【摘要】：目的 1.體外原代培養(yǎng)大鼠牙乳頭細(xì)胞(rat dental papilla cells, RDPCs),鑒定并觀察其生長(zhǎng)狀況,為下一步實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞來(lái)源 2.對(duì)比三氧化礦物凝聚體(mineral trioxide aggregate,MTA)和氫氧化鈣對(duì)大鼠牙乳頭細(xì)胞增殖和分化能力的影響,為MTA應(yīng)用于根尖誘導(dǎo)成形提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 1.無(wú)菌條件下解剖分離出生1d的SD系大鼠下頜骨磨牙牙胚,組織塊法原代培養(yǎng)RDPCs,純化后鑒定并進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn) 2.分別用不同濃度的MTA和氫氧化鈣浸提液培養(yǎng)細(xì)胞3d,并設(shè)立空白對(duì)照組,通過(guò)MTT技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖活性,篩選兩種藥物最佳作用濃度 3.用最適濃度的MTA和氫氧化鈣浸提液作用細(xì)胞,并設(shè)立空白對(duì)照組,分別于1、3、5、7d檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力、分泌的堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性,于1、3、5d檢測(cè)Ⅰ膠原含量,比較MTA和氫氧化鈣對(duì)RDPCs增殖及分化能力的影響。 結(jié)果 1.通過(guò)石蠟切片HE染色、細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查、免疫組織化學(xué)染色證明所培養(yǎng)細(xì)胞是RDPCs;體外培養(yǎng)的RDPCs呈梭形或星形,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,原代培養(yǎng)第3天細(xì)胞進(jìn)入生長(zhǎng)旺盛期,第7天達(dá)到生長(zhǎng)高峰。傳代6次后,細(xì)胞增殖速度變緩、活力降低。 2.高濃度(20mg/ml)的MTA和氫氧化鈣(0.018mg/ml)明顯抑制細(xì)胞生長(zhǎng),低濃度(2mg/m及以下)的MTA和氫氧化鈣(0.012mg/m及以下)可促進(jìn)細(xì)胞增殖,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 3.與對(duì)照組比較,MTA培養(yǎng)的RDPCs第3、5、7d增殖加速、ALP活性增強(qiáng),第3、5d Ⅰ型膠原含量增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與氫氧化鈣比較,MTA培養(yǎng)細(xì)胞第3d時(shí),ALP活性增強(qiáng)、Ⅰ型膠原含量增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；第5d時(shí),MTA和氫氧化鈣組ALP活性與Ⅰ型膠原含量未見(jiàn)明顯不同,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論 1.體外培養(yǎng)的RDPCs具有良好的增殖和分化能力,可作為牙組織工程的種子細(xì)胞并為根尖誘導(dǎo)成形提供細(xì)胞來(lái)源。 2.MTA能夠促進(jìn)RDPCs增殖和分化；與氫氧化鈣對(duì)比,MTA促進(jìn)細(xì)胞分化更快,可能封閉根尖時(shí)間更早,有望替代傳統(tǒng)的氫氧化鈣作為根尖誘導(dǎo)成形材料。
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R781.05

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

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本文編號(hào)：2699614