硝苯地平在年輕成年大鼠前腭縫擴大時，對NF-kB信號通路與成骨的影響

發(fā)布時間：2020-06-03 00:30

【摘要】：上頜骨快速擴弓常用于解決牙列擁擠、牙弓狹窄、前牙反合等問題。在快速擴弓過程中,骨縫在擴弓力的作用下,牽張成骨過程激活,新骨開始在腭中縫沉積。但快速擴弓過程中仍有很多問題出現(xiàn),比如擴弓后最普遍的并發(fā)癥--復發(fā)。有學者發(fā)現(xiàn),由于在快速擴弓過程中,擴開的腭中縫無法在擴弓期和保持期內(nèi),形成充足的新骨,是導致復發(fā)的重要原因之一。因此,在上頜快速擴弓過程中,促進骨縫新骨的形成和沉積,是減輕快速擴弓復發(fā)的重要措施。目前有多種方法促進骨縫新骨的形成,這些方法包括低能量激光、轉化生長因子、二磷酸鹽、維生素等。有學者報道硝苯地平可抑制NF-kB的表達,而NF-kB能抑制成骨細胞形成;還有學者報道前腭縫與腭中縫牽張成骨機制類似。本實驗通過大鼠腹腔注射硝苯地平劑量為50mg/kg,每天一次,觀察大鼠前腭縫成骨情況。目的:建立大鼠前腭縫快速擴弓模型,觀察前腭縫中,是否存在NF-kB信號通路,以及成骨細胞的增殖情況與成骨因子OCN、BMP-2的表達情況;硝苯地平在大鼠前腭縫擴大過程中,對NF-kB信號通路的影響,以及對成骨細胞的增殖情況與成骨因子OCN、BMP-2的表達情況。方法:8周齡SPF級雄性大鼠45只,隨機分成3組,A組為陰性對照組(Control group,CM)15只,不擴弓,不用藥;B組為實驗組15只,單純擴弓;C組大鼠15只,在擴弓的同時還腹腔注射硝苯地平50mg/kg。實驗擴弓天數(shù)為1、4、7天,擴弓簧采用0.016英寸奧絲彎制帶圈開大曲,力值為2.00±0.20N,水合氯醛局麻下,將擴弓簧安裝在上頜門牙之間,光固化樹脂固定。擴弓組跟用藥組,均于擴弓后的第1、4、7天處死,取上頜標本,立刻10%福爾馬林溶液固定,拍Micro-CT,測量前腭縫寬度。標本脫鈣6周,通過HE、免疫組化、免疫熒光染色,觀察NF-kB與各項成骨因子表達情況。結果:1.實驗初期,所有參與實驗大鼠體重均在280±10g范圍內(nèi),A組大鼠,體重隨時間均勻增加,B、C組大鼠在擴弓后的前兩天體重下降較明顯,第三天后,體重開始逐漸增加。2.大鼠RME后,前腭縫寬度和組織的形態(tài)變化:大鼠上頜前縫線在拉伸力作用下逐漸變寬,在1、4、7天,寬度隨擴弓時間遞增;Micro-CT在第4天檢測到新骨,呈指狀突起,幾乎與牽張力的方向平行。HE染色,可見前腭縫擴開后,隨著擴弓天數(shù)的增加,膠原纖維形成也在,同時伴隨明顯的新生血管生成;Masson染色后,可見前腭縫擴開后,有明顯的膠原纖維生成,還可見新生軟骨以及軟骨細胞。3.各成骨指標表達情況:免疫組化染色顯示,與空白對照組相比,實驗組的擴弓組與擴弓+硝苯地平組,OCN、BMP-2的表達明顯增多。結論:本研究通過建立大鼠上頜擴弓模型,檢測IL-1β、P65、OCN的表達情況,并比較硝苯地平懸濁液對大鼠上頜前腭縫擴弓后骨改建的影響,可以得出以下結論:1.較大的擴弓力值(2.00±0.20N)能有效打開年輕成年SD大鼠上頜前腭縫。2.在擴弓過程中,有IL-1β表達,隨著擴弓時間的增加;有NF-kB信號通路的激活,隨著擴弓時間的增加,P65表達增多。3.在擴弓過程中,機械力能刺激OCN的表達,并隨著時間增加,OCN表達增多。4.在擴弓過程中,硝苯地平可以通過抑制NF-kB的信號通路的激活,可能有促進骨細胞增殖、OCN表達增多的作用。
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