【摘要】：根管治療術(shù)(root canal therapy, RCT)是目前牙髓病和根尖周病最有效和最完善的治療方法。作為根管治療的重要環(huán)節(jié),根管沖洗可去除和控制感染根管內(nèi)細(xì)菌及其代謝產(chǎn)物。五倍子具有抗菌、收斂等功效；黃芩主要有抗氧化、抗炎、抗腫瘤等作用。本課題擬研制上述兩種中藥的水提取物復(fù)合制劑作為一種新型的根管沖洗劑,并通過體外實(shí)驗(yàn),檢測其拮抗LPS(內(nèi)毒素脂多糖)對人牙周膜成纖維細(xì)胞的毒性作用,從而為新型中藥根管沖洗劑的研制提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 目的： 研究不同濃度五黃提取物抑制LPS對牙周膜成纖維細(xì)胞的毒性作用,為該新型中藥根管沖洗劑的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。 方法： 本實(shí)驗(yàn)采用的細(xì)胞是用組織塊原代培養(yǎng)而獲得的人牙周膜成纖維細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)分為： 實(shí)驗(yàn)一：通過MTT法檢測不同濃度五黃提取物拮抗LPS對牙周膜成纖維細(xì)胞的增殖的影響。取生長狀態(tài)良好的第5代人牙周膜成纖維細(xì)胞接種于96孔板,并隨機(jī)分為三組,即空白對照組、藥物組、LPS組�？瞻讓φ战M加入DMEM培養(yǎng)液；藥物組分別加入各濃度的五黃提取物和LPS,即12.5μg/ml十100μg/ml LPS、25μg／ml十100μg/ml LPS、50μg/ml+100gg/ml LPS；LPS組加入100μg/ml LPS+DMEM培養(yǎng)液。24、48、72小時后,采用MTT法測定各組別每孔吸光度值。 實(shí)驗(yàn)二：五黃提取物對LPS刺激牙周膜成纖維細(xì)胞分泌的炎癥因子TNF-α的影響。取生長狀態(tài)良好的第5代人牙周膜成纖維細(xì)胞接種于24孔板,并隨機(jī)分為空白對照組、藥物組、LPS組�？瞻讓φ战M加入DMEM培養(yǎng)液；藥物組分別加入各濃度的五黃提取物和LPS,即12.5μg/ml＋100μg/mlLPS、25μg/ml十100μg/ml LPS和50μg/ml+100μg/ml LPS;LPS組加入100μg/ml LPS+DMEM培養(yǎng)液。于第12、24和48小時吸取上清液,4℃離心、分裝,并放入-20℃低溫冰箱凍存待檢。采用ELISA試劑盒檢測上清液中TNF-a的水平。 結(jié)果： 1.100μg∥ml LPS在24h、48h、72h與空白組相比能夠明顯抑制牙周膜成纖維細(xì)胞的增殖活性(p0.05)；在LPS存在的條件下,加入不同濃度的五黃提取物于牙周膜成纖維細(xì)胞中,隨著時間的延長,與LPS組相比較,不同濃度的五黃提取物在24h、48h均能使牙周膜成纖維細(xì)胞的增殖活力明顯提高,在72h時僅25μg/m能使牙周膜成纖維細(xì)胞的增殖活力明顯提高,其中25μg/ml在24h時的效果最明顯。 2.與空白組相比,LPS能明顯升高牙周膜成纖維細(xì)胞分泌TNF-a的水平(p0.05)。在LPS存在的條件下,12.5μg/ml、25gg/ml以及50μg/ml的五黃提取物組均能使人牙周膜成纖維細(xì)胞促炎因子TNF-α的分泌明顯降低(p0.05),其中25μg/ml的五黃提取物在24h時的作用效果最明顯。 結(jié)論： 五黃提取物能有效拮抗內(nèi)毒素對人牙周膜成纖維細(xì)胞毒性作用,對牙周膜成纖維細(xì)胞具有保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R781

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;豬苓提取物“757”的抗腫瘤實(shí)驗(yàn)和臨床觀察[J];新醫(yī)藥學(xué)雜志;1979年02期

2 ;豬苓提取物的毒性試驗(yàn)觀察[J];新醫(yī)藥學(xué)雜志;1979年05期

3 王國棟;;茛菪提取物中生物堿的簡易定量法[J];國外醫(yī)藥.植物藥分冊;1981年02期

4 吳國利;聶劍初;顏卉君;陳興;向華明;魏群;張英華;;幾種中藥抗癌作用的生化研究[J];北京師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1982年02期

5 石萍;;人黃體的水溶提取物中黃體生成激素受體結(jié)合抑制物[J];國外醫(yī)學(xué).婦產(chǎn)科學(xué)分冊;1986年04期

6 翟守道,鄭寶法,黎磊石,陳惠平,白小洋;雷公藤不同提取物對家兔Masugi腎炎的影響[J];江蘇醫(yī)藥;1987年12期

7 柳川,李晉萍,華仲慰,王力豐,劉勤;小鼠頜下腺2.5S神經(jīng)生長因子的純化和活性鑒定[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;1987年01期

8 胡雅珍;;曼氏血吸蟲童蟲提取物低密度脂蛋白受體存在的依據(jù)[J];國際醫(yī)學(xué)寄生蟲病雜志;1989年02期

9 王永泉,王德昌,徐麗珍;金邊桑提取物抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)觀察(簡報(bào))[J];中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);1991年05期

10 徐惠波;孫曉波;周重楚;李煥榮;張潔;;輪葉黨參提取物對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響[J];特產(chǎn)研究;1991年01期

相關(guān)會議論文 前10條

1 孫永科;楊林富;楊亮宇;畢保良;初曉輝;楊玉艾;;板栗花提取物體外抑菌效果研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會食品衛(wèi)生學(xué)分會第十一次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

2 姚明輝;;鋸葉棕提取物(SPE)的藥理作用及臨床應(yīng)用[A];中國藥理學(xué)會第七屆全國生殖藥理學(xué)術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2011年

3 陳超杰;展麗娟;秦海林;王愛平;;栽培菊苣提取物KJ-I對肝細(xì)胞的保護(hù)作用及其抗氧化機(jī)制的初步研究[A];中國活性氧生物學(xué)效應(yīng)學(xué)術(shù)會議論文集（第一冊）[C];2011年

4 豆長明;李繼承;;栝樓根提取物對Hela細(xì)胞作用的初步研究[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會第八屆會員代表大會暨學(xué)術(shù)大會論文摘要集[C];2003年

5 李春艷;曾艷波;彭芳;戴好富;鄭永唐;;蒲葵籽提取物體外抗HIV-1活性及機(jī)制的初步研究(論文摘要)[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會防治艾滋病分會第六屆學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

6 盧汝梅;李兵;蘇醒;鐘振國;張雯艷;;紫玉盤提取物體外抗腫瘤活性的實(shí)驗(yàn)研究[A];第二屆臨床中藥學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

7 林青;;天麻提取物對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會血栓病分會第四次學(xué)術(shù)研討會暨廣東省中醫(yī)藥學(xué)會血栓病專業(yè)委員會首屆學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

8 韓偉娟;尹大力;;冬蟲夏草提取物ISP-Ⅰ的類似物的合成[A];中國化學(xué)會第八屆天然有機(jī)化學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

9 劉淑靜;陳芝芳;李巖;;RealtimePCR檢測樺樹皮提取物對HMVEC細(xì)胞VEGFmRNA表達(dá)的影響[A];2010年中國藥學(xué)大會暨第十屆中國藥師周論文集[C];2010年

10 竇瑞木;曹克強(qiáng);;19種中草藥提取物對番茄灰霉病菌的抑制作用[A];河南省植物病害研究進(jìn)展——河南省植物病理學(xué)與現(xiàn)代農(nóng)業(yè)學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2011年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 劉云濤;牛蒡子提取物可改善糖尿病腎損害[N];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2006年

2 張中橋;銀杏葉提取物能保護(hù)中腦原代細(xì)胞[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

3 ;花椰菜苗提取物有助皮膚防紫外線傷害[N];人民日報(bào);2007年

4 董國用;天然產(chǎn)物提取物著手定“標(biāo)”[N];農(nóng)民日報(bào);2005年

5 辛華;未來的綠色食品添加劑——海鮮提取物[N];中國食品質(zhì)量報(bào);2004年

6 言實(shí);我國藥用植物提取物出口市場廣闊[N];中國醫(yī)藥報(bào);2001年

7 中信;藥用植物提取物出口前景廣闊[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2001年

8 仲海亮;葡萄提取物可消除大腸桿菌耐藥[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

9 申花;日本利用芥末提取物開發(fā)生產(chǎn)抗菌保鮮功能性薄膜[N];中國包裝報(bào);2006年

10 張中朋 劉張林;植物提取物產(chǎn)品出口增長持續(xù) 增幅回落[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 陳承杰;馬齒莧提取物抗缺氧作用及其機(jī)制的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

2 邢雁偉;辨證與辨病結(jié)合的清熱、活血、益氣藥抑制心臟早搏的電生理實(shí)驗(yàn)研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2005年

3 儲全根;加味桃核承氣湯及其不同提取物對糖尿病大鼠心肌和主動脈病變的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2005年

4 殷丹;江南卷柏提取物抗柯薩奇病毒和單純皰疹病毒的研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2009年

5 于飛;薏苡仁提取物抗腫瘤新靶點(diǎn)及降血脂抗氧化活性研究[D];天津大學(xué);2010年

6 賈娜;黑加侖提取物的抗氧化活性與應(yīng)用及其對胃癌細(xì)胞增殖的抑制作用[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

7 吳麗莎;蝦過敏原提取物量效關(guān)系的表征[D];中國海洋大學(xué);2012年

8 靳利娥;酶類與非酶類天然提取物抗氧化性研究[D];太原理工大學(xué);2010年

9 郝建軍;辛溫通陽中藥蔥白提取物對動脈粥樣硬化大鼠IL-6/STAT3信號通路的調(diào)節(jié)作用及機(jī)制研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2011年

10 姚楠;歐洲越橘提取物抗眼組織氧化應(yīng)激的作用研究[D];暨南大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 盛芳;五黃提取物拮抗內(nèi)毒素對人牙周膜成纖維細(xì)胞毒性作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2012年

2 黃翠麗;扇貝裙邊提取物抗動脈粥樣硬化作用及其對血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響[D];青島大學(xué);2001年

3 李強(qiáng);附子提取物誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞株CEM凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2004年

4 劉杰;復(fù)方GGV兔體內(nèi)藥動學(xué)初步研究[D];重慶大學(xué);2004年

5 丁小靜;藍(lán)莓提取物對急性化學(xué)性肝損傷的干預(yù)作用[D];吉林大學(xué);2010年

6 魏艷麗;乳化型香腸中脂肪氧化及控制的研究[D];天津商業(yè)大學(xué);2010年

7 姜偉偉;黑米皮提取物對PC-3細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2010年

8 徐睿;海帶和菲律賓蛤仔提取物對酪氨酸酶活性和黑素生成影響的研究[D];中國海洋大學(xué);2010年

9 武震;銀杏葉提取物對周圍神經(jīng)再生影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2003年

10 梁均樂;知母提取物藥時曲線測定及大鼠腸道菌代謝研究[D];華南理工大學(xué);2010年

，

本文編號：2705637