【摘要】： 目的：乳恒牙替換是體內(nèi)嚴(yán)格調(diào)控的生理過(guò)程,破牙細(xì)胞是參與乳牙根生理性吸收的主要的功能細(xì)胞。腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子-6(tumor necrosis factor receptor-associate factor 6,TRAF6)是破牙／骨細(xì)胞分化激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中重要的胞內(nèi)接頭蛋白。本實(shí)驗(yàn)就是研究TRAF6在恒牙和乳牙根生理性吸收區(qū)的表達(dá),在乳牙根吸收不同時(shí)期時(shí)在破牙細(xì)胞中表達(dá)量的變化規(guī)律,嘗試探討TRAF6在乳牙根吸收中的作用。 方法：1.恒牙和處于生理性吸收期的乳牙經(jīng)常溫脫鈣、包埋、切片,分別用TRAF6抗體和TRAF6原位雜交試劑檢測(cè)實(shí)驗(yàn)牙中TRAF6蛋白和mRNA的表達(dá),Im-pro-plas 6.0分析系統(tǒng)測(cè)量?jī)山M實(shí)驗(yàn)牙中破牙細(xì)胞、成牙本質(zhì)細(xì)胞、牙髓成纖維細(xì)胞染色的光密度,SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件分析其不同表達(dá)的規(guī)律； 2.把生理性吸收期的乳牙按牙根吸收長(zhǎng)度不同分為早、中、晚期三組,分別用TRAP抗體、TRAF6抗體和TRAF6原位雜交試劑檢測(cè)實(shí)驗(yàn)牙破牙細(xì)胞中TRAP、TRAF6蛋白和TRAF6mRNA的表達(dá),Im-pro-plas 6.0分析系統(tǒng)測(cè)量三組染色的光密度,SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件分析早、中、晚期其表達(dá)變化的規(guī)律。 結(jié)果：1.乳牙根吸收組破牙細(xì)胞、成牙本質(zhì)細(xì)胞、牙髓成纖維細(xì)胞TRAF6蛋白及mRNA染色陽(yáng)性,恒牙組未觀察到破牙細(xì)胞存在,成牙本質(zhì)細(xì)胞、牙髓成纖維細(xì)胞染色均為陰性。兩組同名細(xì)胞相比較, t檢驗(yàn)得出P0.01。而實(shí)驗(yàn)組中破牙細(xì)胞染色光密度大于成牙本質(zhì)細(xì)胞、牙髓成纖維細(xì)胞,P0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；成牙本質(zhì)細(xì)胞和牙髓成纖維細(xì)胞間比較無(wú)差異。 2.乳牙根吸收時(shí)破牙細(xì)胞中,采用單因素方差分析,TRAP染色早、中、晚期均有差異,P0.05,中期光密度最高；TRAF6蛋白及mRNA染色早、中期較高,兩者之間無(wú)顯著性差異,但與晚期比較,P0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；三種染色光密度值變化與破牙細(xì)胞活性呈正相關(guān)關(guān)系,值變化曲線基本一致。 結(jié)論：1.吸收期乳牙根方吸收陷窩內(nèi)破牙細(xì)胞TRAF6免疫組織化學(xué)染色和原位雜交染色均為強(qiáng)陽(yáng)性棕黃染色,提示TRAF6可能參與該細(xì)胞的分化和功能活性,引起牙乳牙根吸收的進(jìn)行。 2.破牙細(xì)胞TRAP免疫組織化學(xué)染色在乳牙根吸收中期光密度值最大,早期次之,晚期最弱。提示TRAP在乳牙根吸收中期功能最強(qiáng),破骨細(xì)胞最為活躍,晚期最弱。 3.破牙細(xì)胞TRAF6免疫組織化學(xué)染色和原位雜交染色,在乳牙根吸收早、中期光密度值高于晚期,而在早、中期差異不大。提示TRAF6在乳牙根吸收早、中期功能最強(qiáng),破骨細(xì)胞最為活躍,晚期較弱。 4.破牙細(xì)胞TRAP、TRAF6免疫組織化學(xué)和mRNA原位雜交染色在各期變化基本是一致的,與破牙細(xì)胞活性呈正相關(guān)。
【圖文】：

核的破牙細(xì)胞，形態(tài)不規(guī)則，細(xì)胞圓形或卵圓形。吸收早、中期組破牙細(xì)胞數(shù)量多，根面吸收陷窩較深，髓腔內(nèi)成牙本質(zhì)細(xì)胞層也可見活躍的破牙細(xì)胞，胞漿多數(shù)染色較深(見圖3一1、2);晚期吸收組破牙細(xì)胞量少，胞漿多數(shù)染色淺(見圖3一3)，牙髓組織肉芽性變，髓腔內(nèi)以炎細(xì)胞浸潤(rùn)為主，成牙本質(zhì)細(xì)胞層消失。三、TRAF6免疫組化染色結(jié)果同實(shí)驗(yàn)一中實(shí)驗(yàn)組。四、TRAF6mRNA原位雜交結(jié)果同實(shí)驗(yàn)二中實(shí)驗(yàn)組五、圖象分析和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果(見表5)1.各實(shí)驗(yàn)組破骨細(xì)胞圖象分析和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的結(jié)果表5各實(shí)驗(yàn)組破骨細(xì)胞圖象分析方差檢驗(yàn)結(jié)果(I士s)實(shí)驗(yàn)一組實(shí)驗(yàn)二組實(shí)驗(yàn)三組TRAP免疫組化染色55.11士 4.3161.62士 8.2243.56士3.80TRAF6免疫組化染色62.99士 7.2760.12士 8.3157.81士2.78TRAF6mRNA原位雜交染色49.74士 4.4849.02士 7.5245，，61士6.68TRAF6免疫組化染色，TRAF6mRNA原位雜交染色中實(shí)驗(yàn)一組、實(shí)驗(yàn)二組與實(shí)驗(yàn)三組之間比較均為P<0.05，而實(shí)驗(yàn)一、二組之間P>0.05.TRAP免疫組化染色中實(shí)驗(yàn)二組最高，與實(shí)驗(yàn)一組、實(shí)驗(yàn)二組之間均P<0.05
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R78

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 辛蔚妮,凌均h

本文編號(hào)：2672415