【摘要】：咬合創(chuàng)傷是口腔臨床常見疾病之一,是由于咬合關(guān)系不正常或咬合力量不協(xié)調(diào),個別或某幾個牙所受的咬合力量超過其牙周組織的耐受力而造成的牙周組織損傷情況,咬合創(chuàng)傷嚴(yán)重者可導(dǎo)致牙槽骨的吸收,牙槽骨吸收是一個復(fù)雜的生物過程,涉及成骨細胞、破骨細胞、成千上萬細胞因子及其構(gòu)成的細胞信號傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)。對咬合創(chuàng)傷導(dǎo)致骨吸收機制的研究是目前口腔醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的一大熱點,其具體分子生物學(xué)機制目前尚不清楚,有待進一步研究。本實驗希望通過建立大鼠咬合創(chuàng)傷動物模型,觀察咬合創(chuàng)傷不同時間大鼠牙周組織破壞情況,并采用全功能組表達譜基因芯片技術(shù)對大鼠咬合創(chuàng)傷早期牙槽骨基因表達差異進行初步探討,進一步明確咬合創(chuàng)傷導(dǎo)致牙槽骨吸收的分子生物學(xué)機制。 實驗一咬合創(chuàng)傷對大鼠牙周組織的影響 目的： 研究不同作用時間咬合創(chuàng)傷對大鼠牙周組織的影響。 方法： 通過在大鼠右側(cè)上頜第一磨牙粘接鋼絲法建立同側(cè)下頜咬合創(chuàng)傷實驗動物模型,分別于24小時、3天、7天、14天后取該側(cè)下頜第一磨牙牙槽骨為實驗組,以正常大鼠右側(cè)下頜第一磨牙為對照組,進行X線攝像觀察、HE染色、MMP-9免疫組織化學(xué)染色,采用單因素方差分析對免疫組織化學(xué)染色結(jié)果進行統(tǒng)計分析。 結(jié)果： X線片顯示對照組骨小梁清晰,骨硬板連續(xù)完整,未見明顯骨吸收區(qū)。24h組、3天組、7天組未見明顯牙周膜增寬,14天組根尖區(qū)牙周膜明顯增寬。 HE染色結(jié)果顯示：隨著咬合創(chuàng)傷時間增加,牙周纖維出現(xiàn)斷裂、變性,多核細胞逐漸,出現(xiàn)骨吸收陷窩,且病變隨咬合創(chuàng)傷時間延長越來越顯著。 免疫組織化學(xué)染色顯示：咬合創(chuàng)傷各組大鼠根周牙槽骨中均見MMP-9陽性染色細胞,且隨著咬合升高時間的延長,陽性細胞數(shù)目逐漸增多。MMP-9陽性染色細胞百分比24h組與對照組無統(tǒng)計學(xué)差異,其余各組與對照組相比皆有統(tǒng)計學(xué)差異。 結(jié)論： X線片、HE染色及免疫組織化學(xué)染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)咬合創(chuàng)傷可以導(dǎo)致大鼠牙周組織破壞,且破壞隨時間延長越來越嚴(yán)重。 實驗二大鼠咬合創(chuàng)傷早期牙槽骨基因表達差異的基因芯片研究 目的： 對大鼠咬合創(chuàng)傷早期牙槽骨基因表達差異進行初步探討,進一步明確咬合創(chuàng)傷導(dǎo)致牙槽骨吸收的分子生物學(xué)機制。 方法： 建立大鼠咬合創(chuàng)傷動物模型,咬合創(chuàng)傷24h取大鼠雙側(cè)下頜牙槽骨組織,提取樣本總RNA進行包括27000個基因在內(nèi)的全功能組表達譜基因芯片檢測,對差異表達基因進行Pathway和GO分析,并選取代表性基因采用實時定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)對芯片結(jié)果進行驗證。 結(jié)果： 全功能組表達譜基因芯片結(jié)果顯示,與對側(cè)牙槽骨組織相比咬合創(chuàng)傷側(cè)差異表達基因共有586個,其中表達增強166個,表達降低420個,Pathway分析涉及106個不同的信號通路,GO分析主要涉及270個不同的功能分類,RT-PCR驗證與芯片結(jié)果一致。 結(jié)論： 通過芯片結(jié)果、Pathway及GO分析發(fā)現(xiàn)：咬合創(chuàng)傷24h牙槽骨正常的骨平衡狀態(tài)已經(jīng)被打破,成骨細胞及相關(guān)的成骨活動受到抑制,而此時破骨細胞活性及破骨現(xiàn)象增強尚未顯現(xiàn)。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R782

【共引文獻】

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