【摘要】： 破骨細胞(osteoclast)是骨吸收的效應(yīng)細胞。它參與牙槽骨的改建,對正畸牙牙齒的移動有著重要的影響。胰島素樣生長因子-1(insulin-like growth factor-1.IGF-1)可調(diào)節(jié)成骨細胞和破骨細胞的分化及功能活性,與骨改建過程密切相關(guān)。c-Src是整合素介導(dǎo)的細胞信號傳導(dǎo)通路的重要環(huán)節(jié)的激酶,對于破骨細胞募集、黏附以及細胞骨架的重組發(fā)揮著重要的作用。本實驗擬從蛋白水平探討關(guān)于IGF-1促進牙周改建及其對正畸牙移動過程中破骨細胞功能活性的機制。 目的:利用大鼠正畸牙動物移動模型.觀察注射外源性rhIGF-1后對正畸牙牙齒移動的影響、牙周組織中破骨細胞數(shù)量及其c-Src表達變化,為正畸臨床使用IGF-1來加速牙齒移動提供可靠的理論依據(jù)。 方法:于SD大鼠上頜左側(cè)第一磨牙和上切牙間安放矯治裝置并施以50g力,建立大鼠上頜磨牙近中移動模型。將80只模型大鼠隨機分為對照組(A組)和實驗組(B組),每組40只,再按觀察時間不同(1d、4d、7d、10d、14d)將A組和B組各分五個亞組(A1/B1、A4/B4、A7/B7、A10/B10和A14/B14),每組8只。實驗組從動物模型建立開始每2天于左側(cè)上頜第一磨牙頰側(cè)粘膜處注射400ng的rhIGF-1,注射體積0.1ml,對照組注射相同體積PBS。觀察1d、4d、7d、10d、14d(從加力的第1天計算)處死大鼠,多聚甲醛透心灌注固定。分別于實驗前后對左上頜磨牙區(qū)取模,超硬石膏灌注模型,用YR-MV1.0顯微圖像測量軟件測量模型中正畸牙移動的距離。取大鼠左側(cè)上頜第一磨牙牙周組織進行組織學(xué)觀察,采用TRAP組織化學(xué)法觀察破骨細胞數(shù)量,免疫組織化學(xué)方法觀察破骨細胞內(nèi)表達c-Src的變化。 結(jié)果:1、壓力側(cè)破骨細胞數(shù)量的變化:①在加力后壓力側(cè)牙周膜中破骨細胞的數(shù)量逐漸增多:②在各觀察時間點,B組壓力側(cè)破骨細胞的數(shù)量均大于A組;破骨細胞的數(shù)量A組在第7天時達最高峰,B組是第4天,A、B兩組在最高峰時的破骨細胞數(shù)量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。③除B1與B4組組內(nèi)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05),其余各組組內(nèi)比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。2、牙齒移動距離測量:①隨著時間的增加,加力后牙齒移動的距離增加:②注射rhIGF-1后大鼠正畸牙移動距離在各觀察的時間點均大于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);③注射1天時,正畸牙移動距離A、B兩組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);而其他時間點均有明顯差異(P＜0.001)。3、破骨細胞中c-Src的表達:c-Src在壓力側(cè)破骨細胞中表達呈現(xiàn)一定的規(guī)律,加力后破骨細胞中c-Src表達迅速升高,A組在第7天達到高峰,B組在第4天達到高峰,隨之緩慢下降。B組中壓力側(cè)破骨細胞內(nèi)c-Src的表達均明顯高于A組(P＜0.01)。 結(jié)論:①外源性rhIGF-1可增加正畸牙牙周組織中破肯細胞的數(shù)量,增強其吸收功能,促進正畸牙牙周組織的改建。②IGF-1能上調(diào)破骨細胞中c-Src的表達,促進骨吸收,加速了正畸牙的移動。
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R783.5
【圖文】：

以利于結(jié)扎絲固定。上領(lǐng)兩切牙聯(lián)扎固定作為支抗牙，將一根鎳欽螺旋拉簧按509力值設(shè)計，固定于上切牙與第一磨牙之間形成一個加力裝置，使左側(cè)上領(lǐng)第一磨牙近中移動，同時磨短下前牙，防止加力裝置被咬斷(圖1)。定期監(jiān)測矯治器，若有損壞和脫落，及時安裝。所有動物在初戴矯治器兩天內(nèi)輔以軟食，之后自由攝食。 2.3SD大鼠隨機分為兩個大組將80只模型大鼠隨機分為對照組(A組)和實驗組(B組)，每組40只，再按加力后觀察時間(ld、4d、7d、10d、14d)不同將A組和B組各分五個亞組(Al忍1、A4舊4、A7忍7、A10忍10天和A14舊14)，每組8只。B組從動物模型建立開始每2天于左側(cè)上領(lǐng)第一磨牙頰側(cè)粘膜處注射40Ong的rhIGF一1，注射體積0.lml，A組注射相同容量的PBS。圖1大鼠正畸骨改建試驗?zāi)Ｐ图恿ρbt Fig.1TheorthodontiesaPPlianee2.4制備大鼠左上領(lǐng)第一磨牙牙周組織石蠟標(biāo)本(1)在加力1d，4d

.J，’圖2.壓力側(cè)破骨細胞組織學(xué)觀察(x400) Fig.2Histologlealobservationsofos儷 clastseellsineompressionside(x400)Al:對照組第1天;Bl:實驗組第1天;A4:對照組第4天;B4:實驗組第4天;A7:對照組第7天;B7:實驗組第7天;A10:對照組第10天;B10:實驗組第10天;A14:對照組第14天;B14:實驗組第14天;.崢?biāo)笧槠乒羌毎麖膱D2中可見，加力第1天，實驗組和對照組均出現(xiàn)少量破骨細胞，細胞形態(tài)較小，細胞內(nèi)含的細胞核較少;加力第4天后，B組較A組破骨細胞的數(shù)量增多，細胞體積增大，胞核數(shù)量增多，染色深;牙槽骨上出現(xiàn)明顯的骨吸收陷窩;加力第7天，B組較A組破骨細胞的數(shù)量增多，牙槽骨上出現(xiàn)明顯的骨吸收陷窩;第10天至第14天

窩;第10天至第14天，破骨細胞數(shù)量變化不大，骨陷窩較平。陽性對照:在HE染色的陽性對照中可見牙槽骨表面有不規(guī)則的骨陷窩，其表面的可見多核嗜酸性巨細胞(藍色箭頭所指，圖3左圖)。陰性對照:對照組孵育的TRAP試劑中不加蔡酚AS一BI磷酸鈉溶液，壓力側(cè)可見細胞核藍染，但胞漿未見著色(圖3右圖)。I公一了迄、今夕矛，·、、洲~‘’一丫一:;J‘萬、:一心..，圖3大鼠正畸牙壓力側(cè)破骨細胞的HE染色陽性對照切片(左側(cè))(x400)大鼠正畸牙壓力側(cè)破骨細胞的TR^p染色陰性對照切片(右側(cè))(x400) Fig.3OsteoelastsstainedwithHEonthePressuresideofPositiveeontrol(left)(x400) TRAPnegativeosteoclastsonthePressureside(right)(x400)

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本文編號：2762913