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慢性牙周炎孕鼠的動物模型建立及IL-6、MMP-3的檢測與分析

發(fā)布時間:2020-07-18 15:33
【摘要】: 目的:慢性牙周炎是一種感染性疾病,是為病原微生物反復(fù)血行播散提供條件。當(dāng)宿主妊娠時,機體的抵抗力下降,將會引發(fā)全身性的炎性反應(yīng),產(chǎn)生更多的炎性細(xì)胞因子。隨病情不斷進展引起炎癥在機體的血行播散,從而對機體構(gòu)成威脅。本文重點探討細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-6(IL-6)以及基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)在孕鼠慢性牙周炎妊娠期時的表達(dá)含量,同時采用先進的定量技術(shù),為臨床在早產(chǎn)的早期預(yù)測及干預(yù)提供基礎(chǔ)依據(jù)。方法:將雌性Wistar大鼠(體重200±20g)20只隨機分為兩組:A組為正常對照組,B組為慢性牙周炎組。各組按照實驗設(shè)計進行相應(yīng)干預(yù)處理,運用牙周結(jié)扎涂菌法制備慢性牙周炎孕鼠模型,觀察牙周組織的病理學(xué)改變,采用實時熒光定量PCR分析胎盤組織中MMP-3、IL-6的基因表達(dá)分析;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清及羊水中的含量,數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果:通過牙周檢查、組織病理學(xué)觀察,成功建立了慢性牙周炎孕鼠模型。實驗組IL-6及MMP-3含量明顯升高,兩組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。熒光定量PCR構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)準(zhǔn)曲線,線性關(guān)系良好。結(jié)論:慢性牙周炎是潛在感染和炎癥的貯藏所,通過長期緩慢的蓄積大量炎癥性,可加重牙周組織的破壞導(dǎo)致機體炎癥性細(xì)胞因子含量的升高;熒光定量PCR技術(shù)可以應(yīng)用于體內(nèi)細(xì)胞因子含量的監(jiān)測,從而進一步指導(dǎo)臨床治療。
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號】:R781.4
【圖文】:

牙根,牙槽骨


結(jié) 果.一般觀察對照組大鼠毛發(fā)光潔,飲食、活動正常,體質(zhì)量持續(xù)增加。實驗組大鼠均不同度出現(xiàn)皮毛粗糙無光澤,少動,食欲不振和體質(zhì)量減輕的現(xiàn)象。.大鼠實驗牙牙周情況.1 大體觀察正常對照組在實驗過程中牙齦組織呈粉紅色,無明顯充血水腫,無炎癥性改變,槽骨未見吸收。驗組通過結(jié)扎,接種混合菌,造成牙周組織感染,四周后造模完成,可見結(jié)扎絲上附著食物殘渣及軟垢,牙齦紅腫,質(zhì)地松軟,探診易出血;可探及牙周袋,并牙齦萎縮、牙槽骨吸收。動物大體觀察大鼠第二磨牙形成慢性牙周炎,上領(lǐng)牙槽明顯吸收、牙根暴露,見圖 1;牙周探診出血,見圖 2。

牙周


結(jié) 果.一般觀察對照組大鼠毛發(fā)光潔,飲食、活動正常,體質(zhì)量持續(xù)增加。實驗組大鼠均不同度出現(xiàn)皮毛粗糙無光澤,少動,食欲不振和體質(zhì)量減輕的現(xiàn)象。.大鼠實驗牙牙周情況.1 大體觀察正常對照組在實驗過程中牙齦組織呈粉紅色,無明顯充血水腫,無炎癥性改變,槽骨未見吸收。驗組通過結(jié)扎,接種混合菌,造成牙周組織感染,四周后造模完成,可見結(jié)扎絲上附著食物殘渣及軟垢,牙齦紅腫,質(zhì)地松軟,探診易出血;可探及牙周袋,并牙齦萎縮、牙槽骨吸收。動物大體觀察大鼠第二磨牙形成慢性牙周炎,上領(lǐng)牙槽明顯吸收、牙根暴露,見圖 1;牙周探診出血,見圖 2。

結(jié)締組織,上皮,慢性牙周炎,色強度


3.熒光定量 RT-PCR 檢測結(jié)果3.1 Total RNA 提取使用 TaKaRa RNAiso Reagent,分別從 8 只慢性牙周炎孕鼠胎盤組織中,取 Total RNA 加入 20μlDEPC 水溶解, 在紫外燈下觀察 RNA 的電泳帶,比較核糖體 RNA(rRNA)28s 和 18s 兩條帶,在 EB 作用下顯色強度為 2:1,說明本實驗提取的 RNA 比較完整。電泳結(jié)果見圖 61 2 3 4 5 6 7 828s18s18

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

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3 李曉軍;孔經(jīng)賈;梁峰冰;陳暉;賀晶;;牙周狀況、血清白細(xì)胞介素-1β水平與妊娠關(guān)系初探[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2007年01期

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本文編號:2761083

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