烤瓷冠基底金屬浸提液對人牙齦成纖維細胞uPA和其抑制劑PAI-Ⅰ表達的影響
發(fā)布時間:2020-07-08 00:51
【摘要】:目的 金屬合金作為口腔的修復(fù)材料應(yīng)具有良好的生物相容性,近年來研究發(fā)現(xiàn),金屬離子的腐蝕性可以導(dǎo)致細胞毒性,甚至造成牙周組織的損傷。本實驗通過分析四種金屬浸提液對人牙齦成纖維細胞(Human gingival fibroblasts, HGFs)尿纖溶酶原激活劑(umkinase-type plasminogen activator,uPA)和Ⅰ型纖溶酶原激活物抑制劑(type-1plasminogen nactivato inhibitor,PAI-Ⅰ)的表達差異,探索烤瓷冠基底合金對人牙齦成纖維細胞生理活性影響的機制,同時為評價口腔修復(fù)材料生物相容性提供新方法。 方法 (1)選用健康人牙頸部的健康牙齦組織(患者知情同意),采用改良組織塊法進行原代培養(yǎng)并傳代,取第4代細胞進行波形絲蛋白和角蛋白免疫熒光實驗,并繪制生長曲線,進行細胞鑒定。(2)HGFs經(jīng)過鎳鉻、鈷鉻、純鈦及金鈀合金四種金屬浸提液的作用,采用免疫熒光和酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測在金屬浸提液作用下HGFs中PAI-Ⅰ和uPA的含量變化,分析PAI-Ⅰ和uPA的含量變化與不同金屬離子之間的關(guān)系。統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS13.0軟件,進行重復(fù)測量資料的方差分析,P<0.05證明數(shù)據(jù)有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果 (1)細胞經(jīng)免疫熒光實驗分析波形絲蛋白染色為陽性,角蛋白染色為陰性,證明細胞來源于中胚層;繪制細胞生長曲線,同樣證實細胞來源于中胚層。(2)PAI-Ⅰ免疫熒光圖片在電鏡下觀察,鎳鉻組和鈷鉻組,染色深,分泌均勻,分布于整個細胞;陰性對照組、純鈦組和金鈀合金組,細胞染色淺,分泌不均勻,只存在于細胞核附近。(3)ELISA結(jié)果表明:uPA在各個時間點的表達在陰性對照組、純鈦組和金鈀合金組之間差別無顯著意義(P㧐0.05)。在12h和24h鎳鉻組、鈷鉻組與陰性對照組之間差異具有顯著性意義(P㩳0.05)。各時間點鎳鉻組和鈷鉻組,純鈦組和金鈀合金組之間差異也無顯著性意義。 結(jié)論 某些金屬離子可以誘導(dǎo)人牙齦成纖維細胞PAI-Ⅰ和uPA的升高,影響細胞的正常代謝,促進細胞外基質(zhì)的溶解,造成牙周組織的損傷。其中鎳鉻合金和鈷鉻合金浸提液對人牙齦成纖維細胞uPA和PAI-Ⅰ表達影響較明顯,純鈦和金鈀合金浸提液對其無明顯影響。本實驗探討合金腐蝕性對人牙齦成纖維細胞及牙齦組織影響機制之一,uPA和PAI-Ⅰ的表達分析可以作為評價口腔修復(fù)材生物相容性的新方法。
【學(xué)位授予單位】:遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R783
本文編號:2745858
【學(xué)位授予單位】:遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
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【參考文獻】
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本文編號:2745858
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