發(fā)布時(shí)間：2020-06-30 19:03

【摘要】：目的：利用小干擾RNA(small interfering RNA, siRNA)抑制人舌癌耐藥細(xì)胞多藥耐藥相關(guān)蛋白1(multidrug resistance associated protein 1, MRP1)的表達(dá),觀察其對(duì)所培養(yǎng)細(xì)胞耐藥性的干擾情況。 方法：設(shè)計(jì)針對(duì)MRP1基因的siRNA,轉(zhuǎn)染人舌癌多藥耐藥細(xì)Tca8113/CDDP,鏡下觀察動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)染情況并確定轉(zhuǎn)染效率。用RT-PCR分析MRP1 mRNA的表達(dá)；免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測(cè)MRP1的蛋白表達(dá)；MTT法檢測(cè)MRP1 siRNA對(duì)耐藥細(xì)胞的干擾作用。 結(jié)果：Tca8113/CDDP細(xì)胞轉(zhuǎn)染MRP1 siRNA后,MRP1 mRNA表達(dá)較對(duì)照組明顯降低,降低率為61.3%；轉(zhuǎn)染36h后MRP1 siRNA組的MRP1蛋白表達(dá)陽(yáng)性率較對(duì)照組明顯減低；MRP1 siRNA組中順鉑對(duì)Tca8113/CDDP細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用明顯強(qiáng)于其他對(duì)照組,且抑制作用隨時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)。 結(jié)論：MRP1 siRNA可以明顯抑制口腔癌耐藥細(xì)胞的多藥耐藥。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R739.8
【圖文】：

圖1重組體酶切電泳圖EleetroPhoresisdisPlayofthereeombinantenzyme一digestio1:MRPISael，2:MRPISael，3:MRPISaelarker:20O0bP、1000bP、75ObP、SO0bP、25ObP、10ObP)

圖2pGenesll一1.1一MRPlsiRNA重組質(zhì)粒測(cè)序峰圖Figure2SequencinggraPhofPGenesil一1.1一MRPIsiRNA2MRPIsiRNA轉(zhuǎn)染情況及轉(zhuǎn)染效率MRP1siRNA轉(zhuǎn)染Tcas113/cDDP細(xì)胞后，在熒光倒置顯微鏡下察，可見轉(zhuǎn)染后12、24、36、48h的綠色熒光強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)，轉(zhuǎn)染率逐漸提高，轉(zhuǎn)染后36h的轉(zhuǎn)染率達(dá)最高，為68.4%。轉(zhuǎn)染后48和36的轉(zhuǎn)染效率無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.05)。結(jié)果表明:MRPIsiRNA轉(zhuǎn)染Tcas113/CDDp細(xì)胞36h后，可達(dá)最高轉(zhuǎn)染效率(圖1)。故后續(xù)實(shí)選擇轉(zhuǎn)染后36h的細(xì)胞以測(cè)定其基因和蛋白表達(dá)。

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 林小滿;謝娜;徐楊;;子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中RNA干擾Bmi-1基因的實(shí)驗(yàn)研究及意義[J];中國(guó)醫(yī)藥科學(xué);2011年16期

2 李瑞;鄭亞莉;周學(xué)兵;王煒;;Cdk1在HepG2細(xì)胞的表達(dá)及活性對(duì)肝癌細(xì)胞凋亡的影響[J];寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2011年06期

3 邱小玲;趙建江;金邵華;王治平;韓久松;陳中利;;量子點(diǎn)標(biāo)記人舌癌細(xì)胞survivin siRNA的研究[J];廣東醫(yī)學(xué);2011年12期

4 李文峰;李剛;倪吳花;蔣磊;吳式t;;siRNA沉默S100P基因?qū)σ认侔┘?xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用[J];腫瘤學(xué)雜志;2011年06期

5 彭韋霞;文芳;曹仁賢;楊慧齡;顏斌;張友其;;人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Caveolin-1基因沉默模型的建立[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2011年13期

6 余術(shù)宜;吳文芳;李建哲;吉午陽(yáng);陳玉祥;;siRNA CCR7抑制乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的體外實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2011年23期

7 閆曦;謝華紅;王燕;費(fèi)晉秀;;下調(diào)TSG101基因表達(dá)對(duì)胰腺癌細(xì)胞系PANC-1增殖的影響[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2011年07期

8 吳斌華;李祥勇;周克元;;應(yīng)用正交設(shè)計(jì)篩選hTERT基因siRNA最佳作用位點(diǎn)[J];廣東醫(yī)學(xué);2011年12期

9 魯艷明;銀鐸;孟麗榮;張淑蘭;;siRNA干擾XIAP基因?qū)β殉舶㏒KOV-3細(xì)胞生物學(xué)功能影響的研究[J];中華腫瘤防治雜志;2011年07期

10 謝淑麗;王廣義;呂國(guó)悅;朱明光;;siRNA沉默RhoC表達(dá)誘導(dǎo)人肝癌BEL7402細(xì)胞凋亡[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;2011年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 鄧清華;劉國(guó)文;劉磊;王建國(guó);朱曉巖;李小兵;王哲;;siRNA特異性抑制犢牛原代肝細(xì)胞SREBP-1c基因的表達(dá)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜內(nèi)科學(xué)分會(huì)第七屆代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上冊(cè)）[C];2011年

2 季愛民;蘇丹;車鷗;李文適;孫靚;張忠義;楊彬;;殼聚糖/siRNA納米粒介導(dǎo)的功能性基因沉默研究(英文)[A];2010年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十屆中國(guó)藥師周論文集[C];2010年

3 黃偉;呂明;金明姬;楊長(zhǎng)青;高鐘鎬;;mPEG-PCL-g-PEI聚合物的合成及其siRNA遞送性能[A];2010年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十屆中國(guó)藥師周論文集[C];2010年

4 陳宇;鄭海濤;楊力建;陳少華;沈琦;劉思初;李

本文編號(hào)：2735699