【摘要】： 研究背景: 根管充填治療后依然存在持續(xù)性根尖周感染,這可能與根內(nèi)感染、根外感染、異物反應(yīng)以及真性囊腫等諸多因素有關(guān)。而根管充填后殘留在根管內(nèi)的細(xì)菌是造成根管治療失敗的主要原因。根管治療失敗的根管內(nèi)存在的細(xì)菌與初次根管內(nèi)感染所發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌完全不同。初次感染的根管內(nèi)存在的細(xì)菌主要為多種革蘭氏染色陰性的厭氧菌菌株。而二次感染的根管中檢測到的細(xì)菌類型僅為一種或幾種。糞腸球菌雖然是人體的正常菌群,但在無癥狀持續(xù)性根尖周感染和持續(xù)性根管內(nèi)感染中常被檢測到。糞腸球菌在根管失敗的病例中占有很高的比例,并且可以在根管內(nèi)單獨(dú)生存或者是作為根管內(nèi)主要微生物的一種。盡管在未經(jīng)治療的根管內(nèi)糞腸球菌占有相當(dāng)小的比例,但在根管充填治療后持續(xù)性的根尖周感染中起到了非常重要的作用�，F(xiàn)在的根管機(jī)械預(yù)備方法,沖洗方法和充填材料對(duì)于清除糞腸球菌需進(jìn)一步完善。本論文主要研究在體外條件下,3種根管沖洗劑和3種根管充填劑對(duì)于根管內(nèi)糞腸球菌的抗菌活性。 目的: (1)建立根管內(nèi)感染糞腸球菌的牙齒模型。 (2)比較5.25%次氯酸鈉、2%氯已定、17%EDTA三種根管沖洗劑對(duì)根管內(nèi)糞腸球菌的抗菌活性。 (3)比較Acroseal、AH plus、Cortisomol三種根管充填劑對(duì)根管內(nèi)糞腸球菌的抗菌活性。 (4)比較Acroseal、AH plus、Cortisomol三種根管充填劑各自隨時(shí)間對(duì)根管內(nèi)糞腸球菌的抗菌活性的變化。 (5)比較次氯酸鈉、氯已定、EDTA三種根管沖洗劑和Acroseal、AH plus、Cortisomol三種根管充填劑聯(lián)合作用對(duì)根管內(nèi)糞腸球菌的抗菌活性以及其抗菌活性隨時(shí)間的變化。 方法: 1、常規(guī)消毒、開髓,去除入選離體牙(100顆)牙髓,不銹鋼K銼預(yù)備根管至40~#,用17%EDTA、0.5%次氯酸鈉和蒸餾水沖洗根管,用樹脂封閉根尖孔。高壓蒸汽消毒滅菌后,選取2個(gè)標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng),檢測滅菌效果。在確認(rèn)所選標(biāo)本無菌之后,將配制好的濃度約為1.0×10~8CFU/ml菌液以100μl/根管在30min內(nèi)接種完畢。將標(biāo)本放于BHIA中,置于CO_2恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)37℃培養(yǎng)。隔日更新BHIA培養(yǎng)基直至第21d。糞腸球菌培養(yǎng)至第21d時(shí),隨機(jī)抽取2個(gè)標(biāo)本,用API 20strep試劑盒進(jìn)行生化鑒定。 2、將根管內(nèi)已感染糞腸球菌的96顆離體牙隨機(jī)分為四組,每組為24顆牙。分別用新鮮配制的5.25%次氯酸鈉、2%氯已定、17%EDTA和0.9%Nacl作為根管沖洗劑沖洗根管,其中0.9%Nacl為陰性對(duì)照。在沖洗前和沖洗后分別提取樣本。之后,進(jìn)行細(xì)菌菌落計(jì)數(shù)。采用單因素方差分析計(jì)算和比較各組的CFU的變化。 3、從四組沖洗組中分別隨機(jī)抽取6顆牙組成新的充填組,每組也為24顆牙。用紙尖吸干根管內(nèi)液體后,分別用Acroseal氫氧化鈣根管封閉劑、AH Plus根管充填材料、Cortisomol根管充填材料和碳酸鈣充填根管,其中碳酸鈣為陰性對(duì)照。牙冠部分由可樂麗菲露光固化復(fù)合樹脂充填。將標(biāo)本放于BHIA中,置于CO_2恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)37℃培養(yǎng)。1周后,選擇每一標(biāo)本的根中位置,用慢速機(jī),直徑為1mm的球鉆鉆孔進(jìn)入根管,將鉆取的牙本質(zhì)碎屑立即倒入裝有無菌水的Eppendorf管中,小型振蕩器振蕩1min。取樣完畢后,將標(biāo)本放入新的BHIA中,置于CO_2恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)37℃繼續(xù)培養(yǎng)。3周后和5周后的樣本采集過程與1周后的操作相同。之后,對(duì)所取樣本進(jìn)行細(xì)菌菌落計(jì)數(shù)。采用重復(fù)測量的方差分析計(jì)算和比較各組的CFU的變化。 結(jié)果: 1、通過各種細(xì)菌學(xué)鑒定方法,可以確定糞腸球菌已感染牙齒根管,并且確定無雜菌污染,糞腸球菌感染牙齒根管模型成功建立。 2、沖洗前各組根管內(nèi)細(xì)菌數(shù)量的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.023,P=0.995)。沖洗后各組根管內(nèi)細(xì)菌數(shù)量的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=67.847,P=0.000)。通過沖洗劑的沖洗,各組根管內(nèi)細(xì)菌數(shù)量均有顯著下降(P＜0.001)。沖洗后,各組之間CFU的減少量有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=103.060,P=0.000)。通過沖洗前后細(xì)菌量減少值的兩兩比較,5.25%次氯酸鈉、2%氯既定和17%EDTA組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),但5.25%次氯酸鈉、2%氯既定和17%EDTA組的抗菌活性均明顯好于0.9%Nacl(P＜0.001)。 3、沖洗劑分組(4組)因素主效應(yīng)(F=360.922,P=0.000)、充填劑分組(4組)因素主效應(yīng)(F=96.124,P=0.000)、以及兩者的交叉處理分組(16組)因素主效應(yīng)(F=4.580,P=0.000)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在組內(nèi)效應(yīng)及交互效應(yīng)的比較中,測量時(shí)間因素主效應(yīng)(F=286.016,P=0.000)、沖洗劑分組因素與測量時(shí)間因素的交互效應(yīng)(F=6.044,P=0.000)、充填劑分組因素與測量時(shí)間因素的交互效應(yīng)(F=21.290,P=0.000),沖洗劑分組因素、充填劑分組因素與測量時(shí)間因素的交互效應(yīng)(F=2.338,P=0.009)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論: 1、糞腸球菌感染牙齒根管的模型可以在體外成功建立; 2、5.25%次氯酸鈉、2%氯已定、17%EDTA等3種根管沖洗劑沖洗根管對(duì)根管內(nèi)糞腸球菌均有較好的抗菌效果,且抗菌效果無明顯差別,但三者均不能完全殺滅根管內(nèi)糞腸球菌; 3、Acroseal、AH plus、Cortisomol等3種根管封閉劑中,AH plus和Cortisomol對(duì)根管內(nèi)糞腸球菌均有較好的抗菌效果,AH plus的抗菌能力稍強(qiáng)于Cortisomol,而Acroseal對(duì)根管內(nèi)糞腸球菌的抗菌效果較差,但三者也不能完全殺滅根管內(nèi)糞腸球菌; 4、5.25%次氯酸鈉、2%氯已定、17%EDTA等三種根管沖洗液和Acroseal、AH plus、Cortisomol三種根管封閉劑對(duì)根管內(nèi)糞腸球菌的聯(lián)合作用中,5.25%次氯酸鈉和AH plus的組合,抗菌效果最好; 5、糞腸球菌在已充填的根管中隨時(shí)間的總的變化趨勢為增加。其中,Acroseal組中糞腸球菌在3周后就開始有明顯增加,而其他兩組的糞腸球菌則會(huì)在5周后才會(huì)有明顯增加,增加的幅度小于Acroseal組。
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R781.05

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本文編號(hào)：2694859