【摘要】： 目的:檢測DPC4、P16及Bcl-2在口腔白斑和口腔鱗癌組織中的表達(dá)情況,探討DPC4、P16及Bcl-2在口腔白斑癌變過程中變化及可能機(jī)制,且進(jìn)一步了解DPC4與P16及Bcl-2的關(guān)系,為口腔癌前損害癌變的檢測、口腔鱗癌的早期診斷、治療選擇及預(yù)后等方面提供參考指標(biāo)。 方法:取口腔白斑26例,口腔鱗癌30例和正�？谇徽衬そM織10例。以4%的多聚甲醛固定,石蠟包埋,制成2μm切片,行免疫組織化學(xué)(polymer法和SABC法)檢測DPC4、P16及Bcl-2蛋白的表達(dá)變化,其中每組各10例中取部分組織立即存于液氮或-80℃超低溫冰箱用于提取RNA,進(jìn)一步做熒光實(shí)時定量PCR檢測組織中DPC4 mRNA的表達(dá)。 結(jié)果: 1.DPC4蛋白在10例正常口腔粘膜組織、26例口腔白斑及30例口腔鱗癌組織中表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義,正常口腔粘膜組織白斑組織鱗癌組織(P㩳0.05)。每組各10例中的DPC4 mRNA的表達(dá)水平亦有統(tǒng)計學(xué)差異,正�？谇徽衬そM織白斑組織鱗癌組織(P㩳0.05)。SABC法和熒光定量PCR對DPC4檢測結(jié)果一致性較好(Kappa=0.9320.75)。 2.Bcl-2蛋白在10例正常口腔粘膜組織、26例口腔白斑及30例口腔鱗癌組織中表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義,正�？谇徽衬そM織㩳白斑組織㩳鱗癌組織(P㩳0.05)。 3.P16蛋白在10例正�？谇徽衬そM織、26例口腔白斑及30例口腔鱗癌組織中表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義,正�？谇徽衬そM織白斑組織鱗癌組織(P㩳0.05)。 4.DPC4蛋白表達(dá)與Bcl-2蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r = -0.827,P0.05);DPC4蛋白表達(dá)與P16蛋白表達(dá)呈正相關(guān)(r = 0.569,P0.05)。 結(jié)論: 1.DPC4蛋白和DPC4 mRNA的表達(dá)強(qiáng)度從正�？谇徽衬そM、口腔白斑組到鱗癌組逐漸減弱,提示DPC4基因的缺失可能與口腔粘膜癌變有關(guān)。P16蛋白在口腔鱗癌組中的表達(dá)少于正常口腔粘膜組及白斑組,提示P16基因表達(dá)下降可能參與了口腔鱗癌的發(fā)生發(fā)展過程。Bcl-2蛋白的表達(dá)隨著癌變程度增加而增加,表明Bcl-2蛋白的高表達(dá)有利于口腔粘膜癌變的發(fā)生。 2.DPC4蛋白表達(dá)與Bcl-2蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān),而與P16蛋白表達(dá)呈正相關(guān),提示了DPC4基因的缺失表達(dá)、P16基因的低表達(dá)和Bcl-2基因的過表達(dá)三者可能單獨(dú)或共同參與了口腔白斑癌變過程,可作為口腔白斑癌變檢測的指標(biāo)。 3.免疫組化法與熒光定量PCR法具有一致性,由于免疫組化對實(shí)驗(yàn)設(shè)備要求不高,費(fèi)用相對較低,可以通過這種方法對目的基因的蛋白表達(dá)進(jìn)行初步檢測。
【圖文】：

說明目標(biāo)基因和內(nèi)標(biāo)基因的擴(kuò)增效率相同，就可以通過△△CT 方法進(jìn)行相對定量。在統(tǒng)計圖1 中，直線斜率是 0.037，因而假設(shè)成立，△△CT 方法可以用來分析數(shù)據(jù)。1.2 通過實(shí)時熒光定量 PCR 法對 10 例正常口腔粘膜、10 例口腔白斑和 10 例口腔鱗狀細(xì)胞癌中的 DPC4 mRNA 檢測，結(jié)果顯示口腔白斑組織中 DPC4mRNA 表達(dá)水平比正�？谇徽衬そM織中 DPC4 的 mRNA 表達(dá)水平明顯降低，有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），，而比口腔鱗癌組織中 DPC4 的 mRNA 表達(dá)水平明顯升高（P<0.05）見統(tǒng)計圖表 2

說明目標(biāo)基因和內(nèi)標(biāo)基因的擴(kuò)增效率相同，就可以通過△△CT 方法進(jìn)行相對定量。在統(tǒng)計圖1 中，直線斜率是 0.037，因而假設(shè)成立，△△CT 方法可以用來分析數(shù)據(jù)。1.2 通過實(shí)時熒光定量 PCR 法對 10 例正�？谇徽衬ぁ�10 例口腔白斑和 10 例口腔鱗狀細(xì)胞癌中的 DPC4 mRNA 檢測，結(jié)果顯示口腔白斑組織中 DPC4mRNA 表達(dá)水平比正常口腔粘膜組織中 DPC4 的 mRNA 表達(dá)水平明顯降低，有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而比口腔鱗癌組織中 DPC4 的 mRNA 表達(dá)水平明顯升高（P<0.05）見統(tǒng)計圖表 2
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R739.8

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本文編號：2702596