【摘要】：目的:齲病是目前世界上發(fā)病率最高的口腔疾病之一。齲病的進(jìn)程根據(jù)其入侵牙體組織的深度分為淺、中、深齲。而對(duì)于已經(jīng)形成齲洞的牙體而言,牙體硬組織尚未發(fā)現(xiàn)任何可以再生的手段,因此目前僅有的治療方法就是通過(guò)機(jī)械性或者化學(xué)性的方法預(yù)備去除掉已經(jīng)齲壞組織,并在牙體組織上磨除一定量的健康組織預(yù)備充填洞型,隨后代之以修復(fù)材料充填,這種治療方法會(huì)導(dǎo)致牙體組織過(guò)多喪失,剩余的冠部牙體組織更容易折斷。這一現(xiàn)狀提醒我們,預(yù)防中、深齲的形成,治療早期尚未形成齲洞的患牙是口腔預(yù)防的重要任務(wù),這也符合微創(chuàng)牙科學(xué)(Minimally Invasive Dentistry,MID)的原則。在牙體硬組織尚未形成實(shí)質(zhì)缺損而僅存在脫礦的條件下最大限度地發(fā)揮牙體自身的愈合潛能,阻斷齲病進(jìn)展,修復(fù)缺失的牙體結(jié)構(gòu)和功能是牙體牙髓臨床需要追求的目標(biāo)之一。牙齒再礦化是微創(chuàng)牙科的重要治療技術(shù)之一。牙釉質(zhì)再礦化,對(duì)于臨床預(yù)防和治療如正畸后的白堊齲等釉質(zhì)早期齲壞具有極高價(jià)值。如果能夠利用脫礦牙釉質(zhì)表面尚未發(fā)生損壞的牙體硬組織結(jié)構(gòu)進(jìn)一步仿生再礦化出與天然牙釉質(zhì)相近的結(jié)構(gòu)組織,對(duì)于保留整個(gè)牙體而言起著至關(guān)重要的作用,這一思路也被稱(chēng)作仿生礦化。但現(xiàn)有的再礦化方法操作均比較困難,難以滿(mǎn)足臨床上對(duì)于操作時(shí)間簡(jiǎn)便快捷以及特異性連接在牙釉質(zhì)表面等基本需求,且再礦化的作用結(jié)果與天然牙釉質(zhì)表征相去甚遠(yuǎn)。在牙體發(fā)育過(guò)程中,釉原蛋白對(duì)于牙釉質(zhì)的形成起主要作用。其具有誘導(dǎo)無(wú)定形磷酸鈣顆粒定向有序沿C軸排列并在降解后促進(jìn)無(wú)定形磷酸鈣向羥基磷灰石轉(zhuǎn)化的能力。實(shí)驗(yàn)證明在缺乏了釉原蛋白中關(guān)鍵序列的大鼠中,均出現(xiàn)了肉眼可見(jiàn)的明顯牙釉質(zhì)形成缺陷癥。本研究創(chuàng)新性地合成了一條誘導(dǎo)合成仿生多肽序列,其組成包括了釉原蛋白的關(guān)鍵序列和特異性羥基磷灰石連接序列。旨在提供一個(gè)通過(guò)仿生多肽引導(dǎo)的快速仿生再礦化牙釉質(zhì)齲模型的再礦化方法,通過(guò)體外牙體組織實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證合成的仿生多肽對(duì)于無(wú)定形磷酸鈣顆粒的誘導(dǎo)排列能力以及在牙表面再礦化的能力。進(jìn)而為以后投入臨床牙釉質(zhì)再礦化才做提供一定參考。方法:本實(shí)驗(yàn)選取了10顆正畸前要求拔除的尚未完全萌出的埋伏阻生齒,要求阻生齒完整拔除。將每顆牙體的從軸面四個(gè)方向(頰側(cè)、舌側(cè)、近中、遠(yuǎn)中)使用金剛砂磨頭均勻切割下4片厚度一致的釉質(zhì)片。每顆牙的4個(gè)釉質(zhì)片隨機(jī)分配到A、B、C、D四個(gè)組中。A組、B組、C組均使用37%磷酸進(jìn)行牙釉質(zhì)表面酸蝕30s模仿脫礦后的牙齒表面以及臨床操作,D組作為天然牙對(duì)照組不做酸蝕處理。隨后B組使用經(jīng)次氯酸鈉(Na Cl O)處理的羧甲基殼聚糖/無(wú)定形磷酸鈣(CMC/ACP)再礦化牙體表面,而C組中加入仿生多肽引導(dǎo)的經(jīng)Na Cl O處理的CMC/ACP基于模仿釉原蛋白對(duì)ACP的生物礦化的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果從透射電鏡(TEM)/掃描電鏡(SEM)/激光共聚焦顯微鏡(CLASM)/X射線(xiàn)衍射(XRD)/納米壓痕試驗(yàn)(nano-indentation)表征礦化后的牙體硬組織結(jié)果。結(jié)果:1、CMC可以穩(wěn)定高濃度過(guò)飽和的ACP,形成CMC/ACP納米復(fù)合物。2、在人工釉質(zhì)齲模型中,Na Cl O快速降解CMC/ACP納米復(fù)合物以模擬基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-20)和激肽釋放酶(KLK4)等釉原蛋白降解酶的作用,并在仿生多肽誘導(dǎo)下,使得納米顆粒快速而特異性的在釉質(zhì)表面形成再礦化。3、再礦化得到的牙釉質(zhì)表面機(jī)械性能(硬度及彈性模量)與天然牙釉質(zhì)類(lèi)似。結(jié)論:這種新型合成仿生多肽能夠促進(jìn)ACP快速向HAP晶體轉(zhuǎn)化并特異性的連接在缺損釉質(zhì)表面,形成的仿生HAP結(jié)構(gòu)和機(jī)械強(qiáng)度與天然牙釉質(zhì)晶體類(lèi)似,臨床上可以進(jìn)一步用于白堊齲的直接快速治療和預(yù)防,并符合微創(chuàng)口腔醫(yī)學(xué)的要求。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R788.1
【圖文】：

XRD 特征峰比率、馬爾文粒徑分布統(tǒng)計(jì)、經(jīng)由納米壓痕實(shí)驗(yàn)所得到的樣品表面彈性模量和硬度值的統(tǒng)計(jì)均使用 one-wayANOVA 評(píng)估 95%置信區(qū)間。進(jìn)行了 95%置信水平的多范圍檢驗(yàn)（采用 Fisher 的最小顯著性差異（LSD）程序），以確定統(tǒng)計(jì)上群體的同質(zhì)性。對(duì)于機(jī)械測(cè)試，student’t 檢驗(yàn)用于確認(rèn)酸蝕后、天然牙以及再礦化組之間硬度和彈性模量的差異。1.3 結(jié)果1.3.1 多肽二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)利用在線(xiàn)軟件 PSIPRED 預(yù)測(cè) PA 的二級(jí)結(jié)構(gòu)，預(yù)測(cè)結(jié)果如圖 1 所示。PA 有三個(gè)部分構(gòu)成，包括 CT-16 序列、HA6-1 序列以及期間的 GGGGS 柔性連接體。這兩個(gè)功能序列分別是誘導(dǎo)序列和結(jié)合序列。經(jīng)過(guò)對(duì)其序列的基本性質(zhì)和二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)可知，該合成多肽序列極易溶于水，等電點(diǎn)位于 pH=6.58 處。二級(jí)結(jié)構(gòu)中 CT-16 序列發(fā)生螺旋，與釉原蛋白中 C 末端表現(xiàn)一致。并且二級(jí)結(jié)構(gòu)中并未表現(xiàn)出多肽序列中的彼此影響，三段結(jié)構(gòu)均可完整存在，未發(fā)生序列之間的螺旋或者折疊結(jié)構(gòu)。這一結(jié)果為多肽序列發(fā)揮各自功能奠定了基礎(chǔ)。

11圖 3：馬爾文激光顆粒計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)納米顆粒直徑分布圖。1.3.3 再礦化后納米壓痕及機(jī)械性能比較結(jié)果從納米壓痕檢測(cè)得到的負(fù)載曲線(xiàn)如圖 4 所示。在相同的載荷力（100mN）作用下，不同組釉質(zhì)表面的位移深度存在明顯差異。A 組表現(xiàn)出最深的位移（圖4 中的黑色曲線(xiàn)）。相比之下，B 組和 C 組（分別為橙色和藍(lán)色線(xiàn)）的位移深度相比于 A 組有了明顯的回復(fù)。C 組的再礦化結(jié)果表面合成多肽組的釉質(zhì)的力學(xué)性能恢復(fù)程度最高。與天然牙釉質(zhì)組（粉紅線(xiàn)）最為接近。根據(jù)納米壓痕檢測(cè)得到了全部樣本表面的彈性模量和硬度值。其統(tǒng)計(jì)結(jié)果分別記錄在表 1 中。脫礦處理后各組的彈性模量和硬度值均顯著降低（p＜0.001）。而 C 組經(jīng)由合成多肽引導(dǎo)的經(jīng) NaClO 處理的 CMC/ACP 組顯出出與天然牙釉質(zhì)相近的（P > 0.05）彈性模量和硬度，表現(xiàn)出本實(shí)驗(yàn)再礦化方法對(duì)于脫

不同組釉質(zhì)表面的位移深度存在明顯差異。A 組表現(xiàn)出最深的位移（圖4 中的黑色曲線(xiàn)）。相比之下，B 組和 C 組（分別為橙色和藍(lán)色線(xiàn)）的位移深度相比于 A 組有了明顯的回復(fù)。C 組的再礦化結(jié)果表面合成多肽組的釉質(zhì)的力學(xué)性能恢復(fù)程度最高。與天然牙釉質(zhì)組（粉紅線(xiàn)）最為接近。根據(jù)納米壓痕檢測(cè)得到了全部樣本表面的彈性模量和硬度值。其統(tǒng)計(jì)結(jié)果分別記錄在表 1 中。脫礦處理后各組的彈性模量和硬度值均顯著降低（p＜0.001）。而 C 組經(jīng)由合成多肽引導(dǎo)的經(jīng) NaClO 處理的 CMC/ACP 組顯出出與天然牙釉質(zhì)相近的（P > 0.05）彈性模量和硬度，表現(xiàn)出本實(shí)驗(yàn)再礦化方法對(duì)于脫

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;使用電動(dòng)牙刷,會(huì)破壞牙釉質(zhì)嗎?[J];婚姻與家庭(性情讀本);2017年08期

2 孫新華,劉暢,朱虹;正畸多次酸處理后牙釉質(zhì)表面的掃描電鏡觀察[J];口腔醫(yī)學(xué)縱橫;1999年03期

3 吳杰;;有關(guān)熱帶特點(diǎn)牙齒氟中毒文獻(xiàn)述評(píng) 牙齒氟中毒的臨床診斷[J];地方病譯叢;1988年05期

4 岳松齡,劉天佳,溫興民;齲敏感部位牙釉質(zhì)表層結(jié)構(gòu)的掃描電鏡觀察[J];華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1988年04期

5 蘇倩倩;李鐵軍;陳新明;;未萌牙釉質(zhì)表面結(jié)構(gòu)的掃描電鏡觀察[J];口腔醫(yī)學(xué)縱橫;1988年02期

6 楊蕓珠;烏愛(ài)菊;邵家玨;翁方敏;馮希平;李國(guó)j;許立新;陳解萍;;局部用氟后牙釉質(zhì)表面形態(tài)的改變(掃描電鏡觀察)[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志;1988年03期

7 陳思倫;;人牙釉質(zhì)表面起源的有機(jī)結(jié)構(gòu)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊(cè);1989年03期

8 ;使用電動(dòng)牙刷,會(huì)破壞牙釉質(zhì)嗎?[J];戀愛(ài)婚姻家庭.青春;2017年11期

9 黃華,周永明,林燕,韋春華,陳若澤;過(guò)氧脲素漂白劑對(duì)牙釉質(zhì)表面特性的影響[J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;1998年01期

10 蘭青，周磊，張東輝;家庭漂白治療中牙釉質(zhì)表面結(jié)構(gòu)變化的掃描電鏡觀察[J];廣東牙病防治;1995年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前7條

1 胡靜浩;陳吉俊;陳暉;;24小時(shí)內(nèi)漂白劑和氟化劑對(duì)牙釉質(zhì)表面細(xì)菌粘附的影響[A];全國(guó)第八次牙體牙髓病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

2 程敏;馮波;蔡家駿;朱虹;;不同胚齡人胚牙釉質(zhì)表面掃描電鏡觀察[A];全國(guó)第四次牙體牙髓病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];1995年

3 孫新華;朱虹;;正畸多次酸處理后牙釉質(zhì)表面的掃錨電鏡觀察[A];第五次全國(guó)口腔正畸學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];1997年

4 宋丹丹;方慧敏;曹陽(yáng);俞青;;Er:YAG激光預(yù)備對(duì)牙釉質(zhì)表面性能及樹(shù)脂粘結(jié)強(qiáng)度的影響[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)口腔修復(fù)學(xué)專(zhuān)業(yè)委員會(huì)第十次全國(guó)口腔修復(fù)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2016年

5 馬飛;薛毅;張立紅;夏鎮(zhèn)斌;夏纓;;牙面色素斑祛除方法的臨床與基礎(chǔ)研究—植酸處理牙釉質(zhì)表面后再礦化的掃描電鏡觀察[A];全國(guó)第四次牙體牙髓病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];1995年

6 尹路;姚江武;王輝;;兩種冷光美白劑對(duì)牙釉質(zhì)表面結(jié)構(gòu)的影響[A];2009“牙齒顏色的識(shí)別與美學(xué)再現(xiàn)”專(zhuān)題研討會(huì)論文匯編[C];2009年

7 肖作慧;王浩榮;陳陣;闕克華;張旭;;引導(dǎo)納米無(wú)定形磷酸鈣定向有序再礦化牙釉質(zhì)的研究[A];第十二次全國(guó)口腔材料學(xué)術(shù)會(huì)第五屆口腔材料專(zhuān)委會(huì)換屆會(huì)議論文集[C];2017年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 李啟順;氟斑牙的一些特點(diǎn)[N];家庭醫(yī)生報(bào);2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前5條

1 夏晶;牙釉質(zhì)微納尺度下的摩擦磨損機(jī)制研究[D];西南交通大學(xué);2017年

2 廖穎敏;電誘導(dǎo)牙釉質(zhì)表面羥基磷灰石涂層的制備及其機(jī)理研究[D];廈門(mén)大學(xué);2007年

3 張亞鋒;人牙釉質(zhì)表面唾液吸附膜的粘附及潤(rùn)滑性能研究[D];西南交通大學(xué);2015年

4 王志偉;牙釉質(zhì)表面的功能化及其仿生礦化的應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D];暨南大學(xué);2008年

5 華李成;若干哺乳動(dòng)物牙齒結(jié)構(gòu)性能與食性的關(guān)系研究[D];西南交通大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 肖作慧;仿生肽引導(dǎo)納米無(wú)定形磷酸鈣再礦化脫礦牙釉質(zhì)[D];天津醫(yī)科大學(xué);2018年

2 歐陽(yáng)燕;底涂—沖洗法提高自酸蝕粘接劑牙釉質(zhì)微拉伸粘接強(qiáng)度[D];浙江大學(xué);2018年

3 韓瑋;三種哺乳動(dòng)物牙釉質(zhì)的酸蝕與再礦化行為研究[D];西南交通大學(xué);2018年

4 宗治方;牙釉質(zhì)微/納結(jié)構(gòu)精確數(shù)值建模及有效模量計(jì)算[D];西南交通大學(xué);2018年

5 付善民;牙釉質(zhì)表面處理儀的研制及其臨床應(yīng)用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

6 胡靜浩;24小時(shí)內(nèi)漂白劑和氟化劑對(duì)牙釉質(zhì)表面細(xì)菌粘附的影響[D];浙江大學(xué);2012年

7 何立志;牙釉質(zhì)表面原位修復(fù)涂層制備與表征[D];廈門(mén)大學(xué);2007年

8 李聚慧;牙胚外傷及氟牙癥對(duì)大鼠牙釉質(zhì)發(fā)育影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2017年

9 高蔚虹;冷光美白對(duì)牙釉質(zhì)影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2006年

10 吳世蓮;超聲波潔治后不同拋光方法對(duì)牙體表面影響的掃描電鏡觀察[D];浙江大學(xué);2007年

本文編號(hào)：2758450