發(fā)布時(shí)間：2020-05-29 15:59

【摘要】： 實(shí)驗(yàn)一遺傳性牙齦纖維瘤病病例報(bào)告以及其家系SOS-1基因21號(hào)外顯子突變檢測(cè) 目的： 診斷、分析并治療我省一例遺傳性牙齦纖維瘤(hereditary gingival frbromatosis,HGF)病例,同時(shí)完成其已三代發(fā)病的HGF家系成員SOS-1基因21號(hào)外顯子序列分析,確定突變類型,分析其序列改變與HGF發(fā)病的關(guān)系。 材料和方法： 1.HGF家系概況 2.病例 男,10歲,漢族(Ⅲ-4),患者自1歲左右牙齦開始增生,并逐漸隨年齡增長而加重,于2007年10月來我院就診,就診時(shí)可見牙齦呈球狀向外突出,無明顯牙齦出血及牙齒疼痛。增生牙齦表面光滑呈結(jié)節(jié)狀,質(zhì)地堅(jiān)硬,色澤與正常牙齦相同,探診無出血,牙齒無松動(dòng)。治療：牙周基礎(chǔ)治療后,半年時(shí)間內(nèi)于局部阻滯麻醉下分期行前牙區(qū)、左上后牙區(qū)增生牙齦組織切除術(shù)及牙齦成形術(shù),并去除滯留乳牙術(shù)中出血不多,術(shù)后創(chuàng)面上牙周敷料。術(shù)后一周囑復(fù)方氯己定含漱液3次／1日含漱。 3.抽取10名HGF家系成員外周靜脈血,EDTA抗凝,抽提基因組DNA。其中第Ⅰ代成員2名,Ⅰ-1,Ⅰ-2；第Ⅱ代6名,Ⅱ-1,Ⅱ-3,Ⅱ-5,Ⅱ-7,Ⅱ-8,Ⅱ-9；第Ⅲ代2名,Ⅲ-4,Ⅲ-5。同時(shí)從無家族遺傳史,無牙齦增生病史的1名正常人種提取外周血,EDTA抗凝,抽提基因DNA,作為對(duì)照。1 4.參照文獻(xiàn)合成SOS-1基因21號(hào)外顯子聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction, RCR)引物1對(duì)。 5.對(duì)家系中3名患者(Ⅰ-2,Ⅱ-7,Ⅲ-4)進(jìn)行上述引物引導(dǎo)的PCR擴(kuò)增,對(duì)其PCR產(chǎn)物進(jìn)行直接測(cè)序。 結(jié)果： 1.Ⅲ-4術(shù)后一周后去除牙周敷料,見創(chuàng)面有白色纖維膜覆蓋、無感染、恢復(fù)良好,恢復(fù)牙齦外形。1個(gè)月,3個(gè)月,6個(gè)月,一年隨訪,未見復(fù)發(fā),牙齦外形恢復(fù)良好,面部畸形改善,發(fā)音較前清晰。但牙體排列不整齊,有較多散在牙間隙,錯(cuò)合畸形,故轉(zhuǎn)正畸科會(huì)診進(jìn)行后續(xù)治療。術(shù)后病理切片光鏡下觀察見：牙齦角化上皮略有增厚,上皮釘突延長,上皮下結(jié)締組織中致密粗大的膠原纖維排列成束,內(nèi)有少量毛細(xì)血管和炎細(xì)胞浸潤。病理表現(xiàn)符合HGF的一般特征,未見特殊改變。 2.HGF患者SOS-1基因PCR產(chǎn)物測(cè)序：參照www.ncbi.nlm.gov正常SOS-1序列,三名患者exon21PCR擴(kuò)增區(qū)間的DNA序列無異常發(fā)現(xiàn)。 結(jié)論： 1.該HGF家系SOS-1基因21號(hào)外顯子無明確的基因突變。 2.有必要進(jìn)行該家系SOS-1基因的連鎖標(biāo)記研究,來確定是否由于SOS-1其他外顯子突變導(dǎo)致病變的發(fā)生。 3.該患者及其家系根據(jù)臨床表現(xiàn)以及�？茩z查可被確診為遺傳性牙齦纖維瘤病節(jié)結(jié)型。通過手術(shù)切除后隨訪無明顯復(fù)發(fā)。 第二部分遺傳性牙齦纖維瘤病家系STR連鎖標(biāo)記研究 目的： 完成我省一個(gè)三代顯性遺傳發(fā)病的HGF家系成員SOS-1基因STR連鎖標(biāo)記分析。 方法： 1.HGF家系概況：同實(shí)驗(yàn)一。 2.同實(shí)驗(yàn)一,抽取HGF家系10名成員外周靜脈血,EDTA抗凝,抽提基因組DNA。 3.依據(jù)文獻(xiàn)設(shè)計(jì)HGF緊密連鎖的STR標(biāo)記D2S1346,D2S2220,D2S2331,D2S2238,D2S2328和D2S2739引物6對(duì),對(duì)上述所有HGF家系成員進(jìn)行D2S1346,D2S2220,D2S233 1,D2S2238,D2S2328和D2S2739的PCR擴(kuò)增。 4.PCR產(chǎn)物經(jīng)8%非變性聚丙烯酰胺凝膠垂直電泳,銀染,定影,干燥。 5.按PCR產(chǎn)物泳動(dòng)速度快慢分別將D2S2220的擴(kuò)增產(chǎn)物命名為D2S1346擴(kuò)增產(chǎn)物命名為A1,A2,A3,D2S2220的擴(kuò)增產(chǎn)物命名為B1,B2,B3,將D2S2331的產(chǎn)物依次命名為C1,C2,C3,將D2S2238的產(chǎn)物依次命名為D1,D2,D3,將D2S2328的產(chǎn)物依次命名為E1,E2,E3,將D2S2739的產(chǎn)物依次命名為F1,F2。實(shí)驗(yàn)經(jīng)反復(fù)證實(shí)。 結(jié)果： 該家系已經(jīng)臨床確診的5名HGF患者D2S2328,D2S2238,D2S2331,D2S1346,D2S2220和D2S2739基因型分別為A1B1C1D1E1F1/A3B1C1D1E1F2.A1B1C1D1E1F1/ A2B1C1D3E2F2,A1B1C1D1E1F1/A3B1C1D1E1F2,A1B1C1D1E1F1/A3B1C1D1E1F2, A1B1C1D1E1F1/A3B1C1D1E1F2和A1B1C1D1E1F2/A3B1C1D1E1F2,其中除去Ⅲ-4以外的患者均含有A1B1C1D1E1F1單倍型。而Ⅲ-5為非發(fā)病者的基因型為A1B1C1D1E1F1/A3B1C1D1E3F2也含有A1B1C1D1E1F1單倍型。 結(jié)論： 1.STR多態(tài)位點(diǎn)D2S2328,D2S2238,D2S2331,D2S1346,D2S2220和D2S2739單倍型A1B1C1D1E1F1與該HGF家系SOS-1基因不連鎖。 2.該HGF家系的致病基因不是SOS-1基因。
【圖文】：

鋭峁?3)D2s2328和D2s223s產(chǎn)物聚丙烯酞胺凝膠電泳結(jié)果圖2.3從圖中所示:該家系已經(jīng)臨床確診的5名HGF患者其D2s1346，D2s2220，D252739，D252331，D252328和D252238�；蛐头謩e為AIBICIDIEIFI/A3BICIDIEIFZ，AIBICIDIEIFI/AZBICID3EZFZ， AIBICIDIEIFI/A3BICIDIEIFZ， AIBICIDIEIFI/A3BICIDIEIFZ

圖2.3所示:該家系已經(jīng)臨床確診的5名HGF患252331，D252328和D252238�；蛐虴IFZ，AIBICIDIEIFI/AZBICID3EZFZ，AIBICEIFI/A3BICIDIEIFZ，AIBICIDIEIFI/A3BICIEIFZ。其中除去111一以外的患者均含有AIBICI基因型為AzB一CIDIEIFI/A3BICinrE3FZ也含一訣人BCDEF飛JABCDEF
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R781.4

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1 張帆;遺傳性牙齦纖維瘤病病例報(bào)告以及其家系SOS-1基因21號(hào)外顯子突變及STR連鎖標(biāo)記研究[D];浙江大學(xué);2010年

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本文編號(hào)：2687159