【摘要】：口腔是一個(gè)復(fù)雜的電解質(zhì)環(huán)境,同時(shí)存在大量的微生物,植入的鈦及鈦合金材料在長(zhǎng)時(shí)間接觸后會(huì)發(fā)生多種形式的腐蝕,導(dǎo)致鈦離子從種植體表面析出。此外,種植體-骨界面的微動(dòng)磨損也會(huì)加速鈦離子的析出。這些釋放出來(lái)的鈦離子可能進(jìn)入周圍組織或通過(guò)血液循環(huán)向遠(yuǎn)端擴(kuò)散,誘發(fā)機(jī)體細(xì)胞產(chǎn)生一系列不良的生物學(xué)效應(yīng),從而加劇種植體周圍骨組織吸收。線粒體不僅是細(xì)胞能量代謝中心,而且在機(jī)體免疫應(yīng)答強(qiáng)度的調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。免疫應(yīng)答強(qiáng)度的調(diào)節(jié)是機(jī)體可否產(chǎn)生適度的免疫應(yīng)答,使之能夠有效清除致病因素而又不致于損傷自身組織的關(guān)鍵。【目的】本課題以Jurkat T細(xì)胞為研究對(duì)象,擬從骨免疫學(xué)的角度出發(fā),探討線粒體在鈦離子對(duì)T淋巴細(xì)胞胞內(nèi)鈣信號(hào)調(diào)控過(guò)程中的作用以及鈦離子引起線粒體鈣轉(zhuǎn)運(yùn)功能變化的可能作用機(jī)制。【方法】1.利用鈣離子特異性熒光標(biāo)記探針Fluo-3、Rhod-2結(jié)合激光共聚焦顯微鏡掃描技術(shù),分析鈦離子(0~100μM)對(duì)Jurkat T細(xì)胞胞漿及線粒體內(nèi)鈣離子濃度的影響。2.利用線粒體特異性熒光探針Mito-tracker Green結(jié)合激光共聚焦掃描、流式細(xì)胞術(shù),分析鈦離子對(duì)Jurkat T細(xì)胞內(nèi)線粒體的數(shù)目及位置分布的影響。3.利用JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒結(jié)合流式細(xì)胞術(shù),分析鈦離子作用不同時(shí)間(3h、6h、12h、24h)后線粒體膜電位的變化。4.應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),分析鈦離子對(duì)線粒體鈣單向轉(zhuǎn)運(yùn)體MCU-mRNA表達(dá)的影響�！窘Y(jié)果】1.鈦離子無(wú)論是單獨(dú)作用還是協(xié)同PHA共同作用時(shí),Jurkat T細(xì)胞胞漿及線粒體內(nèi)鈣離子平均熒光強(qiáng)度均隨鈦離子作用時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高,且升高的程度呈一定的濃度依賴性,但協(xié)同PHA刺激作用更顯著。2.鈦離子或PHA單獨(dú)作用均可引起胞質(zhì)內(nèi)線粒體數(shù)量的增加,同時(shí)刺激線粒體由散在分布趨向于胞膜附近區(qū)域集中分布。3.鈦離子單獨(dú)作用及鈦離子與PHA協(xié)同作用時(shí),12小時(shí)內(nèi)各組細(xì)胞線粒體膜電位均無(wú)顯著變化,24小時(shí)后鈦離子與PHA共刺激組細(xì)胞線粒體膜電位開(kāi)始下降,其中高濃度組較對(duì)照組顯著降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.鈦離子與PHA協(xié)同作用時(shí)線粒體單向鈣轉(zhuǎn)運(yùn)體(MCU)mRNA表達(dá)水平上升,但鈦離子單獨(dú)作用并未引起線粒體MCU mRNA表達(dá)的顯著變化�！窘Y(jié)論】本研究結(jié)果表明鈦離子可通過(guò)增加線粒體數(shù)量、改變其空間分布以及激活MCU通道調(diào)控線粒體鈣轉(zhuǎn)運(yùn)功能,促進(jìn)線粒體攝取胞膜附近局部過(guò)增高的鈣離子,從而維持胞外鈣離子的內(nèi)流,胞內(nèi)鈣信號(hào)進(jìn)一步增強(qiáng)。隨著鈦離子濃度的升高及作用時(shí)間的延長(zhǎng),線粒體內(nèi)鈣離子濃度過(guò)度增高,可引起線粒體膜電位下降。
【圖文】：

鈦離子對(duì) T 淋巴細(xì)胞線粒體鈣轉(zhuǎn)運(yùn)功能的影響及其在鈣信號(hào)調(diào)節(jié)中的作用 2015 級(jí)碩士學(xué)位論文表 1-1 鈦離子作用下 PHA（-）組 T 細(xì)胞內(nèi)鈣離子平均熒光強(qiáng)度的變化（ x±s，n=3）作用時(shí)間 3h 6h 12h對(duì)照組 427.46±74.28 439.70±83.48 426.76±74.8325μM 濃度組 653.07±95.04* 661.09±108.36* 651.63±97.52*50μM 濃度組 725.70±97.54* 780.53±103.21* 746.51±101.24*100μM 濃度組 754.18±105.13* 736.34±101.69* 767.95±98.41*注：各濃度組與對(duì)照組之間比較，*P＜0.05；各濃度組之間比較，△P＜0.05。

鈦離子對(duì) T 淋巴細(xì)胞線粒體鈣轉(zhuǎn)運(yùn)功能的影響及其在鈣信號(hào)調(diào)節(jié)中的作用 2015 級(jí)碩士學(xué)位論文表1-2 鈦離子對(duì) PHA（+）組 T 細(xì)胞內(nèi)鈣離子平均熒光強(qiáng)度的影響（ x±s，n=3）作用時(shí)間 3h 6h 12h對(duì)照組 817.94±93.27 806.45±101.40 802.60±95.0325μM 濃度組 805.68±94.76 813.95±91.86 811.52±95.2650μM 濃度組 922.05±99.14 1056.31±115.62*△ 1195.19±101.02*△100μM 濃度組 1205.03±97.05*△ 1189.87±105.53*△ 1384.93±116.12*△注：各濃度組與對(duì)照組之間比較，*P＜0.05；各濃度組之間比較，△P＜0.05。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R783

【參考文獻(xiàn)】

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1 龐振華;陳東暉;李秋瑩;張寧;唐禮;;鈦離子對(duì)Jurkat T細(xì)胞增殖及分泌骨改建相關(guān)因子的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2015年22期

2 陳邵宏;龐效云;孫飛;;線粒體運(yùn)動(dòng)及其相關(guān)的細(xì)胞骨架和蛋白[J];生物物理學(xué)報(bào);2011年12期

3 蔣立柱;占德松;于學(xué)垠;;3種牙科金屬材料對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞凋亡的影響(英文)[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年03期

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本文編號(hào)：2698155