【摘要】：目的： 研究證實粘接過程激活牙本質(zhì)MMPs，活化的MMPs可降解混合層中裸露的膠原纖維，是影響粘接耐久性的重要因素。近期研究發(fā)現(xiàn)季銨鹽單體MDPB具有抑制MMPs的作用，可提高牙本質(zhì)的粘接耐久性。本研究的目的在于檢測課題組研制的三種季銨鹽單體DMAE-CB、MAE-DB、MAE-HB對游離型和結(jié)合型MMPs活性的影響，分析季銨鹽單體影響MMPs活性的效應(yīng)基團(tuán)；并將季銨鹽單體加入到商品粘接劑AdperTMSingle Bond2中，檢測季銨鹽單體改性牙本質(zhì)粘接劑對粘接界面耐酶解能力的影響，從而探索提高牙本質(zhì)粘接耐久性的新方法。 方法： 1采用分光光度試劑盒檢測課題組研制的三種季銨鹽單體DMAE-CB、MAE-DB、MAE-HB對游離型MMPs活性的影響；通過檢測具有結(jié)構(gòu)差異的三種單體MMA、METMAC、DMAE-CB對游離型MMPs活性的影響，分析季銨鹽單體發(fā)揮作用的效應(yīng)基團(tuán)。 2檢測老化30天后，脫礦牙本質(zhì)膠原纖維干重質(zhì)量的改變、極限拉伸強(qiáng)度的變化，采用透射電鏡觀察膠原纖維顯微形態(tài)的改變，評價季銨鹽單體對脫礦牙本質(zhì)膠原纖維中結(jié)合型MMPs活性的影響。 3模擬臨床應(yīng)用將季銨鹽單體加入到粘接劑中，制備標(biāo)準(zhǔn)牙本質(zhì)粘接試件，將試件浸泡在高濃度酶解液中，通過拉伸強(qiáng)度測試、粘接斷面觀察、納米滲漏等實驗技術(shù)，檢測粘接固化后季銨鹽單體對粘接界面耐酶解作用的影響。 結(jié)果： 1本課題組自行研制的三種季銨鹽單體DMAE-CB、MAE-DB、MAE-HB對MMP-9均具有抑制作用，且隨著濃度的升高抑制作用增強(qiáng)。30%METMAC和30%DMAE-CB對MMP-9的抑制百分比分別為95.6±1.7%和94.3±2.3%，而30%MMA對MMP-9的抑制百分比僅為17.7±3.1%（P0.05），證實季銨基團(tuán)為季銨鹽單體發(fā)揮抑制作用的效應(yīng)基團(tuán)。 2通過脫礦牙本質(zhì)膠原纖維干重質(zhì)量改變和拉伸強(qiáng)度變化的結(jié)果證實三種季銨鹽單體DMAE-CB、MAE-DB、MAE-HB對結(jié)合型MMPs均具有抑制作用，透射電鏡觀察結(jié)果顯示季銨鹽單體具有保護(hù)膠原纖維的作用。 3在酶解液中浸泡不同時間，季銨鹽單體改性牙本質(zhì)粘接劑的微拉伸強(qiáng)度降低較少，粘接斷面多發(fā)生在混合層的頂部，納米滲漏的分級結(jié)果與陰性對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異。證實季銨鹽單體改性牙本質(zhì)粘接劑固化后可以有效提高牙本質(zhì)粘接界面的耐酶解能力。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R783.3
【圖文】：

并受激素、生長因子、細(xì)胞因子等因素的調(diào)節(jié)[17]。MMPs 是含多區(qū)域結(jié)構(gòu)的蛋白酶，至少含有一個前肽區(qū)和一個催化區(qū)（MMP外），如 MMP-1 的前體結(jié)構(gòu)由前肽區(qū)、催化區(qū)、鉸鏈區(qū)和血紅素蛋白區(qū)組成，MMP前體結(jié)構(gòu)中還另含有三個纖維連接蛋白的重復(fù)序列[19]。MMPs 的功能和生物活性復(fù)雜，多數(shù) MMPs 可以降解幾種底物，例如膠原酶（MMP-1 和 MMP-13）可以的降解明膠，明膠酶（MMP-2 和 MMP-9）可以降解幾種膠原，尤其是Ⅳ型膠原[2了降解細(xì)胞外基質(zhì)，MMPs 還在非膠原基質(zhì)蛋白轉(zhuǎn)換為信號分子中起重要作用影響細(xì)胞的生存，增殖和分化[16]。MMPs 多以無活性的酶原形式合成和分泌，活形式MMPs前肽區(qū)的半胱氨酸與催化區(qū)的鋅離子相連接（被稱為“半胱氨酸轉(zhuǎn)換理），從而抑制了酶的活性[21]（圖 1）。這個保守的半胱氨酸作為催化活性區(qū)域鋅的配體，可抵制水分子的進(jìn)入并保持 MMPs 處于無活性狀態(tài)。當(dāng)此連接被其MPs、半胱氨酸組織蛋白酶或化學(xué)物質(zhì)破壞，MMPs 的活性就會產(chǎn)生[22]（圖 1）

并不足以容納直徑為其三倍的三螺旋結(jié)構(gòu)的膠原纖維。目前 降解膠原纖維的假設(shè)機(jī)理。一種假設(shè)機(jī)理為使用不能裂解膠原 MMP-1 突變體，使其解開膠原纖維的三螺旋結(jié)構(gòu)從而形成單獨(dú)證實 MMP-1 可以使膠原纖維解螺旋，使 MMPs 的活性位點(diǎn)成功（圖 2）。但是這種觀點(diǎn)受到 Perumal 和其他人的質(zhì)疑，他們認(rèn)為的部位是被膠原纖維 C-末端充分保護(hù)的，會阻止 MMPs 進(jìn)入到[23]。他們認(rèn)為在 MMPs 結(jié)合到其作用區(qū)域解開三螺旋結(jié)構(gòu)前，機(jī)械作用去除 C-端的末端肽，或者通過物理損害使膠原結(jié)構(gòu)發(fā)交聯(lián)結(jié)構(gòu)的破壞，這種破壞可以暴露膠原肽鏈?zhǔn)?MMPs 對其作它鏈發(fā)生裂解[23]，并使 MMPs 更易于結(jié)合到遠(yuǎn)離原始切割位點(diǎn)導(dǎo)致膠原分子的進(jìn)一步降解[23]。這是一個很引人注目的假設(shè)，齲體對脫礦區(qū)牙本質(zhì)膠原基質(zhì)的損害會導(dǎo)致膠原分子排列的改變（壞），暴露 MMPs 的結(jié)合位點(diǎn)。

-16-圖 3 全酸蝕粘接系統(tǒng)粘接乳磨牙，老化 6 個月后粘接界面的透射電鏡圖片。（A）對照組：混合層幾乎完全降解。（B）氯己定處理組：混合層結(jié)構(gòu)正常。（C）納米滲漏對照組：銀離子幾乎占滿混合層全層。（D）納米滲漏氯己定處理組：少量銀離子散在分布于混合層。（C：樹脂；A：粘接劑；H：混合層；D 牙本質(zhì)；P 聚丙烯酸共聚物）4 粘接過程中基質(zhì)金屬蛋白酶激活的機(jī)理在臨床上全酸蝕粘接過程中，酸蝕步驟采用的是 37%的磷酸明膠酸蝕劑，而 37%的磷酸明膠酸試劑的酸性較強(qiáng)，pH 值為 0.17。最初認(rèn)為其強(qiáng)酸性會使包埋在礦化牙本質(zhì)中的 MMPs 變性失活[18]。但隨后的實驗發(fā)現(xiàn)全酸蝕粘接劑[69]和自酸蝕粘接劑[70]中的樹脂單體可重新激活滅活的內(nèi)源性膠原酶和明膠酶，此現(xiàn)象在冠部和根部牙本

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本文編號：2771196