【摘要】：研究背景 口腔頜面部淋巴管畸形往往導致“巨舌”、“巨唇”,嚴重影響患者的面容和功能。不僅可引起局部畸形和容貌缺陷,還給患者及其家人帶來極大的精神壓力和心理負擔。隨著研究的深入,基因突變導致淋巴管形成促進因子和抑制因子調控淋巴管形成的平衡被打破從而導致淋巴管畸形形成這一觀點逐漸被越來越多的學者所接受。查閱目前對淋巴管畸形病因研究現狀,根據基因表達改變導致相應內皮細胞數量改變,本研究擬重點研究淋巴管和血管內皮細胞生成相關因子在脈管畸形中的表達情況,并進一步探討脈管畸形的發(fā)病原因。 血管內皮生長因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)是迄今為止發(fā)現的最重要的淋巴管生成因子之一。腫瘤細胞分泌的VEGF-C可與VEGFR-3結合,通過促進LEC(lymphatic endothelial cell,淋巴管內皮細胞)增殖、遷移和存活來介導淋巴管生成。完整結構的VEGF-C僅結合VEGFR-3,而加工后成熟的VEGF-C片段與VEGFR-3親和力顯著增強。VEGF-C純合子缺失(homozygous deletion)導致小鼠淋巴管生成的缺乏,提示在小鼠胚胎淋巴管發(fā)育過程中VEGF-C是必需的。研究還發(fā)現,VEGF-C可以與其他受體結合而啟動淋巴管生成信號。此外,Sidle DM等發(fā)現,VEGF-C的高表達與淋巴管畸形的復發(fā)有關。 促血管生成素(Angiogenin,Angiopoietin,ANG)是新近才發(fā)現的一族蛋白分子,它們是腫瘤分泌的生長因子,能刺激新血管的生長。包括ANG-1、ANG-2、ANG-3和ANG-4四種分子。Ang作用于內皮特異的Tie-2受體(tie-2 receptor,Tie2),維持成熟血管的完整性及靜息狀態(tài),并參與生理及病理情況下的血管新生。目前研究認為,ANG-1的表達與腫瘤血管形成的多少關系不大,而ANG-2的表達是腫瘤血管新生起始及加強的因素,與腫瘤血管生成數目、臨床分期及預后關系密切。在體內、體外試驗中證實ANG-1促進淋巴管內皮細胞生長和淋巴管生成。 內抑制素(Endostatin,END)是1997年由O'Reilly等從患內皮細胞瘤(EOMA)的小鼠血清中首先分離得到的,它是由膠原蛋白X臨近Ⅶ的降解產物,可作為腫瘤源性血管生成抑制物。研究發(fā)現,其在體外能夠強烈抑制淋巴管內皮細胞的增殖和游走。在加入少量內抑制素后,不久可見淋巴管內皮細胞的死亡,隨著濃度的增加細胞死亡的數量明顯增多,其作用機制可能與作用于血管內皮的機制相似:即直接與內皮細胞表面的受體結合,從而抑制內皮細胞的增生;阻斷堿性成纖維細胞因子(bFGF)與其受體結合,從而阻斷了信號傳遞的通路而發(fā)揮作用;可抑制抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-x1,從而促使內皮細胞凋亡加速;可以直接激活黏斑激酶(FAK),破壞內皮細胞斑的形成,從而抑制內皮細胞的遷移,直至內皮細胞逐漸變圓、離壁、浮起、死亡。 目的 為探討VEGF-C、ANG-1、END蛋白在口腔頜面淋巴管畸形中的表達及其與該病變發(fā)生、發(fā)展和預后的關系,本實驗選擇不同類別及發(fā)生部位的淋巴管畸形病變組織及正常頜面部組織作為研究對象,應用免疫組化技術分別檢測VEGF-C蛋白、ANG-1蛋白、END蛋白的表達情況,以了解它們與淋巴管畸形病變發(fā)生發(fā)展的關系及三種蛋白之間的相互關系。 材料和方法 1.收集鄭州大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院病理科2002年7月—2006年12月存檔的口腔頜面部淋巴管畸形石蠟標本61例(微囊型14例,大囊型30例,淋巴管畸形合并微靜脈畸形17例)。其中舌部29例,腮腺區(qū)5例,頦下區(qū)及上頸部18例,頰部9例�；颊吣挲g2月～66歲,中位年齡13.9歲。研究對象術前均未接受硬化等其他治療。口腔頜面部正常組織10例為陰性對照。經中性福爾馬林溶液(PH=7.4)固定,常規(guī)脫水后石蠟包埋。 2.應用SA1022兩步法免疫組織化學技術,分別檢測VEGF-C蛋白、ANG-1蛋白、END蛋白的表達情況。 3.對染色結果進行觀察(并經計算機圖文定量分析).所有數據應用SPSS.14.0軟件包處理,采用t檢驗、秩和檢驗、X~2檢驗及Fisher精確概率檢驗法,相關分析采用Spearmans等級相關分析。以α=0.05為顯著性檢驗水準。 結果 1.VEGF-C蛋白的陽性表達主要位于細胞漿,少量可見于細胞膜,呈棕黃色顆粒,彌漫分布。在頜面部正常組織中VEGF-C蛋白表達很弱。在淋巴管畸形與正常組織之間的的表達差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。VEGF-C蛋白在大囊型淋巴管畸形和微囊型淋巴管畸形中表的的差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。而二者與正常組織的表達差異均有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。 2.ANG-1蛋白的陽性表達主要位于細胞漿,少量可見于細胞膜,呈棕黃色顆粒,彌漫分布。在頜面部正常組織中表達很弱。淋巴管畸形中與正常組織中的表達差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。ANG-1蛋白在大囊型淋巴管畸形和微囊型淋巴管畸形中的表達差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05),而二者與正常組織的表達差異均有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。 3.END蛋白的陽性表達主要位于細胞漿,少量可見于細胞膜,呈棕黃色顆粒,彌漫分布。在頜面部正常組織中END蛋白呈一般表達。而與淋巴管畸形組織中的表達很弱,兩者相比較有顯著性差異(p＜0.05)。END蛋白在大囊型淋巴管畸形和微囊型淋巴管畸形組織中的表達差異均沒有統(tǒng)計學意義(p＞0.05),而二者與正常組織中的表達的差異均有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。 4.Spearmans等級相關分析顯示,VEGF-C與ANG-1,VEGF-C與END蛋白的表達情況在淋巴管畸形病變組織中有相關性(p＜0.05)。 結論 1.VEGF-C蛋白表達與淋巴管畸形相關。VEGF-C蛋白異常表達可能在淋巴管畸形發(fā)生發(fā)展過程中起作用。VEGF-C蛋白可能是對淋巴管畸形進行病因學研究的指標之一。 2.ANG-1蛋白表達與淋巴管畸形相關。Ang-1蛋白異常表達可能在淋巴管畸形發(fā)生發(fā)展過程中起作用。ANG-1蛋白可能是對淋巴管畸形進行病因學研究的指標之一。 3.END蛋白表達與淋巴管畸形相關。END蛋白異常表達可能在淋巴管畸形發(fā)生發(fā)展過程中起作用。END蛋白可能是對淋巴管畸形進行病因學研究的指標之一。 4.在淋巴管畸形病變組織中,VEGF-C與ANG-1,VEGF-C與END蛋白的表達具有相關性。 5.聯合檢測VEGF-C、ANG-1和END蛋白,可能有助于淋巴管畸形病變的檢測、治療和預后判斷。
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R782

【參考文獻】

相關期刊論文 前9條

1 于大海,溫玉明,孫勁東,韋山良,謝鴻鵬,龐芳河;口腔癌VEGF-C mRNA表達和血管及淋巴管生成與淋巴道轉移關系的研究[J];癌癥;2002年03期

2 張恩立,秦啟生,夏勝海;血管內皮細胞生長因子的研究及應用[J];法醫(yī)學雜志;2002年02期

3 白軼;孫志軍;趙怡芳;;淋巴管畸形病變發(fā)生機制的研究進展[J];國際口腔醫(yī)學雜志;2006年05期

4 戚曉亮;顧巖;;腫瘤淋巴管生成分子生物學進展[J];國際腫瘤學雜志;2006年08期

5 謝方民,程園園,邵旭建;內抑制素和血小板因子-4對淋巴管內皮細胞生成的影響[J];解剖學報;2005年04期

6 林文雄;蘇振民;王彪;;Ang-1、Ang-2、Tie2及VEGF在血管瘤發(fā)病機制中的作用[J];中國美容醫(yī)學;2006年02期

7 張雷雷;胥全彬;馬清鈞;;血管生成素的結構與功能的研究進展[J];生物技術通訊;2006年02期

8 王曉蕾,陳錫美;腫瘤淋巴管生成的信號轉導途徑與腫瘤淋巴轉移[J];同濟大學學報(醫(yī)學版);2003年04期

9 王俊;郭燕;陳正堂;朱波;;淋巴管生成與腫瘤轉移[J];中國腫瘤生物治療雜志;2006年05期

，

本文編號：2694764