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奧沙利鉑誘導(dǎo)人舌鱗癌細(xì)胞株Tca8113凋亡及凋亡抑制基因Survivin表達(dá)的改變

發(fā)布時(shí)間:2020-06-02 13:12
【摘要】: 目的:體外研究鉑類抗癌藥奧沙利鉑(L-OHP)能否誘導(dǎo)人舌鱗癌細(xì)胞株Tca8113凋亡以及L-OHP作用過(guò)程中凋亡抑制基因survivin表達(dá)的改變。 方法:應(yīng)用MTT法檢測(cè)L-OHP不同濃度(16、32、64、128、256μmol/L)對(duì)Tca8113細(xì)胞增殖的影響,并確定中效濃度;光鏡和電鏡形態(tài)下觀察中效濃度的L-OHP對(duì)細(xì)胞增殖的影響及凋亡形態(tài),再用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞周期的改變,并定量測(cè)定凋亡率變化;分別應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)方法和RT-PCR研究L-OHP作用于Tca8113細(xì)胞過(guò)程中凋亡抑制基因survivin表達(dá)變化。 結(jié)果:1.5種濃度的L-OHP均能夠抑制Tca8113細(xì)胞的增殖,48~72小時(shí)達(dá)到高峰;2.倒置顯微鏡下Tca8113細(xì)胞形態(tài)發(fā)生了顯著變化:泡化、扭曲、固縮、脫離貼壁生長(zhǎng);透射電鏡下中效濃度的L-OHP作用Tca8113細(xì)胞72小時(shí)后出現(xiàn)了典型的細(xì)胞凋亡形態(tài):細(xì)胞核固縮,染色質(zhì)凝集及凋亡小體形成等;3.流式細(xì)胞儀觀察L-OHP作用后Tca8113細(xì)胞周期阻滯于S期和G2/M期,48h、72h凋亡率變化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),且出現(xiàn)了典型的亞二倍體峰;4.L-OHP作用Tca8113細(xì)胞24、48及72小時(shí)免疫細(xì)胞化學(xué)方法可見survivin不同程度增強(qiáng)表達(dá);5.L-OHP作用Tca8113細(xì)胞24、48及72小時(shí)后RT-PCR法檢測(cè)示survivin mRNA表達(dá)上調(diào),除24h外,其余2個(gè)時(shí)相點(diǎn)加藥組、對(duì)照組的上調(diào)有顯著性差異(p0.05)。 結(jié)論:1.L-OHP體外能誘導(dǎo)人舌鱗癌細(xì)胞株Tca8113發(fā)生凋亡;2.L-OHP體外作用人舌鱗癌細(xì)胞株Tca8113過(guò)程中,能使凋亡抑制基因survivin表達(dá)上調(diào),可能是L-OHP化療耐藥性的機(jī)制之一。
【圖文】:

奧沙利鉑,組圖


圖 3:不同濃度的奧沙利鉑處理 48h(×200)A:對(duì)照組;B:20mg/L 組;C: 40mg/L 組;D:80mg/組圖 4:40mg/L 奧沙利鉑處理不同時(shí)間(×200)A:0h 組;B:24h 組;C: 48h 組;D:72h 組。

奧沙利鉑,對(duì)照組


40mg/L奧沙利鉑處理不同時(shí)間(×200)
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類號(hào)】:R739.8

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2693209

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