【摘要】： 目的：應(yīng)用大鼠糖尿病(diabetes mellitus,DM)模型,觀察實(shí)驗(yàn)性Ⅱ糖尿病大鼠種植體周圍骨細(xì)胞凋亡調(diào)控基因Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)水平,初步探討細(xì)胞凋亡在糖尿病種植體骨愈合過程中的作用。 方法：選擇2月大SD健康雄性大鼠40只,體重170-230g,隨機(jī)分為正常組對(duì)照、正常種植組、糖尿病模型組。DM模型組按55mg/kg腹腔內(nèi)一次性注射枸櫞酸鈉鏈脲佐菌素溶液建立Ⅱ型DM模型,血糖值高于16.7 mmol/L視為建模成功,否則予以剔除。將建模成功的大鼠隨機(jī)分為糖尿病組和糖尿病種植組。室溫下標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)2兩周后建立正常種植模型和糖尿病種植模型,隨機(jī)選取一側(cè)脛骨近骺端處植入微型種植體支抗。于8周后處死動(dòng)物,采用不帶種植體脫鈣標(biāo)本硬組織切片、脫鈣標(biāo)本切片常規(guī)HE染色,以正常組為對(duì)照,用免疫組織化學(xué)方法,對(duì)糖尿病大鼠種植體周圍Bcl-2和Bax凋亡蛋白因子的表達(dá)進(jìn)行觀察對(duì)比。用TUNEL法檢測(cè)凋亡細(xì)胞。 結(jié)果：(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物觀察：糖尿病模型組大鼠明顯出現(xiàn)消瘦,多飲多食多尿現(xiàn)象,死亡兩只。正常對(duì)照組及正常種植組大鼠均健康存活,無感染或者是意外死亡。所有植入的種植釘均穩(wěn)固,沒有松動(dòng)脫落。植入部位傷口愈合良好。 (2)骨密度測(cè)量：剔脛骨表面的軟組織,以Lunar Prodigy雙能X線骨密度儀測(cè)定右側(cè)脛骨種植體的骨礦物密度。用小動(dòng)物分析軟件進(jìn)行分析可見,模型組骨密度明顯低于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 (3) HE染色觀察：種植組：種植釘周圍炎癥反應(yīng),細(xì)胞核明顯增多,大量的中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),可見大量的骨巨細(xì)胞及炎性的肉芽組著,種植釘與骨界面周圍破骨細(xì)胞活躍,出現(xiàn)局部的骨組織吸收。糖尿病種植組：細(xì)胞核明顯增多,松質(zhì)骨區(qū)種植體表面包繞的骨板較薄,且有較多的區(qū)域與骨髓腔直接接觸；周圍骨小梁稀疏,變細(xì)；骨髓腔內(nèi)可見大量的脂肪細(xì)胞。 (4) TUNEL檢測(cè)：棕色細(xì)胞核為陽性凋亡細(xì)胞,沒顯色的細(xì)胞為陰性細(xì)胞。正常組由于正常骨代謝,骨組織不斷進(jìn)行改建、可檢測(cè)到凋亡細(xì)胞。但是凋亡細(xì)胞在骨基質(zhì)中散在分布,數(shù)量較少。糖尿病組由于出現(xiàn)骨質(zhì)疏松,骨形成與骨吸收平衡失調(diào),骨形成下降,骨形成障礙。因此檢測(cè)到的凋亡細(xì)胞比對(duì)照組有所增多,與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。正常種植組植入種植體8周后在種植體周圍檢測(cè)到凋亡細(xì)胞,凋亡細(xì)胞比正常組略有增多,與正常組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。糖尿病種植組凋亡細(xì)胞明顯增多,與其它各組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (5) bcl-2和bax凋亡蛋白因子標(biāo)記結(jié)果顯示：四個(gè)組均表達(dá)bcl-2和bax,糖尿病種植組bax表達(dá)明顯增高,bcl表達(dá)下降,與其它各組比較差異均有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (6)骨細(xì)胞凋亡率與bcl-2／ba×比值的相關(guān)性分析：骨細(xì)胞凋亡率與bcl-2／bax比值用pearson相關(guān)分析,二者呈負(fù)相關(guān)(p＜0.001),相關(guān)系數(shù)為-0.832。 結(jié)論： 1.糖尿病大鼠種植體周圍骨細(xì)胞凋亡率增加,提示細(xì)胞凋亡與糖尿病狀態(tài)下種植體骨整合降低有關(guān)。 2. Bcl-2／bax下調(diào),提示bcl-2和bax共同參與糖尿病種植體周圍細(xì)胞的凋亡,為糖尿病種植體愈合的研究提供進(jìn)一步的理論基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R783.6
【圖文】：

)400、正常種植組(圖2一)400x

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文粉一汗洪一正常對(duì)照組(圖2一 1)400、正常種植組(圖2一)400x糖尿病組(圖2一 3)400x糖尿病種植組(圖2礴)400x圖2一1、2一2、2一3、24為各組骨細(xì)胞在400倍鏡光下TUNEL法檢測(cè)骨細(xì)胞凋亡。凋亡細(xì)胞呈棕色染，定位于細(xì)胞核。圖2一1為正常組，凋亡細(xì)胞非常少，每個(gè)光鏡下僅有2一3個(gè)，分布散在，沒有規(guī)律性。圖2一為種植組，凋亡細(xì)胞有所增多。圖2一為糖尿病組，可見有大量的凋亡細(xì)胞。圖2一為糖尿病種植組，與前三組比較，凋亡細(xì)胞明顯的增多。

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文正常對(duì)照組(圖3一 1)400、正常種植組(圖3一 2)400x精尿病組(圖3一 3)400x箱尿病種植組(圖34)400x圖3一1、3一、3一3、34為各組骨細(xì)胞bel-2在40()倍光鏡下免疫組化染色，呈棕褐色染色，主要定位于胞槳。圖3一1為正常對(duì)照組，bel-2在細(xì)胞槳中表達(dá)，陽性表達(dá)比較少。圖3一為正常種植組，bel-2表達(dá)有所減少。圖3一3為糖尿病組，bel一表達(dá)明顯減少，染色加深。圖34為糖尿病種植組，與前三組比較，bel-2表達(dá)不僅明顯減少

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本文編號(hào)：2765851