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大鼠正畸移動(dòng)牙的對(duì)頜牙牙周魯菲尼神經(jīng)末梢及相關(guān)蛋白表達(dá)改變的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-01 20:32
【摘要】:咀嚼系統(tǒng)是由咀嚼肌、顳下頜關(guān)節(jié)和咬合在神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)控下組成的功能整體,任何一個(gè)部分發(fā)生異常都會(huì)導(dǎo)致其他部分的改建甚至功能紊亂。牙周膜內(nèi)的力感受器——牙周魯菲尼神經(jīng)末梢負(fù)責(zé)感受咬合力等力刺激,并通過(guò)傳入神經(jīng)將力刺激信號(hào)傳入中樞神經(jīng)系統(tǒng),協(xié)調(diào)咀嚼運(yùn)動(dòng)。本研究以雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠為研究對(duì)象,以正畸皮圈的膨脹力推左側(cè)上頜和右側(cè)下頜第三磨牙向遠(yuǎn)中移動(dòng),形成上下頜磨牙尖窩不吻合的咬合接觸,針對(duì)該正畸牙移動(dòng)大鼠模型中正畸移動(dòng)牙的對(duì)頜牙牙周魯菲尼神經(jīng)末梢的顯微、超微結(jié)構(gòu)變化,雪旺細(xì)胞標(biāo)記物S-100蛋白表達(dá)變化,神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素-3(Neurotrophin-3,NT-3)表達(dá)的變化進(jìn)行研究。 第一部分:24只8周齡雌性SD大鼠的磨牙,隨機(jī)分為正畸移動(dòng)牙對(duì)頜牙組、正畸移動(dòng)牙組和空白對(duì)照組,其中正畸移動(dòng)牙對(duì)頜牙組(即右側(cè)上頜第三磨牙)為實(shí)驗(yàn)組,正畸移動(dòng)牙組(左側(cè)上頜第三磨牙)為正畸移動(dòng)牙對(duì)頜牙組在同一只動(dòng)物的陽(yáng)性對(duì)照組。實(shí)施正畸牙移動(dòng)后3天、14天和28天(n=4),取雙側(cè)上頜后牙牙列做蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色,顯微鏡下觀察左側(cè)上頜第三磨牙和右側(cè)上頜第三磨牙牙周組織顯微結(jié)構(gòu)的改變。大鼠上頜第三磨牙共有3個(gè)根,依次為近頰根,近舌根和遠(yuǎn)中根,為統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),取較為粗長(zhǎng)的遠(yuǎn)中根觀察。結(jié)果顯示,空白對(duì)照組雙側(cè)上頜第三磨牙遠(yuǎn)中根的近、遠(yuǎn)中側(cè)牙周膜腔寬度均勻,牙周膜未見(jiàn)明顯的壓縮和拉伸;正畸牙移動(dòng)后第3天,正畸移動(dòng)牙(左側(cè)上頜第三磨牙)近中牙周膜腔明顯變窄,遠(yuǎn)中牙周膜腔明顯變寬,近中牙周膜被壓縮,遠(yuǎn)中牙周膜被拉伸,表明正畸移動(dòng)牙的根尖部向近中移動(dòng);正畸牙移動(dòng)后第14天,正畸移動(dòng)牙對(duì)頜牙(右側(cè)上頜第三磨牙)的近中牙周膜腔輕度窄于遠(yuǎn)中牙周膜腔,近中牙周組織被輕度壓縮,遠(yuǎn)中牙周組織被輕度拉伸,表明正畸移動(dòng)牙對(duì)頜牙的根尖部也存在輕度的近中移動(dòng);正畸牙移動(dòng)后第28天,正畸移動(dòng)牙和正畸移動(dòng)牙對(duì)頜牙的牙周膜寬度恢復(fù)均勻。結(jié)論:正畸牙移動(dòng)會(huì)造成其對(duì)頜牙的牙周組織改建,但該改建出現(xiàn)的時(shí)間、程度較正畸移動(dòng)牙發(fā)生晚、輕,恢復(fù)快。 第二部分:64只8周齡雌性SD大鼠,分為兩批,第一批16只用于電鏡觀察,第二批48只用于顯微觀察,各批隨機(jī)分為正畸移動(dòng)牙對(duì)頜牙組、正畸移動(dòng)牙組(陽(yáng)性對(duì)照)和空白對(duì)照組。第一批空白對(duì)照組于適應(yīng)性飼養(yǎng)3天后,正畸移動(dòng)牙對(duì)頜牙組和正畸移動(dòng)牙組于正畸牙移動(dòng)后第3天、14天、28天(n=4),取雙側(cè)上頜第三磨牙遠(yuǎn)中根的根尖1/3處牙周組織做電鏡觀察。第二批于正畸牙移動(dòng)后第1天、3天、7天、14天、21天和28天(n=4),取雙側(cè)上頜后牙牙列做牙周魯菲尼神經(jīng)末梢標(biāo)記物蛋白基因產(chǎn)物9.5(protein gene product 9.5, PGP 9.5)的免疫熒光染色觀察。在空白對(duì)照組,牙周魯菲尼神經(jīng)末梢具有較為正常的超微結(jié)構(gòu),即線粒體、微絲、微管和神經(jīng)基底膜的結(jié)構(gòu)較典型,免疫熒光顯示PGP 9.5陽(yáng)性信號(hào)主要分布在牙周膜腔的牙槽骨側(cè);在正畸移動(dòng)牙組,牙周魯菲尼神經(jīng)末梢的超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)暫時(shí)性的線粒體減少和腫脹、空泡狀結(jié)構(gòu)、無(wú)定形電子致密物、微絲微管排列紊亂、神經(jīng)基底膜排列紊亂等損傷樣改變,這些改變于正畸牙移動(dòng)后第3天最為明顯,免疫熒光顯示PGP 9.5陽(yáng)性信號(hào)出現(xiàn)在牙周膜中間帶和牙根側(cè),PGP 9.5陽(yáng)性面積百分比較對(duì)照組暫時(shí)性的減少,最低值出現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)第3天;在正畸移動(dòng)牙對(duì)頜牙組,正畸牙移動(dòng)后第3天,牙周魯菲尼神經(jīng)末梢出現(xiàn)暫時(shí)性的線粒體離心式排列,正畸牙移動(dòng)后第14天,牙周魯菲尼神經(jīng)末梢出現(xiàn)線粒體減少、微絲微管稀疏和排列紊亂和神經(jīng)基底膜結(jié)構(gòu)異常,免疫熒光顯示PGP 9.5陽(yáng)性信號(hào)也出現(xiàn)在牙周膜中間帶和牙根側(cè),PGP 9.5陽(yáng)性面積百分比較對(duì)照組暫時(shí)性的減少,最低值出現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)第14天;至實(shí)驗(yàn)第28天,正畸移動(dòng)牙及其對(duì)頜牙的超微結(jié)構(gòu)和PGP 9.5陽(yáng)性面積百分比的變化基本恢復(fù)。結(jié)論:正畸牙移動(dòng)可造成其對(duì)頜牙牙周魯菲尼神經(jīng)末梢的超微結(jié)構(gòu)、數(shù)量和分布暫時(shí)性的改變,但與正畸移動(dòng)牙相比,其變化程度輕、恢復(fù)快。 第三部分:48只8周齡雌性SD大鼠,隨機(jī)分為正畸移動(dòng)牙對(duì)頜牙組、正畸移動(dòng)牙組(陽(yáng)性對(duì)照)和空白對(duì)照組,實(shí)施正畸牙移動(dòng)后1天、3天、7天、14天、21天和28天后,取雙側(cè)上頜后牙牙列做雪旺細(xì)胞標(biāo)記物S-100以及神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子NT-3的免疫熒光染色及共定位觀察,發(fā)現(xiàn)正畸移動(dòng)牙組S-100陽(yáng)性面積百分比、NT-3的相對(duì)光密度均較空白對(duì)照組暫時(shí)性的增多、廣泛表達(dá)于牙周膜腔,最高值出現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)第3天;正畸移動(dòng)牙對(duì)頜牙S-100陽(yáng)性面積百分比和NT-3相對(duì)光密度較空白對(duì)照組也暫時(shí)性的增多、廣泛共表達(dá),但其最高值出現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)第14天。正畸移動(dòng)牙和正畸移動(dòng)牙對(duì)頜牙S-100陽(yáng)性面積百分比和NT-3相對(duì)光密度均于第28天時(shí)恢復(fù)至基線水平。結(jié)論:正畸牙移動(dòng)會(huì)造成其對(duì)頜牙雪旺細(xì)胞結(jié)構(gòu)及NT-3表達(dá)的暫時(shí)性增多,但其改變較正畸移動(dòng)牙發(fā)生晚且恢復(fù)快。 通過(guò)以上的研究,可得到下列結(jié)論: 移動(dòng)牙的正畸操作,可使被移動(dòng)牙的對(duì)頜牙出現(xiàn)同被移動(dòng)牙相似的牙周膜腔改變,同時(shí)伴有相似的牙周魯菲尼神經(jīng)末梢的改建、其標(biāo)記物蛋白基因產(chǎn)物9.5表達(dá)變化,以及牙周雪旺細(xì)胞標(biāo)志物S-100和NT-3表達(dá)的變化。與正畸移動(dòng)所致上、下頜牙尖窩不吻合咬合接觸相關(guān)的咬合力作用,是這種牙周組織、力感受器魯菲尼神經(jīng)末梢以及雪旺細(xì)胞改建的內(nèi)在機(jī)制。
【學(xué)位授予單位】:第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號(hào)】:R783.5

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