變異鏈球菌luxS基因在鐵代謝和氧化應(yīng)激中的功能研究
發(fā)布時間:2020-06-03 23:22
【摘要】:目的探討luxS基因在變異鏈球菌鐵代謝方面的功能;比較標(biāo)準(zhǔn)株和luxS基因突變株在過氧化氫培養(yǎng)基中不同時間的生存率差異,以及鐵螯合劑對生存率的影響,探討luxS基因在變異鏈球菌氧化應(yīng)激中的作用及機(jī)制。 方法利用變異鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株以及前期實驗室構(gòu)建成功的luxS基因突變株,通過測定兩菌株在不同濃度鐵限制條件培養(yǎng)基中24h的吸光度值(A值),以及l(fā)uxS基因突變株在加入外源性鐵或者標(biāo)準(zhǔn)株上清液的鐵限制條件培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h的A值,比較兩菌株的生長差異;變異鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株和luxS基因突變株培養(yǎng)至對數(shù)中期分成三組,一組作為對照組在普通乳酪消化胨酵母(TPY)培養(yǎng)液中生長,另兩組作為實驗組,其中一組加入過氧化氫終濃度58.8mmol/L的TPY培養(yǎng)液中,另一組加入含有鐵螯合劑2,2’-聯(lián)吡啶的過氧化氫終濃度為58.8mmol/L的TPY培養(yǎng)液中。分別在厭氧培養(yǎng)的0.5、1、2h取菌液采用平板活菌計數(shù)法測定活菌數(shù),計算生存率,統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果培養(yǎng)24h,兩種菌株在鐵螯合劑濃度為0.1mmol/L的培養(yǎng)基中均未表現(xiàn)明顯生長抑制(P0.05),在螯合劑濃度增大至0.3mmol/L時,突變株表現(xiàn)出生長抑制(P0.05),在螯合劑濃度至0.5mmol/L時,生長抑制更為顯著(P0.001)。在鐵限制培養(yǎng)基中生長抑制的luxS基因突變株轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)基、外源性鐵或標(biāo)準(zhǔn)株上清液加入的同濃度鐵限制培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h,突變株的生長均能達(dá)到較高細(xì)胞密度(P0.05)。和對照組相比,實驗組中l(wèi)uxS基因突變株的生存率在所測定的時間點均高于標(biāo)準(zhǔn)株(p0.05);與不含鐵螯合劑的實驗組相比,鐵螯合劑的加入并未提高菌株的過氧化氫耐受力(p0.05) 結(jié)論luxS基因在變異鏈球菌生長中具有鐵代謝作用;luxS基因參與變異鏈球菌氧化應(yīng)激耐受的調(diào)節(jié),該氧化應(yīng)激耐受并不是通過避免芬頓反應(yīng)(Fenton reaction)毒性作用實現(xiàn)的。
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R781.1
本文編號:2695553
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R781.1
【參考文獻(xiàn)】
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2 王倩;唐子圣;馬瑞;劉正;朱彩蓮;黃正蔚;;變異鏈球菌luxS基因?qū)Χ嗵腔|(zhì)代謝的影響[J];上海口腔醫(yī)學(xué);2011年01期
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,本文編號:2695553
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