發(fā)布時間：2020-06-06 11:33

【摘要】：目的 1.體外原代培養(yǎng)大鼠牙乳頭細胞(rat dental papilla cells, RDPCs),鑒定并觀察其生長狀況,為下一步實驗提供細胞來源 2.對比三氧化礦物凝聚體(mineral trioxide aggregate,MTA)和氫氧化鈣對大鼠牙乳頭細胞增殖和分化能力的影響,為MTA應用于根尖誘導成形提供實驗依據。 方法 1.無菌條件下解剖分離出生1d的SD系大鼠下頜骨磨牙牙胚,組織塊法原代培養(yǎng)RDPCs,純化后鑒定并進行相關實驗 2.分別用不同濃度的MTA和氫氧化鈣浸提液培養(yǎng)細胞3d,并設立空白對照組,通過MTT技術檢測細胞增殖活性,篩選兩種藥物最佳作用濃度 3.用最適濃度的MTA和氫氧化鈣浸提液作用細胞,并設立空白對照組,分別于1、3、5、7d檢測細胞的增殖能力、分泌的堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性,于1、3、5d檢測Ⅰ膠原含量,比較MTA和氫氧化鈣對RDPCs增殖及分化能力的影響。 結果 1.通過石蠟切片HE染色、細胞形態(tài)學檢查、免疫組織化學染色證明所培養(yǎng)細胞是RDPCs;體外培養(yǎng)的RDPCs呈梭形或星形,生長狀態(tài)良好,原代培養(yǎng)第3天細胞進入生長旺盛期,第7天達到生長高峰。傳代6次后,細胞增殖速度變緩、活力降低。 2.高濃度(20mg/ml)的MTA和氫氧化鈣(0.018mg/ml)明顯抑制細胞生長,低濃度(2mg/m及以下)的MTA和氫氧化鈣(0.012mg/m及以下)可促進細胞增殖,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 3.與對照組比較,MTA培養(yǎng)的RDPCs第3、5、7d增殖加速、ALP活性增強,第3、5d Ⅰ型膠原含量增加,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與氫氧化鈣比較,MTA培養(yǎng)細胞第3d時,ALP活性增強、Ⅰ型膠原含量增加,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；第5d時,MTA和氫氧化鈣組ALP活性與Ⅰ型膠原含量未見明顯不同,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結論 1.體外培養(yǎng)的RDPCs具有良好的增殖和分化能力,可作為牙組織工程的種子細胞并為根尖誘導成形提供細胞來源。 2.MTA能夠促進RDPCs增殖和分化；與氫氧化鈣對比,MTA促進細胞分化更快,可能封閉根尖時間更早,有望替代傳統(tǒng)的氫氧化鈣作為根尖誘導成形材料。
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R781.05

【參考文獻】

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本文編號：2699614