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牙周膿腫專性厭氧菌耐藥性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-06-22 13:46
【摘要】:目的: 研究牙周膿腫患者中檢出的牙周優(yōu)勢(shì)厭氧菌,并對(duì)牙周厭氧菌分離株進(jìn)行藥敏分析及耐藥基因檢測(cè),以期從基因水平為臨床治療牙周厭氧菌感染合理選用抗菌藥物提供理論依據(jù)。 方法: 1.選取58例牙周膿腫患者(男23例,女35例)為研究對(duì)象。采用棉拭送檢法取樣后,應(yīng)用簡(jiǎn)易厭氧袋培養(yǎng)法,經(jīng)兩至三次耐氧實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)出純代的牙周專性厭氧菌;以API20A生化鑒定法和聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction, PCR)技術(shù)對(duì)分離出的牙周厭氧菌進(jìn)行鑒定。 2.根據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(National Committee for Clinical Laboratory Standards)(NCCLS)推薦的瓊脂稀釋法參考方案(M11-A5)測(cè)定牙周厭氧菌對(duì)8種臨床常用抗菌藥物敏感性。 3.依據(jù)藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果,篩查耐藥菌株;采用PCR法,檢測(cè)牙周厭氧菌株中耐藥菌株的各型耐藥基因。 結(jié)果: 1.簡(jiǎn)易厭氧袋培養(yǎng)法分離培養(yǎng)的細(xì)菌具有良好的專性厭氧特性及傳代增殖能力。經(jīng)分離鑒定,牙周專性厭氧菌檢出率為48.3%,其中以產(chǎn)黑色素普黑沃菌分離率最高。API20A生化鑒定技術(shù)和16sRNA序列測(cè)定技術(shù)鑒定牙周專性厭氧菌的一致率為82%。 2.藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示,所有菌株對(duì)亞胺培南、頭孢西丁、氯霉素100%敏感,對(duì)甲硝唑、克林霉素和頭孢美唑耐藥率分別為8%、36%和4%。 3.克林霉素耐藥菌株中有3株檢測(cè)出ermF, PCR法進(jìn)一步證實(shí)其位點(diǎn)不在質(zhì)粒上;甲硝唑耐藥菌株中均未檢測(cè)出耐藥基因與質(zhì)粒。 結(jié)論: 1.產(chǎn)黑色素普雷沃菌是牙周膿腫患者厭氧菌群中的優(yōu)勢(shì)菌;生化法與分子生物法在鑒定細(xì)菌種屬時(shí)具有一致性,證實(shí)其方法學(xué)上的可行性。 2.牙周厭氧菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性存在差異,作為口腔臨床常用藥物甲硝唑,細(xì)菌對(duì)其耐藥性有所增長(zhǎng)。治療時(shí)應(yīng)根據(jù)基因分型和藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選用抗菌藥物,以縮短療程,提高療效。 3.耐藥基因可通過(guò)多種機(jī)制及其相互作用形成復(fù)雜的耐藥性,耐克林霉素菌株可檢測(cè)出目的耐藥基因,然而在質(zhì)粒上未檢測(cè)出;耐甲硝唑菌株中未檢測(cè)出已知耐藥基因,其耐藥機(jī)制有待進(jìn)一步深入探討。
【學(xué)位授予單位】:復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:R781.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2725759

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