【摘要】：唾液腺是人體重要的腺體，是維持食物的攝取、消化、言語(yǔ)等口腔以及消化道正常功能必不可少的外分泌腺，也有內(nèi)分泌功能。唾液腺損傷甚至缺失，導(dǎo)致口腔干燥、咀嚼及進(jìn)食障礙、味覺(jué)改變、齲齒易感等，很大程度影響了患者的生活質(zhì)量。組織工程化的唾液腺為這一難題帶來(lái)希望，其方法是通過(guò)將種子細(xì)胞接種到生物支架材料上，體內(nèi)移植以修復(fù)受損器官。 本研究通過(guò)將SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Bone marrow mesenchymalstem cells，BMSCs）誘導(dǎo)為唾液腺腺泡樣細(xì)胞(Salivary gland acinar-like cells,SGACs)，結(jié)合三維支架材料進(jìn)行裸鼠體內(nèi)移植，探討其修復(fù)效果。 首先，提取SD大鼠BMSCs，體外培養(yǎng)，純化及鑒定，通過(guò)培養(yǎng)液將BMSCs誘導(dǎo)為SGALCs。然后，采用膠原和殼聚糖按一定比例配置成適合細(xì)胞附著的三維支架材料。實(shí)驗(yàn)分為兩組：①實(shí)驗(yàn)組：將誘導(dǎo)成為SGALCs接種于支架材料上；②對(duì)照組：將培養(yǎng)的BMSCs接種于支架材料上。最后，將復(fù)合細(xì)胞的支架材料進(jìn)行裸鼠皮下移植，1W，2W取材，免疫熒光法檢測(cè)示蹤的兩組細(xì)胞是否表達(dá)唾液腺細(xì)胞的特異性蛋白α-淀粉酶（α-amylase，AMY）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞在移植1W，2W都能表達(dá)AMY。而對(duì)照組呈陰性。 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外構(gòu)建一個(gè)可控的人工誘導(dǎo)環(huán)境，利用培養(yǎng)液將SD大鼠BMSCs成功誘導(dǎo)為SGALCs。構(gòu)建了適合細(xì)胞粘附生長(zhǎng)的三維膠原-殼聚糖支架材料。同時(shí)將誘導(dǎo)成為SGALCs接種于三維膠原-殼聚糖支架材料進(jìn)行裸鼠體內(nèi)移植，并取得理想效果。為進(jìn)一步構(gòu)建組織工程化的唾液腺提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R78
【圖文】：

圖 1 SD 大鼠頜下腺組織 圖 2 SD 大鼠頜下腺組織經(jīng) AMY染色呈陽(yáng)性（×100）圖 3 SD 大鼠頜下腺組織經(jīng) Ck-8 圖 4 SD 大鼠頜下腺組織經(jīng) Vimentin染色陽(yáng)性（×200） 染色陰性（×200）

圖 1 SD 大鼠頜下腺組織 圖 2 SD 大鼠頜下腺組織經(jīng) AMY染色呈陽(yáng)性（×100）圖 3 SD 大鼠頜下腺組織經(jīng) Ck-8 圖 4 SD 大鼠頜下腺組織經(jīng) Vimentin染色陽(yáng)性（×200） 染色陰性（×200）

SD大鼠頜下腺組織經(jīng)Ck-8

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本文編號(hào)：2743326