【摘要】： 顳下頜關節(jié)紊亂病(temporomandibular disorders, TMD)可累及咀嚼肌和顳下頜關節(jié)(temporomandibular joint, TMJ)及其周圍軟組織,以女性多見,臨床上主要表現(xiàn)為顳下頜關節(jié)彈響、口頜面部疼痛、下頜運動障礙等�？陬M面疼痛和TMD與軀體及神經系統(tǒng)結構的病理狀態(tài)或病癥密切相關,這一組疾病屬于口頜面區(qū)域非牙源性疼痛,并且作為骨骼肌紊亂病的一個亞類。目前關于顳下頜關節(jié)紊亂病咀嚼肌疼痛的原因以及其與咬合異常之間的關系尚存在巨大的爭議。 本研究以雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠為實驗對象,首先建立了急、慢性咬合干擾動物模型,然后以行為學研究方法檢測各組大鼠施加咬合干擾前后雙側顳肌和咬肌的機械壓痛敏感度(痛敏分值),最后采用免疫組織化學方法研究雙側咬肌內肌球蛋白重鏈表達變化情況。 1實驗方法 1.1大鼠咬合干擾模型的建立方法 1.1.1急性咬合干擾:截取一1.5 mm長的5號針管并且夾扁,制成寬約1.0mm,厚約0.5mm的咬合加高裝置,用結扎絲穿過大鼠左側上頜第二磨牙近遠中鄰間隙,將該裝置“8”字形結扎固定于第二磨牙牙合面上,形成個別后牙的急性咬合干擾。每天檢查,以保證所加咬合干擾沒有脫落,直至實驗結束。 1.1.2慢性咬合干擾:在大鼠左側上頜第一、二磨牙之間插入一正畸用橡皮筋(3 M Unitek, 1/8#),并盡量置于齦側以避免與對頜牙發(fā)生咬合接觸,然后盡量剪短皮筋以避免影響鄰近軟組織的功能活動。在皮筋彈性力作用下,以第二、第三磨牙為支抗,推第一磨牙向近中移動,約7天后第一磨牙向近中移動達0.8mm左右,從而形成上、下頜第一磨牙尖窩不吻合的咬合狀態(tài)。每天檢查,以保證所加皮筋沒有脫落,直至實驗結束。 1.2分組情況 實驗動物共30只,隨機分為以下5組:(1)急性咬合干擾組(具體方法見上述內容);(2)慢性咬合干擾組(具體方法見上述內容);(3)急性去干擾物組:操作同急性咬合干擾組,在形成急性咬合加高后第10天時卸除加高物;(4)慢性去干擾物組:操作同慢性咬合干擾組,在插入皮筋后第10天時拆除皮筋,使近中移動的第一磨牙自然回位。實驗中觀察,約3～5天后(第14天左右)前移的第一磨牙基本回復到原來位置;(5)空白對照組:不做任何操作,同環(huán)境下飼養(yǎng)直至取材。 1.3行為學測試方法 參照1999年Ren所報道方法,據(jù)von Frey尼龍毛粗細和動物痛覺反應次數(shù),確定顳肌和咬肌疼痛分值,對比實驗前后疼痛分值的變化。 1.4免疫組織化學方法檢測 采用石蠟切片、免疫組化ABC方法,檢測咬肌肌纖維中肌球蛋白重鏈表達比例變化及分布規(guī)律。 2結果 2.1行為學結果 急、慢性咬合干擾均可增高顳肌和咬肌痛敏分值(P0.05),急性咬合干擾組更明顯,敏感程度由大到小為:干擾側顳肌、干擾側咬肌、干擾對側顳肌(P0.05),對干擾對側咬肌的影響不明顯。干擾側咬肌和顳肌分別在實施急性咬合干擾第2、第3天,在實施慢性咬合干擾第4、第5天痛敏分值便開始升高,之后痛敏分值持續(xù)增高,于1周左右達到高峰,最后逐漸回落。但是急性去干擾物組痛敏分值回落速度明顯快于持續(xù)急性咬合干擾組(P0.05),而慢性去干擾物組痛敏分值回落速度則明顯慢于持續(xù)慢性咬合干擾組(P0.05),干擾對側顳肌的痛敏分值變化與此類似,但幅度較小。慢性去干擾物組痛敏分值回落較慢的原因可能是前移后復位的磨牙形成了二次咬合干擾的結果,而單純前移磨牙的慢性咬合干擾組則由于局部磨耗等代償機制,使得干擾程度自然緩解之緣故。 2.2免疫組化結果 急、慢性咬合干擾組肌球蛋白重鏈表達與對照組差異顯著,主要表現(xiàn)為慢性咬合干擾15天組咬肌內MHC-Ⅱ的表達較對照組明顯增加(P0.05),急性15天組和慢性15天組之間有統(tǒng)計學差異,慢性15天比急性15天陽性細胞數(shù)表達更明顯(P0.05)。左右側之間無明顯差異(P0.05),急、慢性咬合干擾7天組與對照組差異不顯著(P0.05),咬合干擾作用時間(7天、15天)對咬肌內肌球蛋白重鏈表達的影響不明顯(P0.05),咬肌深、淺層以及前、中、后部各部位之間肌球蛋白重鏈表達未見有明顯統(tǒng)計學差異(P0.05)。 3結論 3.1行為學方面 急、慢性咬合干擾均可致顳肌和咬肌痛覺敏感,急性咬合干擾較慢性咬合干擾影響更為明顯,且急性咬合干擾痛敏出現(xiàn)峰值的時間要早于慢性咬合干擾,去除咬合干擾有助于緩解咀嚼肌痛敏。 3.2組織學方面 急、慢性咬合持續(xù)干擾可致咬肌肌纖維表現(xiàn)型比例的轉換,含有肌球蛋白重鏈Ⅱ型(MHC-Ⅱ)肌纖維比例增多,Ⅰ型纖維所占比例減少,且慢性咬合干擾組更為明顯。
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R782
【圖文】：

圖 1 骨骼肌纖維的基本結構（基膜肌內膜肌束膜肌外膜）肌肉組織是由有收縮功能的肌細胞構成的組織，肌細胞呈細長纖】，因此肌細胞又稱肌纖維，咀嚼肌是骨骼肌，其肌纖維為長柱

圖 3 人類升頜�。D肌、嚼肌、翼內�。┖徒殿M肌（下頜舌骨肌、二腹肌、頦舌骨肌）肌纖維類型的分布圖。更多相關資料，見于Korfage et al. (2001)[83]。由于不同的分類方法，使得不同的研究中，人類咀嚼肌的纖維的組成有很大的不同，如上【圖 3】所示[83]為升頜�。D肌、嚼肌、翼內肌）和降

第四軍醫(yī)大學碩士學位論文圖2-1 大鼠深淺層咬肌取材示意圖肌肉切口位與肌纖維走向垂直1.7 染色方法1.7.1 HE 染色【圖 2-2d（附錄）】蘇木精配方（haematoxylin）：A：蘇木精 1g 加無水酒精 10ml 完全溶解。B：硫酸鉻鉀 20g 蒸餾水加溫溶解。AB 液混合完全溶解后，繼續(xù)加溫，煮沸后退火，加入 0.5-1gHgO，冷卻過濾后隔天使用。伊紅配方（Eosin）：伊紅 0.5-1g，用 95%酒精 100ml 完全溶解后皆可使用。石蠟切片染色步驟：(1) 石蠟包埋組織以 5um 厚度進行切片，裱于 APES 處理的載玻片上。石蠟切片置 37℃烤箱過夜，實驗前 40min 放入 60℃烤箱。(2) 切片浸入二甲苯溶液脫蠟，兩次，每次 30min。依次浸入 100%酒精兩次，95%酒精兩次

【參考文獻】

相關期刊論文 前8條

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本文編號：2755127