發(fā)布時間：2020-07-01 05:54

【摘要】：目的:無髓根管內(nèi)應(yīng)用基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)進(jìn)行再生性牙髓治療或體內(nèi)局部應(yīng)用抗SDF-1抗體來中和牙髓血運(yùn)重建過程中產(chǎn)生的SDF-1,以研究SDF-1在再生性牙髓治療中的作用。方法:1.60只8周齡SD大鼠,雙側(cè)下頜第一磨牙作為實(shí)驗牙,去髓建立無髓根管模型。2.實(shí)驗牙的處理方法為:(1)建立無髓根管模型;(2)根尖損傷刺激出血;(3)根管內(nèi)植入SDF-1α水凝膠;(4)下頜第一磨牙前庭溝局部注射SDF-1血清抗體。實(shí)驗分為5個組,每組12只SD大鼠。根據(jù)上述方法對不同組別的實(shí)驗牙采取單一或組合方式處理,分別為:刺激出血組(Group Blood Clot,BC組)、刺激出血+SDF-1α水凝膠組(Group Blood Clot+SDF-1α,BC+SDF-1α組)、SDF-1α水凝膠組(Group SDF-1α,SDF-1α組)、刺激出血+抗SDF-1抗體中和作用組(Group Blood Clot+SDF-1 Neutralizing Antibody,BC+antiSDF-1組)。設(shè)對照組,實(shí)驗牙僅建立無髓根管模型。3.樣本收集和檢測:每組12只大鼠根據(jù)上述分組處理后,分別在14天和30天將大鼠過量麻醉處死,每個時間點(diǎn)6只大鼠。取左右兩側(cè)下頜骨進(jìn)行組織學(xué)標(biāo)本處理,進(jìn)行HE(hematoxylin-eosinstaining,HE)染色和免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry,IHC)染色,對根管內(nèi)新生組織進(jìn)行定性和定量分析。結(jié)果:HE染色組織學(xué)表現(xiàn)(1)對照組:根管內(nèi)去髓后不進(jìn)行任何處理,14天和30天根管內(nèi)未見新生結(jié)締組織,根尖孔附近可見少量炎癥細(xì)胞,根尖區(qū)牙周膜內(nèi)的細(xì)胞無從根尖孔向根管內(nèi)延伸的趨勢。(2)實(shí)驗組HE染色組織學(xué)表現(xiàn)14天組織學(xué)表現(xiàn):BC組、BC+SDF-1α組和SDF-1α組根管內(nèi)冠部均可見大小不一不規(guī)則的礦化基質(zhì),根管內(nèi)根尖方向為成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞和少量小血管組成的較致密的結(jié)締組織,以上3組根尖區(qū)牙周膜內(nèi)的細(xì)胞明顯地呈現(xiàn)從根尖孔向根管內(nèi)延伸的趨勢,BC+SDF-1α組和SDF-1α組新生結(jié)締組織內(nèi)小血管較BC組更豐富;BC+antiSDF-1組中有2個樣本根管內(nèi)未見新生結(jié)締組織,根尖區(qū)牙周膜內(nèi)的細(xì)胞從根尖孔向根管內(nèi)延伸的趨勢消失,大量幼稚的成纖維細(xì)胞和豐富的小血管聚集在根尖孔處,未進(jìn)入到根管內(nèi),其余樣本組織學(xué)表現(xiàn)與BC組相似。30天組織學(xué)表現(xiàn):各實(shí)驗組根管內(nèi)以及根尖區(qū)牙周膜內(nèi)組織學(xué)表現(xiàn)基本相似,根管內(nèi)冠方為大量大小不一的不規(guī)則礦化基質(zhì),根管內(nèi)根尖1/3處為成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞和極少小血管組成的較為致密的結(jié)締組織,形態(tài)類似于牙周韌帶樣結(jié)構(gòu),根管內(nèi)的結(jié)締組織通過根尖孔連接到牙周韌帶。(3)實(shí)驗組IHC染色組織學(xué)表現(xiàn)14天IHC染色組織學(xué)表現(xiàn):BC組、BC+SDF-1α組和SDF-1α組根管內(nèi)有表達(dá)CXCR4陽性細(xì)胞,BC+antiSDF-1組根管內(nèi)未見表達(dá)CXCR4陽性細(xì)胞。所有實(shí)驗組根尖區(qū)牙周膜內(nèi)均可見表達(dá)CXCR4陽性細(xì)胞。30天IHC染色組織學(xué)表現(xiàn):BC組和BC+SDF-1α組根管內(nèi)有表達(dá)CXCR4陽性細(xì)胞,SDF-1α組根管內(nèi)全為礦化組織,無表達(dá)CXCR4陽性細(xì)胞,BC+antiSDF-1組根管內(nèi)未見表達(dá)CXCR4陽性細(xì)胞。所有實(shí)驗組根尖區(qū)牙周膜內(nèi)均可見表達(dá)CXCR4陽性細(xì)胞。(4)根管內(nèi)新生組織面積比值的統(tǒng)計學(xué)分析14天時,BC組、BC+SDF-1α組和SDF-1α組根管內(nèi)新生組織面積比值的平均值均高于BC+antiSDF-1組,但各實(shí)驗組間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。30天時,BC組、BC+SDF-1α組和SDF-1α組根管內(nèi)新生組織面積比值的平均值均高于BC+antiSDF-1組,各實(shí)驗組間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。組間進(jìn)行兩兩比較時,BC+SDF-1α組高于BC組和BC+antiSDF-1組(p0.05),SDF-1α組高于BC+antiSDF-1組(p0.05)。結(jié)論:1.SDF-1α能趨化表達(dá)CXCR4的細(xì)胞歸巢進(jìn)入根管參與組織再生,在一定程度上增加牙髓血運(yùn)重建術(shù)后根管內(nèi)的新生組織量。2.局部應(yīng)用抗SDF-1抗體能阻止表達(dá)CXCR4陽性的細(xì)胞歸巢到根管內(nèi)參與牙髓組織新生。3.SDF-1α/CXCR4信號軸在趨化細(xì)胞歸巢進(jìn)入根管進(jìn)行組織再生中具有重要作用。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R78
【圖文】：

SDF-1α 組為單獨(dú)于根管內(nèi)植入復(fù)合 100ng/ml SDF-1α 的水凝膠 1后行 MTA+流動樹脂雙重充填封閉開髓孔。BC+antiSDF-1 組，在根管封藥后第 5 天，即行牙髓血運(yùn)重建處理前天開始，每天于實(shí)驗牙前庭溝處局部注射 10ug/10ul 抗 SDF-1 抗體 10u實(shí)驗牙使用 15#H 銼超出根尖孔旋轉(zhuǎn) 3 周刺激和損傷根尖周組織，血到達(dá)髓室并未凝固前向根管內(nèi)注入 10ug/10ul 的抗 SDF-1 抗體 1ul，15#K 銼將抗體液輸送到達(dá)根管內(nèi)，靜置等待抗體作用 5min 后行 MT流動樹脂雙重充填封閉開髓孔，術(shù)后即刻于實(shí)驗牙前庭溝局部注10ug/10ul 的抗 SDF-1 抗體 10ul，術(shù)后連續(xù) 2 天每天進(jìn)行實(shí)驗牙前庭溝局注射 10ug/10ul 的抗 SDF-1 抗體 10ul。實(shí)驗操作過程如圖 1-2 所示，驗技術(shù)路線如圖 1-3 所示。

圖 1-2 SD 大鼠無髓根管模型建立成功后第二次實(shí)驗操作過程Figure 1-2 The procedures of second experiment after the successful establishment of the SD rat non-vitaroot canal models

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本文編號：2736364