【摘要】：目的研究骨碎補柚皮苷和三七總皂苷作用于人牙周膜細胞后，細胞分化和超微結(jié)構(gòu)的影響，為進一步探討其對人牙周膜細胞的作用提供實驗基礎(chǔ)。 方法（1）體外分離培養(yǎng)人牙周膜細胞，運用組織塊法；觀察原代培養(yǎng)的人牙周膜細胞和傳代培養(yǎng)的人牙周膜細胞形態(tài)特征，免疫組化檢測細胞表面標志物，對人牙周膜細胞進行鑒定；（2）采用MTT法檢測不同濃度骨碎補柚皮苷、三七總皂苷、骨碎補柚皮苷和三七總皂苷聯(lián)合作用于人牙周膜細胞后，細胞增殖情況；（3）采用酶動力法檢測骨碎補柚皮苷、三七總皂苷、骨碎補柚皮苷和三七總皂苷聯(lián)合作用于人牙周膜細胞后，堿性磷酸酶活性的變化；（4）采用Western blot法檢測骨碎補柚皮苷、三七總皂苷、骨碎補柚皮苷和三七總皂苷聯(lián)合作用于人牙周膜細胞后，細胞堿性磷酸酶表達；（5）觀察骨碎補柚皮苷、三七總皂苷、骨碎補柚皮苷和三七總皂苷聯(lián)合作用于人牙周膜細胞后超微結(jié)構(gòu)的變化運用透射電鏡。 結(jié)果（1）組織塊法培養(yǎng)所得細胞經(jīng)過表型免疫組化鑒定：波形絲蛋白在人牙周膜細胞內(nèi)表達陽性，角蛋白在人牙周膜細胞內(nèi)表達陰性。（2）實驗組細胞增殖顯著高于對照組，骨碎補柚皮苷增殖最明顯的質(zhì)量濃度為1mg.L~(-1)，三七總皂苷以1mg.L~(-1)質(zhì)量濃度下增殖最明顯，骨碎補柚皮苷和三七總皂苷聯(lián)合作用后，較其余藥物組增殖明顯。（3）骨碎補柚皮苷、三七總皂苷、骨碎補柚皮苷聯(lián)合三七總皂苷均能促進堿性磷酸酶活性增強，活性作用增強最明顯為骨碎補柚皮苷聯(lián)合三七總皂苷組。（4）骨碎補柚皮苷、三七總皂苷、骨碎補柚皮苷聯(lián)合三七總皂苷作用于人牙周膜細胞后，堿性磷酸酶表達優(yōu)于對照組，表達作用最明顯為兩藥聯(lián)合用藥組。（5）骨碎補柚皮苷、三七總皂苷、骨碎補柚皮苷和三七總皂苷聯(lián)合作用下，核糖體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較對照組明顯增多，聯(lián)合用藥組最明顯。 結(jié)論骨碎補柚皮苷和三七總皂苷聯(lián)合作用于人牙周膜細胞，對其成骨分化和超微結(jié)構(gòu)具有協(xié)同作用。
【圖文】：

以 P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。比較不同時間點藥物質(zhì)量濃度組細胞光密度值的差別，不同藥物組與對照組之間的 ALP 活性差異，作析因設(shè)計的方差分析及SNK-q 檢驗。比較不同藥物組與對組之間 ALP 表達差異，作單因素方差分析及 SNK-q檢驗。2結(jié)果2.1 骨碎補柚皮苷、三七總皂苷藥物濃度篩選2.1.1骨碎補柚皮苷藥物濃度篩選經(jīng) MTT 法檢測所得，骨碎補柚皮苷作用于人牙周膜細胞藥物濃度篩選最終為0.01、0.1、1、10 mg.L-1；與對照組比較，1、10 mg.L-1在第 3、5 天時 MTT 的光密度值均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），經(jīng) SNK-q 檢驗發(fā)現(xiàn) 1 mg.L-1組與其他各組測量值差異具有顯著性。（圖 2.1）

經(jīng) SNK-q檢驗發(fā)現(xiàn) 1 mg.L-1組與其他各組測量值差異具有顯著性。（圖2.2）圖 2.2 三七總皂苷對 hPDLCs 生長的影響Fig2.2 Effect of PNS on the growth of hPDLCs注：*與對照組比較 P<0.052.1.3骨碎補柚皮苷聯(lián)合三七總皂苷骨碎補柚皮苷最佳濃度 1mg/L、三七總皂苷最佳濃度 1mg/L、骨碎補柚皮苷最佳濃度 1mg/L 聯(lián)合三七總皂苷最佳濃度 1mg/L 作用后，與對照組比較，，均有促進作用（P＜0.05），經(jīng) SNK-q 檢驗以兩者聯(lián)合作用效果最佳。（圖 2.3）
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R285.5;R780.2

【參考文獻】

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本文編號：2671540