【摘要】： 趨化性細(xì)胞因子是細(xì)胞因子中的一種,該家族是一個小分子(8-16kDa)蛋白質(zhì)的超家族,在氨基酸序列上存在20-70%的同源性。根據(jù)半胱氨酸的位置、排列方式及數(shù)量的不同,其被分為四類:CXC類(α)趨化性細(xì)胞因子、CC類(β)趨化性細(xì)胞因子、C類(γ)趨化性細(xì)胞因子、CXXXC類(6)趨化性細(xì)胞因子。 CCL28是2000年發(fā)現(xiàn)的一種新的趨化性細(xì)胞因子,它屬于上述分類中的CC類,曾被稱為粘膜相關(guān)上皮趨化性細(xì)胞因子(MEC)。其可介導(dǎo)循環(huán)中的IgA抗體分泌細(xì)胞跨過血管壁向局部實體組織內(nèi)遷徙。 口腔中的SIgA是口腔免疫防御機制中至關(guān)重要的因素之一,主要來自大、小涎腺,其中來自小涎腺的約占30-35%。Pan等人應(yīng)用斑點雜交分析證明人體的多種組織中均表達CCL28,其中以結(jié)腸、氣管、大涎腺、乳腺表達較豐富。人大涎腺表達的CCL28,一方面可介導(dǎo)IgA~+ ASC由血循環(huán)向涎腺實體組織中遷徙,另一方面還可隨唾液分泌到口腔中發(fā)揮殺菌抑菌作用。國內(nèi)李瀟的研究表明,在唾液中IgA的水平與CCL28的含量具有相關(guān)性。然而,迄今為止對人小涎腺中CCL28的表達和分泌情況尚無研究報道。因此,本課題的目的在于以唇腺組織為研究對象,從不同角度證實小涎腺中表達CCL28,從而為探討小涎腺在維持口腔IgA水平方面的作用奠定基礎(chǔ)。 方法: 1)應(yīng)用實時熒光相對定量PCR技術(shù)來證實人的唇腺組織中表達CCL28 mRNA。 2)應(yīng)用寡核苷酸探針原位雜交來檢測唇腺組織中CCL28 mRNA的表達部位。 3)應(yīng)用免疫組織化學(xué)來檢測唇腺組織中CCL28蛋白的表達和分布情況。 結(jié)果: 1)實時熒光相對定量PCR結(jié)果表明健康成人的唇腺組織中表達豐富的CCL28mRNA。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,其表達量(170.67±77.44)顯著高于大腸對照組(19.50±14.55)(P＜0.001)。其后的唇腺和腮腺CCL28表達比較表明,前者中的表達量(1.28±0.57)顯著高于后者(0.79±0.24)(P＜0.01)。 2)原位雜交顯示CCL28 mRNA存在于腺泡上皮細(xì)胞胞漿中。 3)免疫組織化學(xué)顯示唇腺腺泡上皮細(xì)胞胞漿、腺管上皮細(xì)胞、泡內(nèi)粘液中均存在CCL28蛋白。但其染色深淺存在差異,這表明這幾處CCL28蛋白的濃度不同。 結(jié)論: 同大涎腺一樣,健康成人的唇腺中也表達豐富的CCL28,且其表達量高于腮腺。CCL28 mRNA表達于腺泡上皮細(xì)胞胞漿中,其翻譯得到的蛋白質(zhì)一部分在唇腺中發(fā)揮趨化作用,以吸引IgA~+ ASC,從而使其分泌IgA;而另一部分則隨唾液分泌到口腔中發(fā)揮抗菌抑菌作用。這為進一步探討小涎腺在維持口腔SIgA水平中的作用奠定了基礎(chǔ)。
【圖文】：

PCR產(chǎn)物電泳圖

432IM1000bT50bP500bP250bP100bP圖1PCR產(chǎn)物電泳圖。M:DNAM肚kerDL2000。1:唇腺標(biāo)本A中的CCL28擴增片段。2:唇腺標(biāo)本A中的p一actin擴增片段。3:唇腺標(biāo)本B中的CCL28擴增片段。4:唇腺標(biāo)本B中的p一actin擴增片段。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R78

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

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本文編號：2706564