【摘要】：牙髓是一種軟的結(jié)締組織并具有形成牙本質(zhì)和維持牙本質(zhì)的生物學和生理學活性的功能。當牙髓組織感染時,由于血供的不足很難通過機體本身消除感染。臨床上常采用根管治療去除整個牙髓,消毒并充填根管,從而達到去除感染的目的。然而,這些牙齒失去了營養(yǎng)、修復(fù)、防御等功能,影響了牙齒的長期存活率。因此,活髓治療牙髓炎成為了理想的策略。 牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體再生已成為國內(nèi)國際口腔醫(yī)學研究的熱點。近年來,利用干細胞和組織工程技術(shù)在各個領(lǐng)域的成功運行為實現(xiàn)含牙髓組織再生提供了借鑒。種子細胞、誘導(dǎo)微環(huán)境和生物支架材料是運用組織工程構(gòu)建器官及組織再生的三大要素。目前已經(jīng)有一些牙髓組織再生的報道,但接近于正常牙根長度的、完整的、具有繼續(xù)礦化能力的牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體的再生仍然沒有實現(xiàn)。其根本原因在于缺乏理想的種子細胞、誘導(dǎo)微環(huán)境及生物支架材料�；谏鲜鲅芯勘尘�,本課題1)探索理想的種子細胞;2)新穎的三維干細胞聚合體的構(gòu)建;3)進行牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體再生。 所取得的主要研究結(jié)果如下: 1、理想的種子細胞的篩選 為了評估最佳的種子細胞是否能進行牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體再生,我們利用茜紅染色。油紅O染色、免疫細胞化學染色技術(shù)(ICC)、流式細胞術(shù)(FCM)從形態(tài)學、蛋白及CD分子表型檢測牙源性干細胞多向分化潛能進行研究,利用單克隆擴增技術(shù)及甲苯胺藍染色對這些細胞克隆形成能力進行檢測,利用MTT及FCM對牙髓干細胞(DPSCs)、根端牙乳頭干細胞(SCAP)增值能力進行分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn):根端牙乳頭干細胞具有更高的增值能力和多向分化能力。因此,SCAP可以作為種子細胞有助于牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體的成功再生。 2、新穎三維無支架材料干細胞聚合體的構(gòu)建 為了獲得適合理想的無支架材料的細胞聚合體,我們對常用的細胞膜片、細胞聚合體進行對比、改進,并進行組織學觀察、免疫組織化學觀察、掃面電鏡觀察及RT-PCR檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn):細胞聚合體內(nèi)含有大量的細胞外基質(zhì)、足夠的細胞量,其表面細胞伸張充分,細胞連接緊密,此外基因水平發(fā)現(xiàn)細胞聚合體較細胞膜片的成牙/成骨能力更強。本研究結(jié)果充分說明細胞聚合體更適合牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體的再生。3、牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體再生 本實驗室郭維華博士對乙二胺四乙酸(EDTA)梯度脫礦處理的牙本質(zhì)基質(zhì) 進行了系統(tǒng)的檢測發(fā)現(xiàn)其不僅具有支撐細胞的作用,還能提供一個誘導(dǎo)成牙本質(zhì)微環(huán)境,并利用處理過的牙本質(zhì)基質(zhì)片段成功誘導(dǎo)牙囊細胞成為具有繼續(xù)礦化能力的成牙本質(zhì)細胞,完整的牙髓。因此,我們應(yīng)用處理后的牙根結(jié)合SCAP細胞聚合體移植入裸鼠皮下,六周后取材,脫礦。HE和Masson三色觀察、免疫組織化學染色。研究結(jié)果顯示根管管壁有一層新形成的、厚度均勻的牙本質(zhì)并且其表面排列著一層極性變化的、對牙本質(zhì)涎蛋白(DSP)、骨涎蛋白(BSP)、堿性磷酸酶(ALP)、人線粒體表達呈陽性成牙本質(zhì)細胞層,以及血管化的固有牙髓。
【學位授予單位】：佳木斯大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R78

【共引文獻】

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3 Behnam Ebrahimi;Mohammad Mehdi Yaghoobi;Ali Mohammadi Kamal-abadi;Maryam Raoofn;;Human dental pulp stem cells express many pluripotency regulators and differentiate into neuronal cells[J];Neural Regeneration Research;2011年34期

4 安玉林;那思家;韋蔚;陳哲;王國軒;杜建宇;金巖;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞膜片的構(gòu)建及其特性[J];實用口腔醫(yī)學雜志;2012年03期

5 那思家;黃芳;郭維華;宮坤;金巖;李德超;;牙周膜干細胞膜片的構(gòu)建及其生物學特性的研究[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2011年02期

6 黃楊;李康婧;陳文霞;;根管預(yù)備后的牙本質(zhì)壁對兔骨髓間充質(zhì)干細胞生長的影響[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2012年03期

7 ;Osteoinduction by Ca-P biomaterials implanted into the muscles of mice[J];Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology);2011年07期

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4 朱軼萍;人牙髓細胞在體外增殖和分化潛能的實驗研究[D];南京醫(yī)科大學;2008年

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6 董金山;經(jīng)典WNT信號通路在骨髓間充質(zhì)干細胞分化為成牙本質(zhì)樣細胞中的作用體外實驗研究[D];第四軍醫(yī)大學;2010年

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本文編號：2698868