【摘要】： 磁場力是正畸中尚待開發(fā)的重要力源。隨著磁性材料的廣泛開發(fā)和利用，磁力正畸在國內(nèi)外得到了廣泛開展，但磁力應(yīng)用的范圍、磁力正畸的機理尚不清楚。眾所周知，牙—牙槽骨獨特的生物學(xué)特性是正畸牙得以移動的基礎(chǔ)，而成骨細胞是正畸牙移動過程中骨形成的主要效應(yīng)細胞，并對破骨細胞的分化和成熟具有重要調(diào)控作用，成骨細胞在骨改建的過程中處于一個中心調(diào)控的地位。目前，關(guān)于靜磁場作用下成骨細胞功能活性改變及其相應(yīng)機制的研究，國內(nèi)外報道甚少。本研究的目的是研究靜磁場信號對體外培養(yǎng)成骨細胞形態(tài)、功能、信號傳導(dǎo)及細胞骨架改建的影響及應(yīng)答變化，為闡明磁力正畸的應(yīng)用機理提供實驗依據(jù)。 本課題利用靜磁場加載裝置，對體外培養(yǎng)的成骨細胞進行加載，結(jié)合分子生物學(xué)檢測技術(shù)和電子掃描電鏡、激光共聚焦顯微鏡等儀器，觀察了不同時間、不同磁場強度的靜磁場對成骨細胞細胞形態(tài)及細胞表面超微結(jié)構(gòu)、細胞增殖活性、堿性磷酸酶活性、細胞內(nèi)鈣離子濃度及細胞骨架表達及改建的影響，初步探討了磁力正畸過程中不同強度的靜磁場對成骨細胞形態(tài)及功能活性的作用及其機制。本研究得出以下結(jié)論： 1．采用組織塊法成功培養(yǎng)出大量生長穩(wěn)定的成骨細胞。 2．倒置相差顯微鏡下未能發(fā)現(xiàn)靜磁場對成骨細胞形態(tài)、生長和排列的影響；電子掃描電鏡顯示本實驗所選用的靜磁場都引起了成骨細胞細胞表面超微結(jié)構(gòu)的改建：暴露于靜磁場后，成骨細胞細胞表面微絨毛增多，并且融合成為囊泡；隨著曝磁時間的增加，細胞表面的微絨毛呈層狀，囊泡樣結(jié)構(gòu)增加，相互融合成較大的囊泡。 3．不同時間、不同強度的靜磁場作用對成骨細胞的增殖活性影響不同。50mT的靜磁場從24小時到72小時可以持續(xù)促進成骨細胞的增殖；而8mT和160mT的靜磁場則分別經(jīng)歷了24小時和48小時的潛伏期后，才開始出現(xiàn)促增殖作用。 4．靜磁場作用可以增加成骨細胞的堿性磷酸酶活性。與8mT、和160mT的靜磁場相比，50mT的靜磁場促進成骨細胞堿性磷酸酶活性增加更大；隨著靜磁場加載時間的延長，堿性磷酸酶活性增加的幅度減小。 5．靜磁場可以降低成骨細胞細胞內(nèi)鈣離子的濃度。 6．本實驗所選用的靜磁場可以導(dǎo)致成骨細胞細胞骨架的改建和重組。靜磁場作用后，成骨細胞細胞骨架蛋白表達上調(diào)，細胞骨架蛋白向細胞核集中。 綜上所述，本研究認(rèn)為，一定強度的靜磁場可以促進成骨細胞的增殖，可以增加成骨細胞的堿性磷酸酶活性。其機制可能是： 1．靜磁場作用于成骨細胞的細胞膜，引起細胞膜表面鈣泵的活性發(fā)生改建，降低了成骨細胞細胞內(nèi)的鈣離子濃度，引起成骨細胞細胞內(nèi)信號的改變，繼而導(dǎo)致成骨細胞生物學(xué)活性的改變； 2．靜磁場通過直接或間接的作用于成骨細胞細胞骨架，將磁性信號的傳遞到細胞內(nèi)，最終導(dǎo)致成骨細胞生物學(xué)活性的改建。 本研究提示，在正畸臨床應(yīng)用磁力進行矯治的時候，要選擇合適的磁場強度，在骨形成和骨改建過程中，成骨細胞對不同的磁場強度有不同程度的表達反應(yīng)。本研究豐富了我們對磁力正畸骨改建分子機理的認(rèn)識，為進一步闡明磁力正畸的應(yīng)用提供了具有一定參考價值的實驗依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R783.5
【圖文】：

原代培養(yǎng)7天后即可觀察到成骨細胞從剪碎的骨片周圍游離出來。原代培養(yǎng)10天后，可見成骨細胞在骨片周圍聚集成片狀(圖l一1)。18天后，成骨細胞鋪滿瓶底，進行傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)的細胞如圖1一2所示。2.成骨細胞的細胞鑒定結(jié)果光鏡下觀察可見貼壁后細胞主要呈梭形或三角形，圓形或橢圓形的細胞核居中或偏于細胞一側(cè)，并有數(shù)量不等、長短不一的突起伸出，呈集落化生長趨勢，符合成骨細胞的形態(tài)學(xué)特征。培養(yǎng)的細胞堿性磷酸酶染色陽性(圖1一3)，鈣化結(jié)節(jié)染色陽性(圖1一4)，進一步證明了培養(yǎng)的細胞為成骨細胞。圖1一1原代成骨細胞圖1一2傳代的成骨細胞氣、.產(chǎn)了產(chǎn)、擴入圖1一4鈣化結(jié)節(jié)染色陽性.粉，﨑一先、鼓少

本文編號：2756773