【摘要】： 目的: 赫特威爾氏上皮根鞘(Hertwig's epithelial root sheath,HERS)是牙根發(fā)育中的決定性結(jié)構(gòu),是牙根發(fā)育過(guò)程中上皮-間充質(zhì)所發(fā)生的一系列交互信號(hào)誘導(dǎo)得以實(shí)現(xiàn)的重要且唯一的上皮性結(jié)構(gòu)。上皮剩余(epithelial cell rests of Malassez,ECRM)是牙根發(fā)育期上皮根鞘斷裂后的剩余物,是成熟牙周膜內(nèi)的唯一上皮性結(jié)構(gòu),在牙齒發(fā)育完成后的牙周組織中一生都存在。在成熟期,上皮剩余可能在穩(wěn)定牙周膜內(nèi)環(huán)境和牙骨質(zhì)修復(fù)再生發(fā)面發(fā)揮重要作用。因此,對(duì)于成熟期上皮剩余的具體生物學(xué)性狀及作用研究可能為解決牙周再生的問(wèn)題提供了新的希望和途徑。 本課題研究通過(guò)建立咬合力改變的模型,觀察上皮剩余在咬合力改變后的不同時(shí)期其形態(tài)分布的變化規(guī)律,觀察上皮剩余中非膠原基質(zhì)蛋白骨橋素(osteopontin,OPN)及牙周改建的關(guān)系,探討咬合力、上皮剩余與牙周改建三者之間的關(guān)系。從而探討其在牙周改建中的作用機(jī)制。 方法: 選用42只體重為40±2g的成年雄性BALB/c小鼠,1%戊巴比妥鈉(3 mg/100g)腹腔麻醉小鼠,建立小鼠咬合力增強(qiáng)和減弱的動(dòng)物模型,在術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)處死動(dòng)物。戊巴比妥鈉(1%,3 mg/100g)腹腔麻醉后新鮮配置4%多聚甲醛循環(huán)內(nèi)固定30min,分離雙側(cè)上頜骨4℃下再固定24h、復(fù)合甲酸脫鈣兩周,梯度乙醇脫水、石蠟包埋,近遠(yuǎn)中向5μm連續(xù)切片,行HE和免疫組化染色。 1.光鏡觀察 細(xì)胞角蛋白14(cytokeratin14,CK14)標(biāo)記上皮剩余細(xì)胞,觀察在咬合力改變后不同時(shí)期上皮剩余的形態(tài)分布變化規(guī)律。在光學(xué)顯微鏡下觀察不同時(shí)期牙周形態(tài)變化。 2.免疫組化檢測(cè)骨形成相關(guān)蛋白的表達(dá) PV免疫組化兩步法檢測(cè)OPN在上皮剩余中的表達(dá)。 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 光學(xué)顯微鏡下對(duì)上皮剩余總數(shù)直接計(jì)數(shù),在鏡下應(yīng)用圖像分析軟件對(duì)牙周膜寬度進(jìn)行進(jìn)行測(cè)量。采用SPSS 11.0軟件包,計(jì)算咬合力改變后不同時(shí)期上皮剩余細(xì)胞數(shù)量差異及牙周膜寬度差異是否存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,取α=0.05水準(zhǔn)。 結(jié)果: 1.上皮剩余的變化 咬合力增強(qiáng)組術(shù)后早期上皮剩余的數(shù)量逐漸增多,在術(shù)后7天時(shí)達(dá)到高峰,細(xì)胞簇外形不規(guī)則,簇內(nèi)細(xì)胞間隙較大,隨后上皮剩余的數(shù)量開(kāi)始下降,至術(shù)后28天時(shí)基本恢復(fù)正常,此時(shí)細(xì)胞簇又呈現(xiàn)成熟上皮剩余的外形。咬合力減弱組:與正常對(duì)照組相比,上皮剩余的數(shù)量在中后期逐漸下降。 2.牙周膜變化 咬合力增強(qiáng)組各時(shí)間點(diǎn)的標(biāo)本未發(fā)生明顯的組織學(xué)變化,術(shù)后4周時(shí)牙周膜寬度有明顯增加。咬合力減弱組:從7天組開(kāi)始,牙周膜纖維排列明顯紊亂,牙周組織開(kāi)始萎縮,術(shù)后3周后牙周膜寬度有明顯減少。 3.骨形成蛋白的表達(dá) 咬合力增強(qiáng)組在術(shù)后7天OPN有陽(yáng)性表達(dá),而咬合力減弱組則沒(méi)有表達(dá)。 結(jié)論: 咬合力的改變可以刺激誘發(fā)上皮剩余數(shù)量和形態(tài)上的變化,這種變化與牙周組織的改建有著密切的相關(guān)性。上皮剩余中一些骨形成蛋白的表達(dá),說(shuō)明其在牙骨質(zhì)修復(fù)再生中可能發(fā)揮積極作用。
【圖文】：

小鼠充分麻醉后固定于手術(shù)臺(tái)上，左圖l一2.沿著左側(cè)下頗骨下緣作約Ic

山東大學(xué)碩士學(xué)位論文附圖圖1一1.小鼠充分麻醉后固定于手術(shù)臺(tái)上，左側(cè)下領(lǐng)區(qū)備皮圖l一2.沿著左側(cè)下頗骨下緣作約Ic。的口外切口圖l一3.分離皮下筋膜，，咬肌，于下領(lǐng)骨下緣切斷咬肌的韌帶附著，將咬肌和骨膜翻開(kāi)以暴露骨面圖1一4.在生理鹽水沖洗下用低速手機(jī)和4號(hào)球鉆及裂鉆去頰側(cè)骨板
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R78

【參考文獻(xiàn)】

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1 于西佼;李紓;于蘭;肖長(zhǎng)杰;劉宗霞;;建鉭期上皮剩余的形態(tài)學(xué)和細(xì)胞活性研究[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2007年06期

2 劉飛,趙云鳳,李明哲,劉衛(wèi)平,王華蓉;咬合力增強(qiáng)和減弱對(duì)大鼠磨牙牙周支持組織形態(tài)學(xué)的影響[J];華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2001年01期

3 張偉國(guó),王英,王麗珍,劉正;鼠顱面部礦化組織發(fā)育中非膠原蛋白的表達(dá)[J];口腔頜面外科雜志;1998年03期

4 于西佼;李紓;楊丕山;肖長(zhǎng)杰;于蘭;劉宗霞;;小鼠磨牙上皮根鞘與牙骨質(zhì)發(fā)育的關(guān)系[J];上海口腔醫(yī)學(xué);2007年01期

5 于西佼;李紓;肖長(zhǎng)杰;劉宗霞;于蘭;;上皮根鞘細(xì)胞在牙骨質(zhì)發(fā)育中的作用[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2006年10期

本文編號(hào)：2704608