【摘要】：目的:研究單鏈DNA結合蛋白1(single-stranded DNA-binding protein1,SSB1)在大鼠頜下腺(submandibular gland,SMG)組織及上皮細胞放射性損傷修復中mRNA及蛋白表達的變化規(guī)律,探討SSB1與DNA雙鏈斷裂(double-strand breaks,DSB)損傷修復的關系;并初步探討大鼠頜下腺DSB損傷修復中SSB1與NBS1的變化關系及相互作用。方法:1.SD大鼠~(60)Coγ放射性損傷模型建立,用Quantitative real-time PCR(qRT-PCR)檢測大鼠頜下腺組織正常對照組與照射12Gy放射劑量后不同時間點(1、2、3、4、5、6、7、8小時)組中SSB1基因mRNA的表達;用qRT-PCR、免疫印跡(western blot,WB)分別檢測鼠頜下腺組織正常對照組與不同放射劑量(3、6、9、12、15Gy)組SSB1mRNA及蛋白表達。2.體外培養(yǎng)SMG上皮細胞,用qRT-PCR檢測正常對照組與不同放射劑量(1、2、4、6、8Gy)組大鼠SMG上皮細胞SSB1mRNA的表達;用WB同時檢測正常對照組與不同放射劑量(1、2、4、6、8Gy)組大鼠SMG上皮細胞SSB1及NBS1蛋白表達。3.構建大鼠rAdE5-SSB1-1p2shRNA重組腺病毒,并進一步轉染大鼠SMG上皮細胞(rAd-shRNA組),增設空白質粒對照組(rAd-HK組)及空白對照組(control組),通過WB法檢測SSB1沉默效果及NBS1蛋白表達情況。4.進一步使用大鼠rAdE5-SSB1-1p2shRNA重組腺病毒轉染SMG上皮細胞,沉默SSB1基因表達后,照射不同放射劑量(0、6Gy)后分為rAd-shRNA、rAd-shRNA+IR組,另設單純照射6Gy組(Irradiation,IR組)及空白對照組(control組),用WB檢測SSB1及NBS1蛋白表達情況。結果:1.大鼠頜下腺組織經(jīng)~(60)Coγ12Gy放射劑量照射后,隨著時間的延長,SSB1mRNA的相對表達量先增高后逐漸減低,于4h組達到高峰,p0.05,差異有統(tǒng)計學意義;~(60)Coγ不同放射劑量照射后,隨著放射劑量的增高,SSB1 mRNA、蛋白的相對表達量先增高后減低并皆于9Gy放射劑量組達到峰值,p0.05,差異有統(tǒng)計學意義。2.不同放射劑量照射后大鼠SMG上皮細胞SSB1基因mRNA表達隨劑量的增加而增加,在2Gy組達到最高峰,隨后逐漸下降;SSB1、NBS1蛋白表達量皆隨著照射劑量的增加先增加后降低,在2Gy組達到高峰;p0.05,差異有統(tǒng)計學意義。3.WB分析結果表明,rAd-shRNA組SSB1、NBS1蛋白相對表達量均較rAd-HK組、control組顯著降低,差異均有統(tǒng)計學意義(均p0.05);rAd-HK組與control組比較,均p0.05,差異無統(tǒng)計學意義。4.沉默SMG上皮細胞SSB1基因后,rAd-shRNA+IR組及rAd-shRNA組NBS1基因蛋白表達量與control組相比皆出現(xiàn)下調,p0.05,差異有統(tǒng)計學意義;而IR組SSB1、NBS1蛋白相對表達量較control組高,p0.05,差異有統(tǒng)計學意義。結論:在大鼠頜下腺組織及SMG上皮細胞放射性損傷修復中SSB1基因mRNA及蛋白表達無劑量依賴性,其表達量隨放射劑量的增加先增加后降低;成功沉默大鼠SMG上皮細胞SSB1基因,SSB1沉默可下調NBS1蛋白表達,二者存在協(xié)同關系。在大鼠頜下腺放射性損傷修復中,SSB1可能是DSB修復通路信號啟動的鑰匙。
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R781.7
【圖文】：

圖3-160Coγ12Gy放射后不同時間點大鼠頜下腺組織SSB1mRNA相對表達量re3-1 The relative expression of SSB1 mRNAin submandibular gland tissues after iGy dose注：* 與對照組比較，p<0.05,有統(tǒng)計學意義Coγ不同放射劑量照射后大鼠頜下腺組織 SSB1mRN變化劑量升高SSB1mRNA的相對表達量先增高后減低，放射劑mRNA相對表達量達最高。行單因素方差分析，p<0.05，。組間兩兩比較，6、9、12Gy放射組與對照組比較，p<學意義。表 3-260Coγ不同放射劑量照射后大鼠頜下腺組織 SSB1mRNA 相對表達量he relative expression of SSB1 mRNA in submandibular gland tissues after irradiat

圖3-260Coγ不同放射劑量照射后大鼠頜下腺組織SSB1mRNA相對表達量ure3-2 The relative expression of SSB1 mRNA in submandibular gland tissues afterdifference doses注：* 與對照組比較，p<0.05,有統(tǒng)計學意義oγ不同放射劑量照射后大鼠頜下腺組織SSB1蛋白表劑量升高SSB1蛋白相對表達量先增高后減低，放射劑量白相對表達量達最高，行單因素方差分析，p<0.05，差異有間兩兩比較，6、9、12Gy放射組與對照組比較，p<0.05，義。

圖3-260Coγ不同放射劑量照射后大鼠頜下腺組織SSB1mRNA相對Figure3-2 The relative expression of SSB1 mRNA in submandibular gland tissudifference doses注：* 與對照組比較，p<0.05,有統(tǒng)計學意義3.360Coγ不同放射劑量照射后大鼠頜下腺組織SSB1蛋隨著劑量升高SSB1蛋白相對表達量先增高后減低，放射SB1蛋白相對表達量達最高，行單因素方差分析，p<0.05，義；組間兩兩比較，6、9、12Gy放射組與對照組比較，p<計學意義。

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7 楊志祥;第4講 局部放射性損傷的手術治療[J];人民軍醫(yī);2000年09期

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本文編號：2760255