【摘要】： 【目的】通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探討ω-3多不飽和脂肪酸與阿司匹林對牙周炎時(shí)的炎癥反應(yīng)和牙周骨組織的破壞的影響,進(jìn)一步探討ω-3多不飽和脂肪酸對炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制。 【方法】選用6～8周齡健康雄性SD大鼠64只,其中48只采用絲線結(jié)扎聯(lián)合口內(nèi)接種細(xì)菌及給予高糖飲食的方法建立大鼠牙周炎模型,造模成功后,隨機(jī)分為生理鹽水組(P組)、阿司匹林組(A組)、二十碳五烯酸與阿司匹林組(EA組)三組。P組、A組、EA組分別通過腹腔注射給予不同的實(shí)驗(yàn)藥物,另設(shè)N組作為正常對照組,給藥后2wk和4wk分批處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。取大鼠上頜骨獲取標(biāo)本,4%多聚甲醛固定,行HE染色、TRAP染色及TNF-α的免疫組化檢測。觀測指標(biāo)包括:(1)臨床指標(biāo):牙周探診深度(PD);(2)組織學(xué)指標(biāo):HE染色進(jìn)行組織病理學(xué)比較,TRAP染色對炎癥區(qū)牙槽嵴頂1/3處的破骨細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),免疫組化染色觀察炎癥區(qū)牙槽嵴頂1/3處骨細(xì)胞中TNF-α陽性表達(dá)的光密度值(OD)的變化;(3)動(dòng)物處死前通過心臟采血,ELISA方法檢測血清中C反應(yīng)蛋白(CRP)水平的變化。資料采用單因素方差分析統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 【結(jié)果】腹腔注射給藥后EA組隨給藥時(shí)間的延長牙周組織的炎癥反應(yīng)逐漸減輕,給藥2周后,EA組與P組比較可顯著降低炎癥區(qū)牙槽嵴頂1/3處骨細(xì)胞中TNF-α陽性表達(dá)的光密度值,而A組無此效應(yīng);EA組還可顯著降低外周血血清中CRP水平。給藥4周后,與P組、A組相比較EA組探診深度有了明顯的改善;且EA組在炎癥區(qū)牙槽嵴處單位長度破骨細(xì)胞的計(jì)數(shù)與P組、A組比較有亦有明顯降低;同時(shí)EA組可更加顯著降低炎癥區(qū)牙槽嵴頂1/3處骨細(xì)胞中TNF-α陽性表達(dá)。 【結(jié)論】ω-3多不飽和脂肪酸與阿司匹林對大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎時(shí)的炎癥反應(yīng)和牙周骨組織的破壞有一定的抑制作用,對牙周骨組織炎癥區(qū)破骨細(xì)胞的生成及細(xì)胞因子TNF-α的表達(dá)亦有抑制作用,同時(shí)還可降低外周血血清中CRP的水平。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R781.4
【圖文】：

一種在炎癥吸收過程中產(chǎn)生的內(nèi)源性物質(zhì)，有研究表明ResofvinEI可一3PUFAs發(fā)揮作用機(jī)制的分子基礎(chǔ)[9]。ResolvinEI的主要作用機(jī)制有:結(jié)合抑制NF.kB的活性，調(diào)節(jié)炎癥介質(zhì)(TNF一a、IL一1、IL一2等)、豁CAM一1、IcAM一l)以及一氧化氮合酶等基因的轉(zhuǎn)錄，而上述細(xì)胞因子炎癥的重要因子〔’0]。②阻止超氧負(fù)離子的產(chǎn)生[川。③抑制巨噬細(xì)胞浸狀細(xì)胞趨化和IL一12的產(chǎn)生〔‘2]。研究表明ResolvinEI可以在體內(nèi)產(chǎn)生，生的過程主要有兩條途徑[l3](見圖l):一是在炎癥過程中，非街體類司匹林可以作用于表達(dá)COX一2的血管上皮細(xì)胞，可以使EPA(一種二和脂肪酸)十六位碳上接收一個(gè)輕基轉(zhuǎn)變成1SR一輕基二十碳四烯酸ydrox界ieos即entaenoie，18凡HEPE)，然后通過跨細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用，E可以迅速轉(zhuǎn)變成ResolvinEI。另外一條是在細(xì)胞色素P45O單氧合酶作EPA直接轉(zhuǎn)變到18R一HEPE，然后再重復(fù)上述的合成途徑。

每只大鼠口內(nèi)種菌o.lnil于娘溝內(nèi)(見圖3)。同時(shí)聯(lián)合給與高糖飲食(食譜組成包括蔗糖、脫脂奶粉、酵母粉、少量食鹽等)兩周。N組大鼠不予任何處理。圖3(a)示牙跟葉琳單胞菌仍gingivalls，Rg)菌液，偽)示將菌液注射入磨牙牙周的過程。2.2牙周炎模型的確立經(jīng)過牙周栓線結(jié)扎聯(lián)合接種細(xì)菌及高糖飲食兩周后，隨機(jī)抽取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，通過組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)結(jié)合上皮與牙體分離，膠原纖維排列紊亂，牙槽睛頂破壞吸收，以此來確認(rèn)牙周炎動(dòng)物模型的建立1151(見圖4)。圖4建模后大鼠磨牙牙周組織學(xué)觀察似Ex4)。其中箭頭指示為釉牙骨質(zhì)界(cemenio~ljUncti嘰CED， AB(alveolarbone床示牙槽靖，qcemenl肛m)表示牙骨質(zhì)，cT(connectlvetissue)表示結(jié)締組織，側(cè)dentin)表示牙本質(zhì)。

經(jīng)過牙周栓線結(jié)扎聯(lián)合接種細(xì)菌及高糖飲食兩周后，隨機(jī)抽取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，通過組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)結(jié)合上皮與牙體分離，膠原纖維排列紊亂，牙槽睛頂破壞吸收，以此來確認(rèn)牙周炎動(dòng)物模型的建立1151(見圖4)。圖4建模后大鼠磨牙牙周組織學(xué)觀察似Ex4)。其中箭頭指示為釉牙骨質(zhì)界(cemenio~ljUncti嘰CED， AB(alveolarbone床示牙槽靖，qcemenl肛m)表示牙骨質(zhì)，cT(connectlvetissue)表示結(jié)締組織，側(cè)dentin)表示牙本質(zhì)。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2768025