【摘要】：目的：基于人羊膜上皮細胞在體外誘導下具有向唾液腺腺泡細胞分化的能力,進一步研究人羊膜上皮細胞在小鼠放射損傷唾液腺中分化的能力,為唾液腺疾病的干細胞治療提供新的種子細胞來源。 方法：(1)本實驗采用機械法和胰酶消化法從人羊膜組織中分離人羊膜上皮細胞(hAECs),在體外進行細胞培養(yǎng),通過流式細胞(FCM)技術和免疫組化鑒定人羊膜上皮細胞表型。(2)雄性C57BL/6小鼠40只,在唾液腺局部給予15Gy劑量的x線放射損傷。(3)經(jīng)原位移植途徑將分離純化的第二代人羊膜上皮細胞注入到放射損傷小鼠下頷下腺內(nèi),非移植組注入等量無血清L-DMEM培養(yǎng)基。于移植后1w、2w、4w、6w分別進行組織病理學、雙重免疫熒光染色檢測。 結果：(1)分離的人羊膜上皮細胞具有干細胞表型特征,CD29、CD73和CK19表達陽性,不表達CD44、CD34、CD45和CD71。(2)放射損傷后小鼠體重明顯下降,放射后小鼠唾液流量明顯小于正常小鼠。組織病理學檢查見放射損傷小鼠下頜下腺放射后第6天可見腺體內(nèi)血管充血,10天腺小葉內(nèi)見少量空隙。放射后30天見大量漿液性腺泡消失。(3)人羊膜上皮細胞移植后1w、2w、4w、6w均可檢測到hAECs的存活,人羊膜上皮細胞移植后4周冰凍切片雙重免疫熒光染色見頜下腺中hAECs表達淀粉酶、CK7、CK14。人羊膜上皮細胞原位移植后,組織病理切片1周后可以觀察到漿液性腺泡的數(shù)量增加,通過HE切片觀察,1個月后,放射損傷的頜下腺中漿液性腺泡的數(shù)量約恢復至正常水平。(4) hAECs移植后1個月小鼠唾液流量平均約為(125.68±18.64)μL/15min,為正常小鼠唾液流量約(259.36±9.74)μL的48.5%。明顯高于未移植小鼠。 結論：人羊膜上皮細胞可在放射損傷小鼠頜下腺原位分化成腺泡細胞和導管上皮細胞,改善唾液腺功能,提示人羊膜上皮細胞可能成為唾液腺損傷修復重建新的細胞來源。
【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R782

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 周靜萍;劉來奎;江宏兵;陶德韜;;肌上皮細胞的表型分化在涎腺發(fā)育及多形性腺瘤中的意義[J];癌變.畸變.突變;2006年02期

2 周建霞;;溫針灸配合推拿治療顳下頜關節(jié)紊亂病療效觀察[J];中醫(yī)藥臨床雜志;2006年06期

3 張旭,李矛,耿正瑤;CDIC人工種植體364枚成敗原因的臨床觀察[J];安徽衛(wèi)生職業(yè)技術學院學報;2004年04期

4 宋中娥;李紅梅;鮑軍燕;;種植牙手術的護理配合[J];安徽衛(wèi)生職業(yè)技術學院學報;2008年03期

5 余青山;;下頜智齒拔除前后應用地塞米松 甲硝唑預防干槽癥的臨床觀察[J];安徽醫(yī)學;2010年04期

6 張順花;唇裂修復手術的護理配合體會[J];蚌埠醫(yī)學院學報;2005年06期

7 何廣;;微型鈦板堅固內(nèi)固定治療下頜骨骨折30例[J];蚌埠醫(yī)學院學報;2009年09期

8 周永慶;余偉;;上頜竇未分化癌1例[J];蚌埠醫(yī)學院學報;2009年12期

9 俞輝明;房進;;腭裂修復術后松弛創(chuàng)腔不同處理方法的療效比較[J];蚌埠醫(yī)學院學報;2010年02期

10 楊長有,毛永惠,魯偉,申麗紅,陳粵麗,張駿誠;拔除阻生第三磨牙滑入咽旁間隙臨床分析[J];北京口腔醫(yī)學;2004年04期

相關會議論文 前4條

1 鐘波;袁久莉;劉麗欣;牟盼盼;;小兒頜面部外傷清創(chuàng)縫合術的手術配合及護理[A];吉林省護理學會外科學護理分會第十五次學術會議論文匯編[C];2011年

2 劉鴻斌;毛永惠;徐穩(wěn);孟麗蕊;;口腔頜面部外傷143例臨床分析[A];玉溪市醫(yī)學會第九屆口腔學術年會論文集[C];2009年

3 金瑛;方欣;;溫針灸治療顳下頜關節(jié)功能紊亂病36例[A];第三屆浙江省中西部科技論壇論文集（第六卷 中西醫(yī)分卷）[C];2006年

4 李彥;;口腔種植手術的護理和配合[A];2014年河南省五官科專科護士培養(yǎng)及崗位管理學術會議論文集[C];2014年

相關博士學位論文 前10條

1 李略;人羊膜間充質(zhì)干細胞向視網(wǎng)膜神經(jīng)元樣細胞誘導分化及其鈉離子通道電生理特性的實驗研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2008年

2 黃紹輝;體外培養(yǎng)構建組織工程化頜下腺導管組織的實驗研究[D];中國醫(yī)科大學;2003年

3 鄧春富;頜下腺組織工程生物衍生支架材料的制備及生物學性質(zhì)的實驗研究[D];中國醫(yī)科大學;2004年

4 吳智遠;人羊膜上皮細胞移植治療大鼠脊髓損傷的實驗研究[D];蘇州大學;2005年

5 何園;ATM與口腔黏膜癌變[D];四川大學;2004年

6 張清彬;顴骨的應用解剖和顴骨復合體骨折的臨床研究[D];武漢大學;2005年

7 丁大成;干燥綜合征唇腺中細胞因子表達研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;1994年

8 薛輝;腮腺腺細胞體外培養(yǎng)模型建立及細胞外Ca～（2+）對細胞的作用[D];第四軍醫(yī)大學;1995年

9 武家才;1.Doxycycline誘導細胞凋亡及其機制 2.GDNF修飾的人羊膜上皮細胞在大鼠MCAO模型中的治療作用[D];中國科學院研究生院（上海生命科學研究院）;2006年

10 金玲;慢病毒載體介導hTERT基因修飾的人羊膜上皮細胞重建角膜表層的實驗研究[D];暨南大學;2009年

相關碩士學位論文 前10條

1 賀彬;水蛭素聯(lián)合阿霉素對人舌鱗癌細胞株TCA8113作用機制的研究[D];廣西醫(yī)科大學;2011年

2 文靜;2型糖尿病大鼠血清AGEs與種植體周圍骨代謝相關性研究[D];山西醫(yī)科大學;2011年

3 程永峰;TRAF6在成釉細胞瘤中表達的研究[D];山西醫(yī)科大學;2010年

4 王晉;三叉神經(jīng)痛射頻治療對下頜骨骨密度影響的研究[D];瀘州醫(yī)學院;2011年

5 吳凌莉;下頜骨頦部受瞬間外力應力分布的三維有限元分析[D];蘭州大學;2011年

6 胡志偉;白藜蘆醇對涎腺腺樣囊性癌細胞系ACC-M增殖和凋亡的影響[D];河北醫(yī)科大學;2011年

7 李培;口腔鱗癌患者應用平陽霉素誘導化療療效同Ki-67、VEGF、P16及其預后的相關性研究[D];河北醫(yī)科大學;2011年

8 馮小倩;人羊膜上皮細胞的性質(zhì)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2010年

9 邱于芝;牙周手術治療牙齦瘤臨床病例報告[D];浙江大學;2011年

10 李希吉;顳下頜關節(jié)紊亂病的電子病歷模板設計與實現(xiàn)[D];天津醫(yī)科大學;2011年

本文編號：2750648