【摘要】： 口腔種植技術的應用為義齒修復學帶來巨大的變革，其發(fā)展水平已 經(jīng)成為社會醫(yī)療水準乃至現(xiàn)代化程度的標志之一。當代生物技術，材料科 學、生命科學、人體科學、和口腔醫(yī)學的交織正促使傳統(tǒng)口腔種植材料向 生物活性種植材料過渡。以往，生物相容性的標準往往局限于惰性、無毒 等生物安全原則上。隨著認識提高和技術手段進步，新的生物相容性觀念 則強調(diào)材料的生物功能性原則，要求植人體內(nèi)的材料不僅不會給機體帶來 損害，還能在應用過程中主動激發(fā)宿主恰當?shù)膽鸱磻�，并按照預先的設 計與組織實現(xiàn)理想的結(jié)合。 在口腔種植技術臨床實踐中，仍然存在一些問題亟待解決和克服。 這些問題給醫(yī)患雙方都帶來極大的不便，同時也嚴重地制約著種植術的廣 泛開展。分析這些問題的產(chǎn)生原因，很大程度是由于種植體與組織的結(jié)合 仍不夠完善。種植體與骨組織結(jié)合的減弱和喪失仍舊是絕大多數(shù)種植失敗 的最終原因。因此，如何進一步改進種植體與骨組織的結(jié)合，提高結(jié)合強 度仍然是擺在我們面前的一個重要課題。解決這一難題，必須從種植材料 入手，不斷地提高其生物相容性和生物活性。 將促進成骨細胞附著和功能表達的活性因子預先固定在材料表面， 對表面生物反應進行有效控制，這樣就可以對種植體-骨組織結(jié)合界面進 行特異性調(diào)控，提高材料的生物活性。本研究基于細胞粘附生物學的最新 研究成果，采用現(xiàn)代化學和表面工程技術將粘附肽RGD通過共價鍵固定 在實驗材料表面，構(gòu)建種植體生物活性過渡層的實驗模型，通過體外培養(yǎng) 小鼠成骨細胞，評價這種活性過渡層的細胞生物學效應。 本研究包括三個主要部分 1．材料表面固定RGD肽及表面化學分析 采用自組裝單層分子技術將RGD肽固定在實驗試件表面。檢測反應 前后材料表面接觸角的變化，計算相應的表面能。應用X射線光電子能 譜鑒定材料表面的化學成份、元素比例、元素的化學環(huán)境、以及肽分子與 一 材料表面的結(jié)合方式。使用反射納D椰析技術檢測材料表面的功能基 團。 結(jié)果顯示：材料表面固定 RGD后，兩種介質(zhì)的接鵬均升高，表面 能下降，穎明顯的憎水敝。天柑料表面乙 N、O、S元素的刀用分 折顯示肽分子主要通過共價鍵與表面結(jié)合，各元素的比例以及相應的價態(tài) 與理論值基本相符，說明 RGD在材料表面仍然保有原來的成分和構(gòu)型。 紅汐光譜分析出現(xiàn)明顯的硼 1峰，腴書度證明表面聰酸狐的 存在。綜合分析表明 RGD在材料表面的排列具有高度的規(guī)律性和有序 －性。 2．小刷即誠骨細刪分離、培養(yǎng)和熒四癥 采用連續(xù)酶消化法進行小鼠頭蓋骨成骨細胞的分離，反復貼壁法進 行細胞純化，常規(guī)條件下進行細胞連續(xù)培養(yǎng)。取培養(yǎng)第 2－3代細胞進行 細胞表型鑒定。鑒定內(nèi)容包括：細胞形態(tài)的染色觀察、堿性磷酸酶的組 織化學染色、骨鈣素蛋白的間接贓撇色、細胞礦化實驗等。 結(jié)果顯示：材料表面細腿典型成骨細胞形態(tài)，堿性磷酸酶，骨鈣 素以及鈣鹽沉積斑色陽性。說明本實驗所采用的小鼠成骨細胞種類單純、 表型典型，具有成骨細胞特點和功能。 3．材料頒固定RGD肽的細胞生物學評價 iRZZ 4照組，觀察成骨細胞在RGD表面生長。通過細胞附著實驗、 細胞鋪展實驗、細胞增殖實驗、細胞活性檢驗、細胞堿性磷酸酶活性檢 測、骨鈣素 mRNA印跡雜交、以及細胞礦化實驗等方法對比分析材料表 ：面結(jié)合 RGD對成骨細胞生物學行為的彤響。 結(jié)果顯示：生物材料表面固定 RGD肽可以顯著促進成骨細胞對材料 的附著；促進細胞骨架內(nèi)肌動蛋白和紐蛋白的分布、加速細胞在材料表面 的鋪展；提高細胞的增殖率�？嚥牧媳砻娴募氻樛雎蕸]有顯著差異； 在 RGD表面生長的細胞有較高的堿性磷酸酶活性、其骨鈣素 dA的表 達也比對照組提前 6天，并且表達量明顯。RGD表面成骨細胞的礦化過 程被明顯提前，但礦化量與對照組沒有栽u。 ·3－ 一 通過本研究得出以下結(jié)論：采用自組裝單層肝技術將粘附肽固定 于材料表面，攤拋，工藝科學。粘附肽可通過共價鍵牢固鵬合在材 料表面，反應前后分子組成和構(gòu)型沒有本恥的改變，肽分子仍然保存原 有的生物活性。分析表明材料表面肽分子的組織分布呈現(xiàn)高度規(guī)律性和有 序性。這種肽分子排列方式無論對體9塌懈還是體內(nèi)實際應用都十分 有利；本研究建立的小鼠成骨細胞體外實雕型細胞表型典型，可以準確 反映實驗條件對其生長和功能分化的影響，用于體外細胞實驗，結(jié)果可信 度高；材料表面固定 RGD肽不僅沒有細胞毒性，而且可以有效促進成骨 細胞在材料表面的附著、鋪展和增殖，細胞的砒和功
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2001
【分類號】：R783.1

【引證文獻】

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1 陳永楠;球形孔結(jié)構(gòu)羥基磷灰石陶瓷支架的制備及性能研究[D];西安理工大學;2006年

本文編號：2721309