌的有效性。6.溫度測試:根據上述實驗結果選定有效抑菌激光功率進行髓腔溫度實驗,照射時間分別為30s,60s,90s。髓腔預備好后,將K型熱電偶溫度記錄儀金屬面的探頭深入其中,緊密貼合已制備好的髓腔模型髓室的頂端,監(jiān)測各實驗樣本髓腔內的溫度變化并計算溫度升高值,隨后分析評價口腔光療裝置預防齲病的安全性。結果:1.各實驗組抑菌效果差異以及不同位點抑菌結果:與陰性對照組(生理鹽水組)相比,各處理組殺菌效果均能顯著降低細菌菌落數(shù)量,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與陽性對照組(次氯酸鈉組)相比,菌落計數(shù)結果顯示在功率為1.5W、1.6W、1.7W、1.8W、1.9W時,菌落數(shù)明顯比次氯酸鈉組高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);在功率為2.0W,2.1W時,菌落數(shù)與次氯酸鈉組相比無顯著統(tǒng)計學意義(p0.05);各激光處理組間比較如下,1.5W、1.6W、1.7W、1.8W四個激光處理組之間相比,抑菌效果無明顯差異,不具有統(tǒng)計學意義(p0.05);1.9W、2.0W、2.1W三個組激光處理組之間相比,抑菌效果無明顯差異,不具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。1.9W、2.0W、2.1W與1.5W、1.6W、1.7W、1.8W相比,菌落計數(shù)明顯低于1.9W、2.0W、2.1W,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)1.5-2.1W各激光處理組中,不同牙位之間抑菌效果無統(tǒng)計學差異(p0.05)。2.激光共聚焦(CLSM)結果:根據激光共聚焦圖像顯示,與生理鹽水組相比,在2W時,右上牙合第一前磨牙、右上牙合第二磨牙活菌分布較稀疏,死菌分布較密集,死菌密度明顯比生理鹽水組高;中切牙、左上牙合第一前磨牙、左上牙合第二磨牙活菌分布較死菌少,兩者持平。與次氯酸組比較,在2.0W時,右上牙合第一前磨牙、右上牙合第二磨牙活菌分布稀少,死菌較密集,兩者相差無幾;中切牙、左上牙合第一前磨牙、左上牙合第二磨牙活菌分布明顯比次氯酸鈉組高,死菌分布較密集。圖像采集后進行光密度數(shù)據分析計算,結果顯示:與次氯酸鈉組相比,2W時各位點抑菌效果差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。3.髓腔溫度變化結果:功率一定下,髓腔溫度隨照射時間變化,兩兩比較,髓腔溫度升高值與照射時間不成正比,各組髓腔溫度升高值均小于5.5°C;時間一定下,髓腔溫度隨功率變化,兩兩比較,髓腔溫度升高值與照射功率不成正比,各組髓腔溫度升高值均小于5.5°C;相同時間下,分別照射進光口與最遠端離體牙髓腔模型,髓腔溫度值會升高,與位點距離遠近不成正比。各組髓腔溫度升高值均小于5.5°C結論:1.根據實驗結果選定有效抑菌激光功率為2W、2.1W,依據最小功率和有效性原則,選定2.0W為有效抑菌激光功率;定量對各個位點抑菌率進行分析,不同位點抑菌效果無差異,可全方位防齲。2.根據激光共聚焦圖像顯示,在本實驗結果所選定參數(shù)下,2W時右上牙合第一前磨牙、右上牙合第二磨牙死菌分布密集,活菌分布較稀疏;中切牙、左上牙合第一前磨牙、左上牙合第二磨牙活菌分布較死菌少,稀疏;經圖像分析處理后,得出各位點抑菌率無差異。3.在本實驗條件下,對1.9W、2.0W、2.1W,30s、60s、90s髓腔溫度進行測定,髓腔溫度升高值在安全值5.5℃的范圍內,不會導致牙髓組織的損傷,且各位點髓腔溫度變化無差異,可以全面、安全的防齲。
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R781.1
【圖文】：

為接入裝置，另一端為最遠端。通體發(fā)光光纖出口端與轉接光纖的一端連接，轉接光纖的另一端通過接入裝置與激光器連接。該發(fā)明可用于預防齲病，尤其是易患齲人群（圖1.1）�？谇惶厥夤獐熝b置的設計基于口腔內各個牙位的位置。將特殊的口腔光療裝置用生理鹽水沖洗數(shù)次，酒精棉球擦拭，三用氣槍吹干，備用。1f

上牙合中切牙組激光共聚焦顯微鏡觀察結果

右上牙合第一前磨牙組激光共聚焦顯微鏡觀察結果

本文編號：2772314